Динамика субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови женщин с привычным выкидышем при предгестационной иммуноцитотерапии

27.04.2015
896

ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова Минздрава России, Москва

Цель работы. Исследование динамики процентного и абсолютного содержания субпопуляций лимфоцитов периферической крови женщин с привычным выкидышем аллоиммунного генеза, включая субпопуляции киллерных клеток с различным фенотипом, естественных Т-регуляторных клеток и клеток, экспрессирующих молекулу CD200, в предгестационной подготовке с использованием иммуноцитотерапии (ИЦТ).
Материал и методы. Фенотип лимфоцитов периферической крови определяли через две недели после иммунизации (на 18–20-й день менструального цикла) у 52 пациенток с привычным выкидышем вне беременности и у 15 фертильных женщин контрольной группы.
Результаты исследования. В процессе проведения двух циклов ИЦТ выявлены изменения в содержании лимфоцитов с киллерной функцией и фенотипом CD56+, CD3-CD56,16+, CD56,16+, CD3+CD16+, а также увеличение абсолютного содержания лимфоцитов с фенотипом CD5+CD19+. Не было выявлено изменений в содержании основных субпопуляций лимфоцитов (CD4+, CD8+, CD19+), клеток, экспрессирующих молекулу CD200, Т-регуляторных клеток.
Заключение. Перспективы дальнейших исследований связаны с изучением маркеров активационного состояния лимфоцитов различных субпопуляций.

Привычная потеря беременности ранних сроков (привычный выкидыш) – диагноз, который, согласно определению ВОЗ, устанавливается в случае произошедших подряд трех и более самопроизвольных прерываний беременности на сроке гестации до 22 недель (код N96 по МКБ-10). Установлено, что женщины с привычным выкидышем на ранних сроках гестации составляют группу риска, в которой существенно повышена вероятность развития плацентарной недостаточности, наступления ранних преждевременных родов, задержки роста плода, излития околоплодных вод при недоношенном сроке беременности, отслойки плаценты во втором и третьем триместрах беременности [1, 2].

Ключевую роль в развитии привычного выкидыша неясного генеза, или идиопатического привычного выкидыша (от 5 до 20% в структуре невынашивания), играют аллоиммунные нарушения [3].

По данным зарубежных авторов, шанс доносить беременность без терапии после трех выкидышей, обусловленных аллоиммунными механизмами, составляет 30%, после четырех – 25%, после пяти – 5% [4, 5].

Поэтому в настоящее время наличие даже двух последовательных выкидышей рассматривается как основание для постановки диагноза «привычный выкидыш», последующего обязательного обследования, в том числе и иммунологического, и оптимизации подготовки к беременности [6].

Показано, что иммуноцитотерапия (ИЦТ) – введение аллогенных лимфоцитов с целью иммунизации женщин с привычным выкидышем при подготовке к беременности (особенно в супружеских парах с совместимостью по HLA-антигенам) способствует формированию состояния иммунной системы, необходимого для успешной имплантации, а во время беременности – для стимуляции развития плаценты и обеспечения нормального развития эмбриона [7, 8].

ИЦТ широко используется для коррекции привычного невынашивания беременности как в России [9, 10], так и за рубежом [11, 12], однако механизмы влияния аллоиммунизации на имплантацию и последующую гестацию остаются неизученными.

Долгое время считалось, что одним из результатов иммунотерапии является подавление агрессивных эффекторных реакций материнской иммунной системы, выражающееся в снижении содержания субпопуляций клеток с естественной киллерной активностью и в продукции блокирующих антител.

Особую значимость в последнем десятилетии приобрели исследования субпопуляции Т-регуляторных клеток с фенотипом CD4+CD25+ и конститутивной экспрессией фактора Foхр3+ (Трег). Считается, что осуществляемая Трег специфическая иммуносупрессия, способствует формированию состояния толерантности, необходимого для реализации гестационных процессов в первом триместре беременности [13]. В связи с этим обсуждается точка зрения, что целью иммунотерапии должна быть не иммуносупрессия, а стимуляция толерантности к аллоантигенам плода отцовского происхождения [14].

Показано, что важная роль в иммунорегуляции принадлежит толерогенной молекуле СD200. В результате взаимодействия CD200 с рецепторами как дендритных клеток, так и клеток с естественной киллерной активностью индуцируется секреция индоламиндиоксигеназы, и они приобретают способность посредством продукции ТФР-β (трансформирующего фактора роста-β) стимулировать генерацию Трег клеток и, соответственно, индуцировать формирование специфической периферической толерантности [15–18].

Исследований, посвященных одновременной оценке особенностей субпопуляций с киллерной активностью, Трег и клеток, несущих CD200, на фоне предгестационной ИЦТ не проводилось.

