Акушерство и Гинекология №8 / 2021
Динамика уровня цитокинов в плазме крови недоношенных новорожденных с дыхательными нарушениями различного генеза в раннем неонатальном периоде
1) ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Россия;
2) ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет), Москва, Россия
Цель. Определить динамику уровня цитокинов в плазме крови недоношенных новорожденных с дыхательными нарушениями инфекционного и неинфекционного генеза в раннем неонатальном периоде.
Материалы и методы. В исследование были включены 105 новорожденных детей, родившихся в ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова Минздрава России» в период с января 2019 г. по ноябрь 2019 г. Основную группу составили 92 недоношенных ребенка гестационного возраста (ГВ) 32–36 недель, поступившие в 1-е сутки жизни для обследования и лечения в отделение реанимации и интенсивной терапии новорожденных. В зависимости от установленного диагноза основная группа новорожденных была разделена на три подгруппы: респираторный дистресс-синдром (РДС; n=21), транзиторное тахипноэ новорожденных (ТТН; n=28) и врожденная пневмония (ВП; n=43). Группу контроля составили 13 здоровых ранних доношенных детей ГВ 37 недель.
Цитокиновый профиль плазмы периферической крови новорожденных указанных групп исследовался на 1-е и 7-е сутки жизни. Взятие образцов венозной крови (ВК) осуществлялось в пробирки с антикоагулянтом (ЭДТА). Отбор образцов ВК у детей контрольной группы осуществлялся в 1-е сутки жизни. Оценивали содержание следующих цитокинов, которые принято подразделять на: провоспалительные (IFN-γ, TNF-α, IL-1β, IL-2, IL-5, IL-6, IL-12, IL-17), противовоспалительные (IL-4, IL-10, IL-13), хемокины (IL-8, MCP-1, MIP-1β) и ростовые факторы (IL-7, G-CSF, GM-CSF).
Результаты. В ходе проведенного исследования у недоношенных новорожденных выявлены различия в концентрациях изучаемых цитокинов в начале и в конце раннего неонатального периода по сравнению со значениями, полученными на 1-е сутки жизни в зависимости от генеза дыхательных нарушений. Статистически значимые изменения отмечены для провоспалительных цитокинов (IL-6, INF-γ, TNF-α), хемокинов (IL-8, МCP-1, МIР-1β) и противовоспалительного цитокина IL-10.
Заключение. Определение уровня цитокинов в 1-е сутки жизни может быть использовано для дифференциальной диагностики заболеваний, сопровождающихся развитием дыхательных нарушений у недоношенных новорожденных, а на 7-е сутки жизни – с целью оценки эффективности проводимой терапии. Повышение концентрации IL-6 в 1-е сутки жизни является наиболее информативным из изученных маркеров в плане дифференциальной диагностики между ВП, РДС и ТТН; а соотношение IL-6/IL-10 может использоваться в качестве дополнительного критерия при решении вопроса об отмене или необходимости продолжения антибактериальной терапии недоношенных детей при подозрении на врожденную пневмонию.
Дыхательные нарушения являются одной из наиболее частых причин госпитализации новорожденных в отделение реанимации и интенсивной терапии (ОРИТН) вне зависимости от их гестационного возраста (ГВ). Выяснение генеза дыхательных нарушений у недоношенных новорожденных представляет значительные сложности ввиду неспецифического характера выявляемых симптомов, а также отсутствия надежных лабораторных маркеров синдрома системного воспалительного ответа у недоношенных детей с выраженной морфофункциональной зрелостью. В то же время от точности и своевременности диагностики причин дыхательных нарушений зависит эффективность лечения. Определение цитокинового статуса недоношенных новорожденных может быть полезным в плане дифференциальной диагностики причины выявляемых дыхательных нарушений.
Несмотря на то что изучению уровня цитокинов у новорожденных детей различного ГВ был посвящен ряд ранее опубликованных исследований [1–5], динамика их концентрации в раннем неонатальном периоде при различных перинатальных заболеваниях остается сравнительно мало изученной.
