Эритропоэтин сыворотки крови и его плацентарная экспрессия при беременности, осложнившейся преэклампсией

Цель исследования. Определение значимости эритропоэтина сыворотки крови и его плацентарной экспрессии в патогенезе развития преэклампсии.
Материал и методы. В исследовании «случай-контроль» участвовали 11 женщин без преэклампсии, 14 – с умеренной и 14 – с тяжелой преэклампсией. Проанализированы особенности течения беременности и родов, определены адекватность продукции эритропоэтина и его плацентарная экспрессия.
Результаты исследования. При преэклампсии, чаще при тяжелой, зарегистрированы случаи неадекватной продукции эритропоэтина. Коэффициент адекватности продукции эритропоэтина при тяжелой преэклампсии был снижен. Неадекватная продукция эритропоэтина коррелирует с его повышенной плацентарной экспрессией в симпластотрофобласте, эндотелии капилляров и макрофагах стромы ворсин со снижением его экспрессии в эритроцитах капилляров ворсин. Корреляционные связи показателей эритропоэтинового статуса беременных с акушерскими осложнениями (преэклампсия, плацентарная недостаточность) свидетельствуют об однотипных механизмах их развития. Предложена схема участия эритропоэтина в патогенезе развития преэклампсии.
Заключение. Эритропоэтин принимает участие в патогенезе формирования ряда акушерских осложнений, в том числе преэклампсии, однако его значение в развитии этой патологии требует дальнейшего изучения.

Эритропоэтин (ЭПО) является гормоном, ответственным за пролиферацию и дифференцировку клеток, что связано с угнетением апоптоза в ЭПО-чувствительных тканях [1, 2]. Фактором, индуцирующим синтез ЭПО, является гипоксия различного генеза [1], в том числе плацентарная ишемия [2–4]. Предполагается, что экспрессия ЭПО в плаценте играет роль в процессах выживания клеток трофобласта [2]. Кроме того, секреции ЭПО при фетальной гипоксии придают огромное значение в связи с его нейропротективным действием, которое связано с антиапоптозным и ангиогенез стимулирующим эффектами [3].

Преэклампсия (ПЭ) остается одной из основных причин материнской и перинатальной заболеваемости и смертности [5, 6]. Согласно наиболее признанной гипотезе, формирование ПЭ происходит на ранних сроках беременности: ряд предрасполагающих факторов приводит к нарушению инвазии трофобласта, развитию недостаточности маточно-плацентарного кровотока и ишемии плаценты [5, 6].

В настоящее время активно изучается участие ЭПО в патогенезе развития ПЭ, однако сведения об этом достаточно противоречивы [4, 7–10]. Изучение ЭПО-статуса и плацентарной экспрессии ЭПО при беременности, осложнившейся ПЭ, представляет несомненный клинический интерес и расширяет представления о патогенезе формирования и нарастания тяжести ПЭ.

Целью настоящего исследования стало определение значимости ЭПО сыворотки крови и его плацентарной экспрессии в патогенезе развития ПЭ.

Материал и методы исследования

Нами проведено исследование «случай-контроль» 39 беременных женщин, которые получали стационарное лечение в родильном доме клиники ГБОУ ВПО ЮУГМУ Минздрава России. Критерием включения беременных в исследование было информированное согласие женщины на участие в исследовании. Критерии исключения: онкологические заболевания, ВИЧ-инфекция, туберкулез, тяжелая соматическая патология, психические заболевания, наркомания. План исследования соответствует законодательству России, международным этическим нормам и нормативным документам исследовательских организаций, одобрен этическим комитетом ГБОУ ВПО ЮУГМУ Минздрава России. Изучены особенности течения беременности и родов, определена адекватность продукции ЭПО, проведено морфологическое исследование плацент.

В зависимости от наличия ПЭ и степени ее тяжести [7] выделены: 1-я группа (контрольная) – 11 женщин, течение беременности которых не осложнилось развитием ПЭ; 2-я группа – 14 беременных с умеренной ПЭ; 3-я – 14 пациенток с тяжелой ПЭ. Средний возраст женщин 1-й группы составил 27,00±1,67 года, 2-й – 27,63±1,05 года, 3-й – 30,36±1,64 года.

Иммунологические методы: определение ЭПО сыворотки крови матери (почечного и плацентарного происхождения, нельзя исключить наличие ЭПО плодового происхождения) – твердофазный хемилюминесцентный иммуноферментный анализ (сэндвич) с использованием анализатора IMMULITE 2000 EPO (DPC, США). Данный метод определения ЭПО позволяет выявить несколько фракций, идентичных по молекулярной массе, но различающихся по величине их изоэлектрических точек, что свидетельствует о гетерогенности в структуре углеводной части гормона [11]. Рассчитывали коэффициент адекватности продукции ЭПО (КАэпо – отношение логарифма наблюдаемого сывороточного ЭПО к логарифму предполагаемого сывороточного ЭПО, в норме КАэпо 0,8–1,2 свидетельствует об адекватной продукции ЭПО) [12].

Исследовали 11 плацент женщин 1-й группы, 15 – 2-й группы (в том числе 2 плаценты из бихориальной биамниотической двойни), 17 – 3-й группы (в том числе 2 плаценты из бихориальной биамниотической двойни, 3 плаценты из трихориальной триамниотической тройни). Иммуногистохимическое исследование использовали для оценки в симпластотрофобласте, эндотелии капилляров, макрофагах стромы ворсин (плодовая часть плаценты) и фетальных эритроцитах капилляров ворсин плаценты экспрессии ЭПО. В качестве первичных специфических антител использовали моноклональные антитела к ЭПО (N-19): sc-1310-R, Santa Cruz Biotechnology, Inc., California, USA. Количественное исследование для маркера ЭПО проводили в 10 случайно выбранных полях зрения при увеличении 400, подсчитывая количество клеток, дающих интенсивное связывание пероксидазы в 1 мм2. Просмотр и фотосъемку микропрепаратов осуществляли на микроскопе «Leica» (Germany) с использованием цифровой фотокамеры «Carl Zeiss Jena» (Germany).

Все статистические расчеты были выполнены с помощью пакетов программ: SPSS 12.1, Statistica for Windows 6.0, STADIA 6.3 prof. Для оценки различий между группами обследуемых применен аппарат проверки статистических гипотез с использованием критериев Манна–Уитни, χ2 Пирсона; отношение правдоподобия, линейно-линейная связь; Тау Гудмена и Краскала; коэффициент неопределенности при уровне значимости критерия 0,05. Для выявления степени корреляционной зависимости между показателями использовался непараметрический корреляционный анализ с расчетом коэффициента непараметрической корреляции Спирмена.

...

Медведев Б.И., Сюндюкова Е.Г., Сашенков С.Л.