Целью настоящей работы стало исследование динамики субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови, включая субпопуляции киллерных клеток с различным фенотипом, естественных Трег и клеток, экспрессирующих CD200, в процессе предгестационной ИЦТ женщин с привычным выкидышем аллоиммунного генеза.

Материал и методы исследования

Список литературы

  1. Saraswat L., Bhattacharya S., Maheshwari A., Bhattacharya S. Maternal and perinatal outcome in women with threatened miscarriage in the first trimester: a systematic review. Br. J. Obstet. Gynaecol. 2010; 117(3): 245-57.
  2. Van Oppenraaij R.H., Jauniaux E., Christiansen O.B., Horcajadas J.A., Farquharson R.G., Exalto N.; ESHRE Special Interest Group for Early Pregnancy (SIGEP). Predicting adverse obstetric outcome after early pregnancy events and complications: a review. Hum. Reprod. Update. 2009; 15(4): 409-21.
  3. Carp Howard J.A., ed. Recurrent pregnancy loss: causes, controversies and treatment. Informa UK ltd.; 2007. 290p.
  4. Chong P.J., Matzner W.L., Ching W.T. Benefit of leukocyte immunizations? Fertil. Steril. 1993; 59(1): 247-9.
  5. Chong P.J., Matzner W.L., Ching W.T. Controversy about immunotherapy. Fertil. Steril. 1993; 59(5): 1138-9.
  6. Сидельникова В.М., Сухих Г.Т. Невынашивание беременности. Руководство для практикующих врачей. М.: МИА; 2011. 516с.
  7. Сухих Г.Т., Ванько Л.В. Иммунология беременности. М.: Издательство РАМН; 2003. 400с.
  8. Посисеева Л.В., Малышкина А.И., Бойко Е.Л., Сотникова Н.Ю., Перетятко Л.П., Фетисова И.Н. Реабилитация репродуктивного здоровья супружеских пар с невынашиванием беременности. Иваново: Изд-во Иваново; 2008. 240с.
  9. Петросян Л.А. Оптимизация лимфоцитоиммунотерапии в лечении привычной потери беременности первого триместра: автореф. дисс. … канд. мед. наук. М.; 2009. 24с.
  10. Khonina N.A., Broitman E.V., Shevela E.Y., Pasman N.M., Chernykh E.R. Mixed lymphocyte reaction blocking factors (MLR-Bf) as potential biomarker for indication and efficacy of paternal lymphocyte immunization in recurrent spontaneous abortion. Arch. Gynecol. Obstet. 2013; 288(4): 933-7.
  11. Nonaka T., Takakuwa K., Ooki I., Akashi M., Yokoo T., Kikuchi A., Tanaka K. Results of immunotherapy for patients with unexplained primary recurrent abortions – prospective non-randomized cohort study. Am. J. Reprod. Immunol. 2007; 58(6): 530-6.
  12. Recurrent Miscarriage Immunotherapy Trialists Group. Worldwide collaborative observational study and meta-analysis on allogenic leukocyte immunotherapy for recurrent spontaneous abortion. Am. J. Reprod. Immunol. 1994; 32(3): 55-72.
  13. Saito S., Shima T., Nakashima A., Shiozaki A., Ito M., Sasaki Y. What is the role of regulatory T cells in the success of implantation and early pregnancy? J. Assist. Reprod. Genet. 2007; 24(9): 379-86.
  14. Williams Z. Inducing tolerance to pregnancy. N. Engl. J. Med. 2012; 367(12): 1159-61.
  15. Vacca P., Cantoni C., Vitale M., Prato C., Canegallo F., Fenoglio D. et al. Crosstalk between decidual NK and CD14+ myelomonocytic cells results in induction of Tregs and immunosuppression. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010; 107(26): 11918-23.
  16. Trabanelli S., Ocadlikova D., Evangelisti C., Parisi S., Curti A. Induction of regulatory T cells by dendritic cells through indoleamine 2,3-dioxygenase: a potent mechanism of acquired peripheral tolerance. Curr. Med. Chem. 2011; 18(15): 2234-9.
  17. Clark D.A., Wong K., Banwatt D., Chen Z., Liu J., Lee L. et al. CD200-dependent and nonCD200-dependent pathways of NK cell suppression by human IVIG. J. Assist. Reprod. Genet. 2008; 25(2-3): 67-72.
  18. Clark D.A. Cell-surface CD200 may predict efficacy of paternal mononuclear leukocyte immunotherapy in treatment of human recurrent pregnancy loss. Am. J. Reprod. Immunol. 2009; 61(1): 75-84.
  19. Кречетова Л.В., Хачатрян Н.А., Тетруашвили Н.К., Вторушина В.В., Степанова Е.О., Николаева М.А., Сухих Г.Т. Особенности фенотипа лимфоцитов периферической крови женщин с привычным выкидышем. Акушерство и гинекология. 2014; 10: 27-33.