Цель исследования: оценка динамики уровня цитокинов в плазме крови недоношенных новорожденных с дыхательными нарушениями инфекционного и неинфекционного генеза в раннем неонатальном периоде.
Материалы и методы
В исследование были включены 105 новорожденных детей, родившихся в ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова Минздрава России» в период с января 2019 г. по ноябрь 2019 г. Основную группу, составили 92 недоношенных ребенка ГВ 32–36 недель, поступившие в 1-е сутки жизни для обследования и лечения в ОРИТН.
В зависимости от причины дыхательных расстройств дети основной группы были разделены на 3 подгруппы: РДС – дети с респираторным дистресс- синдромом (n=21), ТТН – дети с транзиторным тахипноэ новорожденных (n=28) и ВП – дети с врожденной пневмонией (n=43). Группу контроля составили 13 ранних здоровых доношенных детей ГВ 37 недель. Критериями исключения из исследования были: синдромальная форма наследственной патологии, наличие врожденных пороков, требующих экстренной хирургической коррекции, гемолитическая болезнь новорожденных.
Перед включением в исследование родителями новорожденных было подписано добровольное информированное согласие на участие детей в исследовании. Данное исследование было одобрено этическим комитетом ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России.
Всем новорожденным основной группы с целью выявления/исключения реализации врожденной инфекции проводилось стандартное клинико-лабораторное обследование, включавшее в себя рентгенографию органов грудной полости, анализ гемокультуры, клинический анализ крови с подсчетом абсолютного числа лейкоцитов, тромбоцитов, нейтрофилов и вычисление нейтрофильного индекса (НИ), контроль уровня белков острой фазы воспаления (С-реактивный белок, СРБ). По результатам проведенного клинико-лабораторного и инструментального обследования в возрасте 72 ч жизни ребенка делалось заключение о наличии или отсутствии врожденной инфекции. Спектр инфекционной патологии был представлен исключительно ВП; иных очагов инфекции в изучаемой группе детей не было. Бактериальных, грибковых и вирусных возбудителей при исследовании стерильных локусов (кровь, аспират из трахеи) выявлено не было.
Дифференциальная диагностика между ВП, РДС и ТТН проводилась в соответствии с клиническими рекомендациями [6, 7].
Цитокиновый профиль плазмы периферической крови новорожденных указанных групп исследовался на 1-е и 7-е сутки жизни. Взятие образцов венозной крови (ВК) осуществлялось в пробирки с антикоагулянтом (ЭДТА) в 1-е сутки жизни одновременно с проведением обязательного клинико-лабораторного обследования при поступлении новорожденных в ОРИТН до начала специфической терапии и в динамике повторно на 7-е сутки жизни также одновременно с проведением стандартного клинико-лабораторного обследования. Взятие образцов ВК у детей контрольной группы осуществлялось в 1-е сутки жизни до начала энтерального питания.
Определение содержания цитокинов осуществлялось мультиплексным методом на анализаторе Bioplex 200 (Bio-Rad, США) с использованием коммерческого набора Bio-Plex ProHuman Cytokine 17-plex Assay (Bio-Rad, США). Оценивали содержание следующих цитокинов, которые принято подразделять на провоспалительные (интерферон гамма (IFN-γ), фактор некроза опухоли альфа (TNF-α), интерлейкины (IL-1β, IL-2, IL-5, IL-6, IL-12, IL-17)), противовоспалительные (IL-4, IL-10, IL-13), хемокины (IL-8, моноцитарный хемотаксический фактор-1 (MCP-1), макрофагальный белок воспаления 1β (MIP-1β)) и ростовые факторы (IL-7, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (G-CSF), гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF)). Согласно инструкции производителя тест-системы компании Bio-Rad, для приготовления образцов ЭДТА-плазмы применяли дву...
