Генный полиморфизм как фактор, предрасполагающий к привычным потерям беременности

Цель исследования. Выявить генетические полиморфизмы у женщин, предрасполагающие к привычному невынашиванию беременности.
Материал и методы. Проведено исследование генетических полиморфизмов в сыворотке крови у 100 женщин. I группу составили пациентки с привычным невынашиванием беременности (n=70), которые были разделены на подгруппы в зависимости от срока и генеза гестационных потерь: Ia – пациентки с привычными ранними потерями (до 22 недель беременности, n=30), Ib – пациентки с очень ранними и ранними преждевременными родами (с 22 до 32 недель беременности, n=30), I c – пациентки с антенатальной гибелью плода в анамнезе (после 22 недель беременности, n=10). Группу контроля (II) составили пациентки с неосложненным течением беременности и наличием не менее 2 своевременных родов в анамнезе (n=30).
Результаты исследований. Получены достоверные различия по распределению генотипов и аллелей генов COL1A1: C-1997A C>A (rs 1107946), IL-15 RA: 364 (361) A>C (rs 2296135) в группе беременных с ранними выкидышами при сравнении с контрольной, достоверные различия по распределению генотипов и аллелей генов IL-8: -251 A>T (rs 4073), FN1: 5349+203 T>C (rs2304573) в группе женщин, имеющих в анамнезе ранние преждевременные роды, также выявлены достоверные различия по распределению генотипов и аллелей полиморфных генов IL-1b: -31 T>C (rs1143627), IL-1b: -511 G>A (rs16944), FN1: 5349+203 T>C (rs2304573), FN1: 1819+7 A>T (rs3796123) в группе женщин с антенатальной гибелью плода в анамнезе при сравнении с контрольной группой.
Заключение. Определение генетических полиморфизмов на этапе планирования беременности позволят прогнозировать течение предстоящей беременности, а также сформировать группы риска по невынашиванию беременности для проведения более тщательной предгестационной подготовки и определения тактики ведения беременности.

Проблема привычного невынашивания беременности остается актуальной, так как 3–5% супружеских пар страдают этой патологией, и в настоящее время нет тенденции к снижению [1]. По определению ВОЗ привычным невынашиванием беременности считаются последовательные потери трех и более беременностей в одном браке. В нашей стране, как и в некоторых европейских странах, принято уже после двух последовательных гестационных потерь проводить более углубленное обследование супружеской пары для своевременного проведения предгестационной подготовки.

Этиология привычного невынашивания беременности мультифакторна, часто имеет место воздействие сразу нескольких факторов – генетических, эндокринных, иммунологических (аутоиммунных и аллоимунных), инфекционных, тромбофилических, анатомических [2–4].

По данным литературы в 50% случаев ранних выкидышей имеют место хромосомные аномалии и только в 1–2% случаев хромосомные аномалии выявляются при гестационных потерях после 12 недель [5].

В современном мире планирование беременности происходит в более позднем репродуктивном возрасте, в связи с чем реализация генетически обусловленного риска потерь беременностей имеет место с большей частотой. В этой связи актуален поиск генетических маркеров, предрасполагающих к прерыванию беременности на ранних и поздних сроках.

В последнее время большое внимание уделяется углубленному изучению генетических аспектов в невынашивании беременности, особенно случаев потерь беременности с неясной этиологией, в связи с чем исследование генетических полиморфизмов представляет большой научный и практический интерес.

В этой связи целью данного исследования было изучить роль генетических факторов в реализации привычных потерь беременности неясного генеза на ранних и поздних сроках в сравнении с женщинами с ненарушенной репродуктивной функцией.

Материал и методы исследования

Нами были обследованы 100 женщин. I группу составили пациентки с привычным невынашиванием беременности (n=70), которые были разделены на подгруппы в зависимости от срока и генеза гестационных потерь: Ia – пациентки с ранними гестационными потерями (до 22 недель беременности, n=30), Ib – пациентки с очень ранними и ранними преждевременными родами (c 22 до 32 недель беременности, n=30), Ic – пациентки с антенатальной гибелью плода в анамнезе (после 22 недель беременности, n=10). Группу контроля (II) составили пациентки с неосложненным течением беременности и наличием не менее двух своевременных родов в анамнезе (n=30).

Средний возраст обследуемых составил 35±3,6 года; среднее число беременностей в анамнезе в I группе составило 4,8±0,7, во II группе – 3,1±0,5.

Критерием включения пациенток в I группу исследования было наличие в анамнезе не менее 2 самопроизвольных последовательных потерь беременности, не связанных с аномалиями развития или хромосомной патологией плода.

Критериями исключения из исследования были: наличие анатомических причин привычных потерь беременности (врожденные пороки развития половой системы, наличие миомы матки больших размеров или с центрипетальным ростом узла, значительно деформирующего полость матки, наличие внутриматочных синехий), аномалии кариотипа родителей, наличие совместимости супругов по системе HLA II класса по 3 и более аллеям, наличие высоких титров антифосфолипидных антител, наличие выраженных признаков тромбофилии по данным лабораторных исследований.

В работе проводилось исследование полиморфизмов генов различных типов коллагена: COL1A1 (rs1800012, rs1107946), COL2A1 (rs1635529), COL3A1 (rs1800255), COL4A1 (rs16975492), COL4A3 (rs1882435); генов, кодирующих интерлейкины, их рецепторы и рецепторные антагонисты: IL1α (Interleukin 1α – rs1800587), IL1B (Interleukin 1B – rs1143634, rs1143627, rs16944), IL1R1 (Interleukin 1 receptor, type I – rs2234650), IL1RN (Interleukin 1 receptor antagonist – rs315952), IL4 (Interleukin 4 – rs2243250, rs2070874), IL4R (Interleukin 4 receptor – rs1801275), IL6 (Interleukin 6 – rs1800795), IL6R (Interleukin 6 receptor – rs2228145), IL8 (Interleukin 8 – rs4073), IL10 (Interleukin 10 – rs1800872, rs1800896), IL12B (Subunit beta of interleukin 12 -rs3212227), IL15RA (interleukin-15 receptor antagonist – rs2296135), IL18 (Interleukin 18 – rs1946519, rs187238, rs1946518); генов, кодирующих матриксную металлопротеиназу-2 и ее ингибитор: MMP2 (matrix metalloproteinase 2 – rs243865, rs2285053), TIMP2 (tissue inhibitor of metalloproteinases 2- rs2277698); генов, кодирующих фибронектин 1 – FN1 (fibronectin 1 – rs2304573, rs3796123) и фактор роста фибробластов 1 – FGF1 (fibroblast growth factor 1- rs34003).

Выделение ДНК проводили по методу Higuchi (R. Higuchi, H. Erlich, 1989) с некоторыми модификациями. 0,5 мл крови, взятой на EDTA в качестве антикоагулянта, смешивали в 1,5 мл микроцентрифужных пробирках типа Эппендорф с 0,5 мл лизирующего раствора, состоящего из 0,32М сахарозы, 10 мМ Трис-HCl рН 7,5, 5 мМ MgCl, 1% Тритона Х-100, центрифугировали в течение 1 мин при 10 000 об/мин, супернатант удаляли, а осадки клет...

Алегина Е.В., Тетруашвили Н.К., Агаджанова А.А., Трофимов Д.Ю., Донников А.Е.