Функциональное состояние тромбоцитов и свертываемость крови в динамике физиологической беременности

Цель: Выявление изменений гемостаза в течение здоровой беременности.
Материалы и методы: У 38 здоровых беременных женщин исследовали в динамике сократительную функцию тромбоцитов по степени контракции сгустков крови в сопоставлении с маркерами активации тромбоцитов, показателями гемограммы, коагуляционного гемостаза и анализом протромботических генетических полиморфизмов.
Результаты: Установлено, что с первых недель физиологической беременности до родоразрешения происходит умеренное, но статистически значимое прогрессирующее угнетение контракции сгустков крови. Снижение способности сгустков крови к сжатию может быть связано с физиологической тромбоцитопенией, частичной фоновой активацией и истощением тромбоцитов на фоне гиперкоагуляции, а также с гиперфибриногенемией. У 23/28 (82%) беременных выявлено преходящее снижение степени контракции сгустков ниже референсных значений в промежутках между 18 и 24 неделями беременности, что коррелирует со сроками плацентации, указывая на возможные локальные внутри­плацентарные механизмы участия тромбоцитов в течении физиологической беременности.
Заключение: Полученные результаты указывают на информативность лабораторного изучения тромбоцитарного гемостаза при беременности, включая сократительную функцию тромбоцитов.

Вклад авторов: Литвинов Р.И., Сафиуллина С.И. – концепция и дизайн исследования, написание статьи; Сафиуллина С.И. – сбор клинического материала; Евтюгина Н.Г., Пешкова А.Д. – проведение лабораторных исследований; Литвинов Р.И, Евтюгина Н.Г., Пешкова А.Д. – обработка и анализ данных.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов по представленной статье.
Финансирование: Работа выполнена при поддержке Программы стратегического академического лидерства Казанского федерального университета (ПРИОРИТЕТ-2030).
Благодарности: Авторы глубоко признательны aкадемику РАН, профессору Фазоилу Иноятовичу Атауллаханову
за помощь в работе и ценные консультации. Авторы выражают благодарность компании ООО «ГемаКор» (Москва)
за предоставление регистратора тромбодинамики, использованного в данной работе.
Одобрение Этического комитета: Исследование одобрено Этическим комитетом Казанского (Приволжского) федерального университета (протокол №3 от 23.03.17).
Согласие пациентов на публикацию: Пациенты подписали информированное согласие на публикацию своих данных.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу
у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Сафиуллина С.И., Евтюгина Н.Г., Пешкова А.Д., Литвинов Р.И. Функциональное состояние тромбоцитов и свертываемость крови в динамике физиологической беременности.
Акушерство и гинекология. 2023; 6: 51-59
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2023.135

Физиологическая беременность характеризуется адаптивной перестройкой системы гемостаза по типу гиперкоагуляции, подготавливающей организм матери к угрозе кровопотери в родах и раннем послеродовом периоде и поддерживающей нормальное функционирование фетоплацентарного комплекса [1]. На приобретенную гиперкоагуляцию во время физиологической беременности указывают глобальные гемостатические тесты, повышение в крови концентрации факторов свертывания, снижение активности естественных антикоагулянтов, снижение активности ферментов фибринолитической системы [2–4]. Физиологическая гиперкоагуляция достигает максимума к родам с нормализацией в течение 4–6 недель после родов [5].

Уровень тромбоцитов при нормально протекающей беременности может оставаться неизменным [4] или снижаться до умеренной тромбоцитопении [6, 7], которая объясняется естественной гемодилюцией вследствие увеличения объема циркулирующей крови [8]. Другим возможным механизмом является повышенная секвестрация и расход тромбоцитов в маточно-плацентарном кровообращении, а также депонирование в селезенке, перфузия которой во время беременности увеличивается. Изменения функциональной активности тромбоцитов и их роль во время физиологической беременности изучены намного меньше, по сравнению с коагуляционным гемостазом, и характеризуются противоречивыми результатами [9–12].

Важно отметить, что, несмотря на локальную активацию и секреторную активность тромбоцитов в области имплантации [13], в нормальной плаценте нет признаков микротромбоза. Это дает основание предполагать, что главное функциональное предназначение тромбоцитов во время беременности может быть связано не с их гемостатическими и тромбогенными свойствами, а заключаться в чем-то другом, например, в доставке цитокинов к месту инвазии хориона посредством секреции содержимого α-гранул [14]. Таким образом, функция тромбоцитов при физиологической беременности не до конца понятна, что диктует необходимость дальнейшего исследования количественных и качественных изменений тромбоцитов в крови здоровых женщин на разных сроках нормальной беременности.

Исходя из сказанного, целью работы было изучение функционального состояния тромбоцитов в сопоставлении с коагуляционным гемостазом в динамике физиологической беременности.

Материалы и методы

Общая характеристика клинического материала

Исследование проведено на образцах крови 38 беременных женщин в возрасте от 23 до 41 года (средний возраст 29 (4) лет) с неотягощенным акушерским анамнезом. Исследование проводили при наличии письменного согласия обследованных и согласно требованиям Этического комитета Казанского (Приволжского) федерального университета (протокол №3 от 23.03.17). Критериями включения в исследование были отсутствие личной и семейной истории тромбозов и отсутствие приема антикоагулянтов или антитромбоцитарных препаратов на протяжении беременности. Исследование проводили в динамике до беременности и на разных сроках беременности – всего от 3 до 11 раз – и группировали результаты по триместрам. При обобщении результатов оказалось, что некоторые обследованные образовывали только группу I триместра, некоторые входили в первую и вторую группы, другие – во вторую и третью и т.д. Таким образом, группы были неоднородны по составу и при статистическом анализе рассматривались как независимые.

Клиническая и генетическая характеристика обследованных беременных представлена в таблице 1.

Обращает внимание относительно высокая частота полиморфизмов ITGA2 19/40 (47%) и PAI-1 22/40 (55%), что согласуется с ранее опубликованными данными о распространенности данных полиморфизмов в популяции [15].

Клинико-лабораторные методы исследования

Кровь для исследования брали натощак из антекубитальной вены в вакутейнер с 3,8% цитратом натрия, смешивая в соотношении 9:1 по объему, с последующим разделением на несколько проб, как описано ранее [16]. Первую пробу использовали для изучения контракции сгустка крови. Вторую пробу крови центрифугировали при 200g в течение 10 минут при комнатной температуре, отбирали богатую тромбоцитами плазму и использовали для проточной цитометрии. Часть богатой тромбоцитами плазмы повторно центрифугировали при 2000g в течение 10 минут, отбирали бедную тромбоцитами плазму и использовали для определения рутинных параметров гемостаза. Для проведения теста тромбодинамики использовали бестромбоцитную плазму, которую получали путем дополнительного центрифугирования бедной тромбоцитами плазмы в течение 5 мин при 10 000g при комнатной температуре. Отдельный образец крови стабилизировали ЭДТА (конечная концентрация 1,6 мг/мл) для гематологического и генетического анализов. Стабилизированную кровь хранили и обрабатывали при комнатной температуре и использовали не позднее 4 ч после взятия.

Определение степени контракции сгустков крови проводили оригинальным методом, основанным на опт...

Сафиуллина С.И., Евтюгина Н.Г., Пешкова А.Д., Литвинов Р.И.