Эффекторные и регуляторные субпопуляции клеток врожденного иммунитета в периферической крови и перитонеальной жидкости женщин с эндометриозом

Цель. Сравнительное изучение особенностей фенотипа субпопуляций клеток врожденного иммунитета в периферической крови и перитонеальной жидкости женщин с эндометриозом в зависимости от степени распространения.
Материалы и методы. Методом проточной цитометрии фенотипировали мононуклеарные клетки периферической крови, взятые до хирургической операции, и перитонеальной жидкости, полученные интраоперационно, у женщин с эндометриозом I–II (n=12) и III–IV (n=28) степени распространения.
Результаты. В периферической крови у женщин с эндометриозом увеличено количество нейтрофилов и соотношение нейтрофилов и лимфоцитов. Значимых изменений в субпопуляциях NК-клеток ни между группами женщин с эндометриозом, ни по сравнению с контрольной группой не отмечено, но в обеих группах наблюдается выраженное уменьшение доли T-регуляторных лимфоцитов с фенотипом CD4+CD25+CD127low/- (P=0,004), снижение количества CD14highCD16low – классических (P=0,038) и увеличение CD14highCD16high – промежуточных моноцитов (P=0,028). В перитонеальной жидкости женщин с эндометриозом выявлено увеличение доли цитотоксических СD3-CD56+CD16+- и регуляторных CD56brightCD16dim-NK-клеток по сравнению с контролем.
Заключение. Изменение соотношения нейтрофилов и лимфоцитов и соотношения субпопуляций моноцитов в кровотоке позволяет предполагать наличие воспалительного процесса на системном уровне. Уменьшение доли Т-регуляторных клеток в периферической крови и увеличение доли цитотоксических и регуляторных субпопуляций NК-клеток в перитонеальной жидкости свидетельствуют о нарушении регуляции иммунных реакций, что является одним из механизмов, способствующих развитию эндометриоза.

Одной из наиболее актуальных проблем современной гинекологии является эндометриоз – сложное гетерогенное хроническое воспалительное заболевание, определяющееся доброкачественным ростом вне матки ткани, подобной эндометрию по морфологическим и функциональным свойствам. Клинически различают следующие формы заболевания: эндометриоидные импланты на поверхности брюшины малого таза и яичников (перитонеальный эндометриоз), кисты яичников (эндометриомы) и солидные образования сложной структуры. Эндометриоидные поражения делят на подтипы: поверхностный перитонеальный, глубокий (инфильтрирующий) и яичниковый (эндометриомы), причем у одного и того же пациента может существовать более одного подтипа. Наиболее распространенной формой заболевания является поверхностный перитонеальный эндометриоз [1–3].

Образование очагов эндометриоидного поражения диагностируется у 7–10% женщин, связано с хронической болью в тазу, бесплодием, усталостью, что оказывает существенное влияние на качество жизни женщины. Несмотря на интенсивные научные и клинические исследования, этиология и патофизиология эндометриоза недостаточно выяснены [4, 5]. В настоящее время большинство исследователей склоняются к мнению о том, что развитие эндометриоза связано с комплексом патологических изменений, включающим в себя генетические и эпигенетические, гормональные, иммунологические, анатомические и другие факторы [6].

Иммунная система, в норме ответственная за обнаружение и удаление аномально растущей ткани, может играть центральную роль в патогенезе эндометриоза [7, 8]. Данное положение подтверждается результатами исследований, свидетельствующих об активном участии иммунной системы в развитии эндометриоза [9–11]. При этом ключевыми эффекторами являются клетки и гуморальные факторы системы врожденного иммунитета (NK-клетки, макрофаги, нейтрофилы, дендритные клетки). Известно, что некоторые субпопуляции эффекторных клеток выполняют и регуляторную функцию.

У женщин с эндометриозом наблюдали изменения в популяциях иммунных клеток, макрофагов, нейтрофилов и дендритных клеток, и нарушение их функции [3, 11–13]. Показано, что у перитонеальных макрофагов нарушен процесс фагоцитоза, а NK-клетки обладают пониженной цитотоксичностью, положительно коррелирующей с тяжестью заболевания [11, 12].

Естественные клетки-киллеры (NK-клетки) обладают такими функциями, как неограниченная MHC цитотоксичность и выработка цитокинов. Субпопуляции NK-клеток, проявляющие функциональные различия в цитотоксичности, продукции цитокинов и регуляторной способности, идентифицируются по интенсивности экспрессии CD16- и CD56-маркеров. NK-клетки с высокой плотностью экспрессии CD56 на клеточной поверхности (CD56bright) и с низкой (CD56dim) обладают различ­ными функциональными свойствами. CD56brightCD16-/dim-NK-клетки считаются эффективными продуцентами цитокинов с иммунорегуляторными свойствами, но способны становиться цитотоксическими при активации, в то время как CD56dim-NK-клетки проявляют большую цитотоксичность, экспрессируя больше иммуноглобулиноподобных рецепторов, а также Fcγ-рецепторы (CD16) [14–16].

Большинство NK-клеток не экспрессируют Т- или В-клеточные рецепторы, распознающие антиген. Но среди них выделяют субпопуляцию NKT-клеток, экспрессирующих Т-клеточный рецептор (TCR). Известны два варианта TCR, обозначаемые как αβTCR и γδTCR, различающиеся составом полипептидных цепей антигенраспознающего участка. Выявляется субпопуляция NK-клеток, экспрессирующих gdTCR, которые, как предполагается, обладают регуляторными свойствами.

Наиболее распространенными иммунными клетками, присутствующими в поражениях эндометриоза, имеющими решающее значение для роста, развития, васкуляризации и иннервации поражений эндометриоза, являются макрофаги, предшественники которых – моноциты находятся в кровотоке и перитонеальной жидкости. Различают две основные субпопуляции моноцитов: классическая (CD14highCD16low) и неклассическая (CD14lowCD16high), идентифицируется также промежуточная субпопуляция (CD14highCD16high) [17, 18]. При различных заболеваниях выявляется изменение количества и соотношения субпопуляций моноцитов [18, 19]. При воспалении классические моноциты перемещаются в ткани, дифференцируются в макрофаги или дендритные клетки [20] и выполняют такие функции, как клиренс апоптотических тел, стимуляция ангиогенеза и восстановление целостности тканей [21]. Неклассические моноциты, участвующие в обеспечении иммунологического контроля сосудистой сети и окружающих тканей, также рекрутируются в ткани во время воспаления, но несколько позже [22, 23].

Изучение иммунных нарушений при эндометриозе проводится на клеточном и молекулярном уровнях, в клинических исследованиях и на экспериментальных моделях, однако до сих пор недостаточно выяснены вопросы о том, какие иммунные механизмы обеспечивают формирование эндометриоидных очагов и какие изменения в содержании молекулярных и клеточных факторов приводят к развитию эндометриоза. Выявлена функциональная роль макрофагов при восп...

Инвияева Е.В., Короткова Т.Д., Вторушина В.В., Кречетова Л.В., Ванько Л.В., Адамян Л.В.