Эффективность и безопасность применения топического β-адреноблокатора для лечения ювенильных гемангиом

Ювенильные гемангиомы (ЮГ) – наиболее распространенные опухоли детского возраста, которые, по оценкам различных исследователей, встречаются у 3–12% новорожденных. Новый подход к фармакотерапии ЮГ основан на эффективности применения β-адреноблокатора (β-АБ тимолола), а местная терапия ЮГ β-АБ представляется наиболее актуальной методикой лечения очаговых поверхностных гемангиом. Цель исследования: оценить свойства тимолола in vitro, его клиническую эффективность и безопасность при местной антиангиогенной терапии детей с поверхностными очаговыми ЮГ. Методы. Изучали цитотоксичность, влияние тимолола на метаболизм и активную миграцию клеток in vitro (LDG-тест, WST-тест, миграцию клеток и восстановление конфлюентности монослоя культуры клеток). Проведена оценка клинической эффективности и безопасности β-АБ при лечении детей с поверхностными ЮГ (n=56). Результаты. Проведенные экспериментальные исследования in vitro указывают на отсутствие негативного влияния тимолола на жизнеспособность, миграцию и подвижность эндотелиальных клеток, фибробластов и кератиноцитов. Результаты исследований свидетельствуют о безопасности и высокой клинической эффективности: выздоровление установлено у 87,5%, у 7,1% – значительное улучшение, и у 5,3% эффект от лечения отсутствовал. Побочных эффектов при лечении детей (случаи гипогликемии и нарушений проводимости сердца) не выявлено. Заключение. Результаты исследования позволяют рекомендовать широкое внедрение активной антиангиогенной терапии поверхностных ЮГ неселективным β-АБ тимололом.

Введение

Ювенильные гемангиомы (гемангиомы новорожденных, младенческие гемангиомы) – самые распространенные опухоли детского возраста, которые, по оценкам различных исследователей, встречаются у 3–12% младенцев, принадлежащих к европеоидной расе [1–4]. Ювенильные гемангиомы (ЮГ) – это доброкачественные сосудистые опухоли, возникающие при локальном развитии значительных нарушений регуляции неоангиогенеза [1–4].

В 85–90% случаев ЮГ подвергаются спонтанному регрессу до возраста 6–9 лет [1–5]. До последних лет методы лечения ЮГ включали оперативные методики (эксцизия, эмболизация, лазерное или электрохирургическое удаление, криодеструкция и склеротерапия) и консервативные методы лечения. При обширных сегментарных или осложненных гемангиомах показана системная терапия. Средством выбора ранее служили глюкортикостероиды, которые применялись системно (преднизолон или метилпреднизолон) или внутриочагово (двухфазный бетаметазон, триамцинолон). В отсутствие эффекта от гормональной терапии назначался препарат второй линии – интерферон, а при его неэффективности – винкристин [4–6]. При использовании указанных средств нередко возникают серьезные побочные эффекты: при лечении преднизолоном – катаракта, гипертрофическая кардиомиопатия, диабет, стеатоз печени; при лечении интерфероном – лихорадка, миалгия, лейкопения, гемолитическая анемия, интерстициальный нефрит, значительные неврологические нарушения. Вместе с тем при риске развития серьезных системных или местных осложнений при лечении детей классическими методами не всегда удается достичь желаемого результата [5, 6].

Большой интерес вызывали новые данные о перспективном средстве для фармакотерапии сосудистых новообразований – пропранололе, давно известном в качестве антигипертензивного препарата и используемом не только взрослыми для лечения артериальной гипертензии, но и детьми при кардиальной патологии. Первое описание случайной находки ангиангиогенного эффекта пропранолола – неселективного β-адреноблокатора (β-АБ), произвело революцию в терапии гемангиом и опубликовано сотрудниками госпиталя г. Бордо (Франция) во главе с C. Léauté-Labrèze в 2008 г. [7].

Кроме системного применения β-АБ сегодня накоплен значительный опыт топической терапии очаговых поверхностных ЮГ. Наибольшая клиническая эффективность при местном лечении ЮГ установлена для неселективного β-АБ – тимолола [8]. Местная терапия ЮГ β-АБ представляется наиболее актуальной методикой лечения, т.к. исследования распространенности и клинико-функциональных особенностей установили превалирование поверхностных и очаговых форм ЮГ [9–11]. Вместе с тем отсутствуют исследования профиля безопасности и эффективности длительной топической терапии поверхностных гемангиом.

Целью исследования было оценить свойства тимолола in vitro, его клиническую эффективность и безопасность при местной антиангиогенной терапии детей с поверхностными очаговыми ЮГ.

Материал и методы

Лабораторные исследования. Цитотоксичность тимолола в культурах клеток оценивали на основе измерения концентрации лактатдегидрогеназы (ЛДГ) – LDH-тест (Cytotoxicity Detection Kit Plus, Roche Life Science, Германия). Для определения цитостатической дозы исследования проведены с концентрациями тимолола в растворе 1 мкмоль/л, 10 и 100 мкмоль/л. Результаты теста сравнились с CT50 (цитотоксическая доза для 50% клеток в культуре). LDH-тест проведен в 96-луночном планшете с питательной средой (100 мкл 10% DMEM) и исследуемой культурой клеток (2×104) с добавлением тимолола в указанных концентрациях. Культивирование сред проведено при 37°С и 5% СО2 в течение суток, после чего проведено введение катализатора и красителя для количественной оценки ЛДГ и инактивация 1 моль/л раствора соляной кислоты. Контрольные исследования плотности клеточных культур выполнены с дистиллированной водой. Фотометрический анализ LDH-теста осуществлен на планшет-ридере Phomo (Autobio Labtec Instruments Co., Ltd., Китай) при 492 нанометрах (стандартная длина волны – 620 нм).

Влияние тимолола на метаболическую активность клеток in...

В.В. Дубенский, Р.Ю. Аун