Гонадотоксичные эффекты антиретровирусной терапии у ВИЧ-инфицированных женщин

Цель. Изучить копийность митохондриальной ДНК (мтДНК) в кумулюсных клетках у ВИЧ-инфицированных женщин, принимающих антиретровирусную терапию (АРВТ).
Материалы и методы. Проспективное клиническое исследование проведено у 191 пациентки, которые обратились для проведения программ ВРТ. Основная группа исследования – 95 женщин с ВИЧ-инфекцией, контрольная – 96 серонегативных по ВИЧ пациенток. Выполнено 89 и 113 лечебных циклов соответственно. Количественная оценка копийности мтДНК проведена в 78 и 111 образцах кумулюсных клеток соответственно с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени.
Результаты. «Стаж» ВИЧ-инфекции составил 8 лет (6;11), преобладала 3 субклиническая стадия заболевания (61,05%). Все пациентки получали АРВТ, медиана продолжительности приема препаратов – 4 года (2;6,5). Пациентки обеих групп были сопоставимы по возрасту (34 и 34 года; р=0,16), индексу массы тела (22 и 22 кг/м2; р=0,62), длительности (6,9 и 5,2 года; р=0,12) и факторам бесплодия. Оценка исходов программы ЭКО показала более низкую частоту биохимической (19,2% и 36,5%; р=0,03), клинической беременности (11,5% и 31,3%; р=0,008) и родов живым плодом (7,7% и 23,9%; р=0,007) у ВИЧ-инфицированных пациенток по сравнению с ВИЧ-серонегативными женщинами. Копийность мтДНК в клетках кумулюса у женщин с ВИЧ-инфекцией была статистически значимо ниже, чем у пациенток без ВИЧ-инфекции (566,7 (229,1) и 639,7 (197) относительных единиц (о.е.); р=0,02). Выявлена обратная зависимость уровня мтДНК в клетках кумулюса от длительности АРВТ (r=-0,228; р=0,04). При использовании АРВТ более 1 года содержание мтДНК в кумулюсных клетках составило 505,3 (175) о.е., что было статистически значимо ниже, чем в контрольной группе (639,7 (197,9) о.е.; р=0,001).
Заключение. Низкая частота наступления беременности в программах ЭКО у женщин с ВИЧ-инфекцией обусловлена гонадотоксичными эффектами АРВТ.

Кумулятивное число зарегистрированных случаев ВИЧ-инфекции в Российской Федерации (РФ) составляет 1 408 264 человек, при этом 510 495 ВИЧ-позитивных получали антиретровирусную терапию (АРВТ) (данные по состоянию на 31 октября 2019 г.) [1]. Наиболее высокий уровень пораженности ВИЧ-инфекцией наблюдается в возрастной группе 30–44 года. В гендерной структуре преобладают мужчины (62%), однако в последние годы наблюдается увеличение доли женщин, живущих с ВИЧ. По некоторым данным, к концу 2019 г. диагноз ВИЧ-инфекции имели около 500 000 женщин в России, многие из которых планируют рождение ребенка [2, 3]. Использование АРВТ, наряду с улучшением качества и существенным увеличением продолжительности жизни, позволяет пациентам данной группы реализовать репродуктивную функцию, а при сохраненной фертильности у обоих супругов – самостоятельно, без использования вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) [4]. Однако имеются данные ряда исследований о снижении фертильности у женщин с ВИЧ-инфекцией [2, 5, 6]. Так, Parsonset et al. (2000) показали, что частота встречаемости бесплодия среди пациенток с ВИЧ-инфекцией на 37% больше, чем у женщин без ВИЧ-инфекции [7].