  20. Porter T.F., LaCoursiere Y., Scott J.R. Immunotherapy for recurrent miscarriage. Cochrane Database Syst. Rev. 2006; (2): CD000112.
  21. Duckitt K., Qureshi A. Recurrent miscarriage. BMJ Clin. Evid. 2011; 2011: pii: 1409.
  22. Farquharson R.G., Stephenson M.D., eds. Early pregnancy. Cambridge University Press; 2012. 308p. Available at: http://ebooks.cambridge.org/
  23. Szpakowski A., Malinowski A., Cieslak J., Nowak M., Wilczyński J.R., Banasik M. et al. The influence of paternal lymphocyte immunization on the selected subpopulations of peripheral blood lymphocytes in women with recurrent spontaneous abortion of unknown etiology. Ginekol. Pol. 2003; 74(4): 288-96.
  24. Патент РФ 2283653. Способ лечения невынашивания беременности. Сидельникова В.М., Сухих Г.Т., Кирющенков П.А., Верясов В.Н.; Заявка № 2004111829; Заявлено 209.04.2004; Опубл. 20.6.2006; Бюл. 26.
  25. Сидельникова В.М. Подготовка и ведение беременности у женщин с привычным невынашиванием. Методические пособия и клинические рекомендации. М.: МЕДпресс-информ; 2011с. 224с.
  26. Tang A.W., Alfirevic Z., Quenby S. Natural killer cells and pregnancy outcomes in women with recurrent miscarriage and infertility: a systematic review. Hum. Reprod. 2011; 26(8): 1971-80.
  27. Takeshita T. Diagnosis and treatment of recurrent miscarriage associated with immunologic disorders: Is paternal lymphocyte immunization a relic of the past? J. Nippon Med. Sch. 2004; 71(5): 308-13.
  28. Liang P., Mo M., Li G.G., Yin B., Cai J., Wu T. et al. Comprehensive analysis of peripheral blood lymphocytes in 76 women with recurrent miscarriage before and after lymphocyte immunotherapy. Am. J. Reprod. Immunol. 2012; 68(2): 164-74.
  29. Yang H., Qiu L., Di W., Zhao A., Chen G., Hu K. et al. Proportional change of CD4+CD25+ regulatory T cells after lymphocyte therapy in unexplained recurrent spontaneous abortion patients. Fertil. Steril. 2009; 92(1): 301-5.
  30. Степанова Е.О., Николаева М.А., Ходжаева З.С., Кречетова Л.В., Зиганшина М.А., Бабаян А.А. и др. Сравнение двух способов фенотипирования лимфоцитов периферической крови у пациенток с невынашиванием беременности. Российский аллергологический журнал. 2012; 1: 296-7.
  31. Krechetova L.V., Nikolaeva M.A., Van’ko L.V., Ziganshina M.M., Golubeva E.L., Stepanova E.O. et al. Optimal detection of serum antipaternal antileukocytic antibodies after injection of allogenic lymphocytes in woman with habitual abortions. Bull. Exp. Biol. Med. 2012; 153(5): 726-9.

Об авторах / Для корреспонденции

Кречетова Любовь Валентиновна, к.м.н., с.н.с., зав. лабораторией клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: k_l_v_@mail.ru
Степанова Елена Олеговна, м.н.с. лаборатории клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (962) 954-44-21. Е-mail: elena2404.07@mail.ru
Николаева Марина Аркадьевна, д.б.н., в.н.с. лаборатории клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: nikolaeva_ma@mail.ru
Вторушина Валентина Валентиновна, к.м.н., врач клинической лабораторной диагностики ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: vtorushina@inbox.ru
Голубева Елена Львовна, к.м.н., врач-лаборант лаборатории клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: e_golubeva@oparina4.ru
Хачатрян Нелли Артуровна, аспирант, 2-е отделение акушерское патологии беременности ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-14-77. E-mail: nelly1986@mail.ru
Тетруашвили Нана Картлосовна, д.м.н., профессор, зав. 2-м отделением акушерским патологии беременности ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: n_tetruashvili@oparina4.ru
Сухих Геннадий Тихонович, академик РАН, д.м.н., профессор, заслуженный деятель науки РФ, директор ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-18-00. E-mail: gtsukhikh@mail.ru

Полный текст публикаций доступен только подписчикам

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь