Акушерство и Гинекология №7 / 2014

Эффективность диагностики цервикальной интраэпителиальной неоплазии шейки матки с использованием комплекса методов: жидкостной цитологии, двойного иммуноокрашивания p16/Ki67 и ВПЧ тестирования

15 июля 2014

ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва; ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова, Москва

Цель исследования. Оценка эффективности двойного окрашивания p16/Ki67 в сочетании с жидкостной цитологией и тестированием вируса папилломы человека (ВПЧ) при выявлении цервикальной интраэпителиальной неоплазии (CIN) шейки матки.
Материал и методы. Обследовали цитологический и биопсийный материал 148 женщин с патологией шейки матки методами жидкостной цитологии, двойного иммуноокрашивания р16/Ki67 и ВПЧ-тестирования.
Результаты. Максимальную эффективность цитологического метода выявили в случаях ≥CIN2 (чувствительность 96,97% и специфичность 100%), ВПЧ-тестирования – < CIN2 (97,14%,50,0%), иммуноцитохимического метода (ИЦХ) – ≥CIN2 (98,48%, 100,0%).
Заключение. Эффективное использование всех трех методов выявления патологии шейки матки – цитологии, ВПЧ-тестирования и ИЦХ позволяет максимально решить проблему не только диагностики, но и скрининга предрака и рака шейки матки.

Диагностика предраковой патологии шейки матки на стадии интраэпителиальной неоплазии является глобальной актуальной проблемой. Это продиктовано, во-первых, высокой распространенностью рака шейки матки, показатели заболеваемости которым занимают третье место в мире среди женщин репродуктивного возраста [1]; во-вторых, диагностика на стадии цервикальной интраэпителиальной неоплазии (CIN) дает врачу время (10–15 лет) для лечения пациентки и предотвращения развития рака. Следовательно, разработка методов и систем ранней диагностики CIN является первостепенной задачей здравоохранения.

Для ранней диагностики CIN широко применяют цитологический метод – Pap-тест и молекулярные методы выявления ДНК вируса папилломы человека (ВПЧ) [2, 3]. Каждый метод имеет свои сильные и слабые стороны. Цитологический метод, прежде всего жидкостная цитология, отличается повышенной специфичностью, ДНК-тесты – высокой чувствительностью [4, 5]. Недостаточная специфичность ДНК-тестов, особенно у женщин до 30 лет, обусловлена тем фактом, что большая часть ВПЧ инфекций носит транзиторный характер, и лишь 5–10% имеет персистентный статус, вызывая глубокие необратимые неопластические процессы в шейке матки [6].

Поиск новых маркеров патологии шейки матки привел исследователей к белку р16(INK4A) [7, 8], который является продуктом гена CDKN2A и подавляет активность циклин-зависимых киназ 4 и 6, которые регулируют G1-фазу клеточного цикла. Экспрессия этого белка в нормальных клетках ограничена. При ВПЧ-инфекции онкобелок Е7 связывается с белком супрессором опухолей ретинобластомой (Rb), что приводит к деградации последней и, как следствие, к избыточной экспрессии р16 [9]. Выявление атипичных клеток плоского эпителия шейки матки, экспрессирующих одновременно р16 и маркер пролиферации Ki67, указывает на индуцированное дисрегулирование клеточного цикла и обеспечивает более точную диагностику поражений высокой степени тяжести. Первые исследования по определению р16 и Ki67 показали высокую специфичность метода [10]. В связи с этим в настоящее время в Европе проводится многоцентровое исследование по оценке чувствительности и специфичности иммуноцитохимического (ИЦХ) выявления р16/Ki67 в сочетании с цитологией и ВПЧ-тестированием.

Выявление ДНК ВПЧ в настоящее время проводится с помощью реакции гибридизации вирусной ДНК с РНК-зондом (Digene-тест), полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (cobas-тест) и другими способами.

Данные о специфичности и чувствительности всех перечисленных методов неоднозначны.

Целью данной работы была оценка эффективности двойного окрашивания p16/Ki-67 в сочетании с жидкостной цитологией и ВПЧ-тестированием при выявлении CIN.

Материал и методы исследования

Проведено клинико-морфологическое исследование материала, полученного от 4443 женщин, проходивших обследование и лечение в ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России за 2013 г. Обследованные женщины были в возрасте от 17 до 42 лет (средний возраст 28,3±4,5 года). Обследование проводили по общепринятому протоколу: клинический осмотр, взятие мазков в SurePath виалы (BD, США), приготовление цитологических препаратов, окрашенных по Папаниколау, с помощью TriPath процессора (BD, США), оценка мазков по системе «Bethesda» [11]. В 148 случаях с выявленной патологией шейки матки помимо цитологического анализа проводили молекулярно-биологическое исследование с целью изучения экспрессии маркеров p16/Ki-67 в цитологических препаратах, приготовленных из остаточного материала виал. Кроме того, выполняли кольпоскопию с прицельным взятием измененных или подозрительных участков цервикального канала для гистологического исследования и в случаях диагноза ≥CIN2 проводили конизацию шейки матки (67 пациенток). Гисто...

Коган Е.А., Файзуллина Н.М., Ли Ц., Демура Т.А., Козаченко А.В.
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.