ВРТ являются не только мерой профилактики инфицирования здорового партнера в дискордантных по ВИЧ парах, но и возможностью реализации репродуктивной функции. Однако, по разным данным, частота наступления беременности в программе экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) у пациенток с ВИЧ-инфекцией колеблется от 6,7% до 24,1%, что существенно ниже в сравнении с женщинами без ВИЧ-инфекции [2, 6, 8]. Большинство ученых объясняют это негативным влиянием препаратов АРВТ на качество ооцитов и их способность к оплодотворению. Известно, что нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы (НИОТ), которые всегда используются в схемах АРВТ, ингибируя активность обратной транскриптазы ВИЧ, нарушают процесс репликации вируса. Однако данная группа препаратов также способна подавлять гамма-полимеразу человека, которая необходима для репликации митохондриальной ДНК (мтДНК); как результат, наблюдается снижение содержания мтДНК, увеличивается уровень ее мутации [9, 10, 11].

В литературе имеются лишь единичные исследования копийности мтДНК ооцитов у ВИЧ-положительных женщин, получающих АРВТ. Так, Lopez et al. (2008) впервые показали, что в ооцитах ВИЧ-позитивных пациенток с бесплодием, принимающих АРВТ, в 32% случаев наблюдалось истощение мтДНК, по сравнению с контролем [12]. В исследовании Bostan et al. (2010) НИОТ ставудин индуцирует деплецию мтДНК в ооцитах мышей, что может нарушать их способность к оплодотворению и влияет на жизнеспособность эмбрионов [13].

Небольшое количество исследований, возможно, связано с этическими проблемами использования зрелой, способной к оплодотворению яйцеклетки, так как оценка копийности мтДНК в ооцитах представляет собой инвазивную процедуру. Неинвазивным маркером, отражающим качество ооцитов, являются митохондрии кумулюсных клеток. В работе Pawlak et al. (2015) было обнаружено, что количество копий мтДНК в ооцитах свиней коррелирует с количеством копий мтДНК в клетках кумулюса. Более того, мтДНК кумулюcных клеток способствует нормальному развитию яйцеклетки [14]. Исследований по изучению копийности мтДНК в кумулюсных клетках у женщин с ВИЧ-инфекцией не опубликовано.

Таким образом, на сегодняшний день отсутствуют однозначные данные о влиянии ВИЧ-инфекции и/или АРВТ на качество гамет как показатель эффективности программ ВРТ у женщин с ВИЧ-инфекцией, что явилось основанием для проведения настоящего исследования.

Цель – изучить копийность мтДНК в кумулюсных клетках у ВИЧ-инфицированных женщин, принимающих АРВТ.

Материалы и методы

Проспективное клиническое исследование проведено у 191 пациентки, которые обратились для проведения программ ВРТ. Основную группу исследования составили 95 женщин с ВИЧ-инфекцией, контрольную – 96 серонегативных по ВИЧ пациенток. Выполнено 89 и 113 лечебных циклов соответственно. На этапе анализа исходов программы ЭКО были исключены 25 пациенток с коинфекцией гепатитом С и 19 конкордантных пар. Количественная оценка копийности мтДНК проведена в 78 и 111 образцах кумулюсных клеток соответственно. Критерии включения в основную группу: наличие ВИЧ-инфекции, 3 субклиническая, 4а, 4б, 4в стадии, фаза ремиссии; прием АРВТ, неопределяемая вирусная нагрузка в 2 последовательных исследованиях, сделанных с интервалом не менее 3 месяцев; информированное согласие на участие в настоящем исследовании. Критерии исключения: коинфекция вирусными гепатитами В, С, ВИЧ-положительный статус партнера. Критерии невключения: наличие противопоказаний к проведению ВРТ. Критерии включения в группу контроля: ВИЧ-серонегативный статус обоих супругов, селективный перенос одного эмбриона.

Статус пациенток по ВИЧ-инфекции оценивали на основании данных о стадии и фазе заболевания, уровнях вирусной нагрузки, CD4+, CD8+ лимфоцитов и длительности, а также составе АРВТ.

Стимуляцию суперовуляции проводил...

Митюрина Е.В., Перминова С.Г., Селимова Ф.Н., Бурменская О.В., Козырина Н.В., Кравченко А.В.