Фенотипическая и функциональная характеристика фагоцитарных клеток в крови недоношенных новорожденных в раннем неонатальном периоде

Цель. Оценка особенностей субпопуляционного состава и функциональной активности лейкоцитов крови недоношенных новорожденных при рождении и в раннем неонатальном периоде в зависимости от гестационного возраста и наличия врожденной инфекционной патологии.
Материал и методы. Проспективное исследование проведено на образцах пуповинной крови 43 недоношенных новорожденных, у 24 из которых выявлялись симптомы врожденного инфекционного заболевания, контрольную группу составили 8 здоровых доношенных новорожденных. Проведено фенотипирование лейкоцитов методом проточной цитофлуориметрии с использованием моноклональных антител к маркерам CD95, CD45, CD14, CD11b, CD16, CD64, CD38, HLA-DR. Интенсивность генерации активных форм кислорода (АФК) клетками цельной крови оценивали методом люминолзависимой хемилюминесценции.
Результаты исследования. Выявлена зависимость содержания активированных фагоцитов и их способности продуцировать АФК от срока гестации. Наличие инфекционной патологии не отражается на экспрессии выявляемых дифференцировочных маркеров фагоцитами, однако влияет на функциональную активность АФК-продуцирующих клеток пуповинной крови. Для раннего неонатального периода характерно увеличение интенсивности экспрессии активационных маркеров на гранулоцитах и повышение функциональной активности клеток. Показано, что врожденный иммунитет недоношенных детей при внутриутробном инфицировании развивается быстрее по сравнению с неинфицированными детьми, при этом выявлено истощение пула моноцитов при активации механизмов иммунной защиты новорожденных, подвергавшихся внутриутробному воздействию патогенов.

Врожденный иммунитет, главными эффекторными клетками которого являются нейтрофильные гранулоциты и моноциты, играет важную роль в защите организма новорожденного от патогенов. Бактериальные инфекции в раннем неонатальном периоде приводят к возникновению серьезных заболеваний и являются одной из основных причин неонатальной и младенческой смертности. Повышенная восприимчивость недоношенных новорожденных к возникновению инфекционной патологии обусловлена многими факторами, в том числе низкой функциональной активностью эффекторных звеньев их иммунной системы [1].

Макрофаги/моноциты и полиморфноядерные фагоциты выступают в качестве первой линии защиты организма от инфекционных агентов, осуществляя фагоцитоз и привлекая впоследствии более специфические факторы адаптивного иммунитета. Активация фагоцитов реализуется через мембранные FcR- и CR-рецепторы [2]. Процесс фагоцитоза индуцирует генерацию и высвобождение кислородных радикалов, осуществляющих, наряду с ферментами гранул, бактерицидную функцию [3]. Кроме того, активированные моноциты и нейтрофилы синтезируют молекулы, способствующие созреванию, дифференцировке, активации эффекторных клеток адаптивного иммунного ответа [4].

При преждевременном рождении ребенка повышается его восприимчивость к инфекционным заболеваниям в связи с наличием дефицита ряда факторов иммунной системы [5]. На сегодняшний день имеется мало сведений о различиях в субпопуляционном составе лейкоцитов пуповинной и периферической крови новорожденных в зависимости от гестационного срока и наличия инфекции. Недостаточно представлены данные, характеризующие особенности экспрессии поверхностных рецепторов на фагоцитах и способность генерировать активные формы кислорода (АФК) клетками пуповинной и периферической крови недоношенных новорожденных в раннем неонатальном периоде.

Целью данной работы стало определение особенностей субпопуляционного состава и функциональной активности лейкоцитов пуповинной и периферической крови у детей при рождении и в раннем неонатальном периоде в зависимости от гестационного возраста и врожденной инфекционной патологии.

Материал и методы исследования

Исследовались образцы пуповинной крови 51 ребенка, рожденного путем операции кесарева сечения в ФГБУ НЦАГиП им. В.И. Кулакова в 2013–2014 году. Родители новорожденных детей подписывали информированное согласие на проведение обследования. Все дети в зависимости от гестационного возраста были разделены на 2 группы: I – доношенные дети (n=8) и II – 
недоношенные (n=43). В группу доношенных вошли только здоровые дети. Группа недоношенных детей была разделена на две подгруппы: новорожденные без признаков инфекции (IIа, n=19) и новорожденные, у которых были выявлены инфекционные заболевания (IIб, n=24). У недоношенных детей отмечались дыхательные нарушения: в подгруппе IIa в качестве основного диагноза выступал респираторный дистресс-синдром, в подгруппе IIб  врожденная пневмония. Диагноз устанавливался на основании рентгенологической картины легких, наличия или отсутствия изменений в клиническом анализе крови, характерных для воспаления, уровня С-реактивного белка и прокальцитонина в сыворотке крови [6]. Новорожденные дети с врожденными пороками развития, врожденным сепсисом, гемолитической болезнью новорожденных, а также рожденные от матерей, подвергавшихся иммуносупрессивной терапии, были исключены из данного исследования.

Проспективное обсервационное исследование проводилось на базе отделения реанимации и интенсивной терапии новорожденных отдела неонатологии и педиатрии ФГБУ НЦАГиП им. В.И. Кулакова Минздрава России. В зависимости от степени дыхательных нарушений проводились различные виды респираторной поддержки. Антибактериальная терапия в первые 72 часа проводилась всем детям до установления окончательного диагноза на 3-и сутки жизни и была продолжена курсом 7–10 дней у детей с врожденной пневмонией.

Беляева А.С., Балашова Е.Н., Ванько Л.В., Матвеева Н.К., Милая О.В., Кречетова Л.В., Ионов О.В., Зубков В.В., Дегтярев Д.Н.