Акушерство и Гинекология №8-2 / 2012
Грубозернистая деструкция цитоплазмы ооцитов в цикле экстракорпорального оплодотворения: ультраструктурный анализ
Цель исследования. Анализ ультраструктурной организации ооцитов с грубозернистой деструкцией цитоплазмы, полученных в процессе лечения бесплодия методом ЭКО.
Материалы и методы. Пациентка 31 г с первичным трубно-перитонеальным бесплодием в течение 5 лет. Проведена стимуляция по короткому протоколу, получено 11 ооцитов: 2 находились на стадии MII, 6 — MI, 3 — GV. Все ооциты имели выраженную центральную гранулярность. Оплодотворение произошло только в одном зрелом ооците методом ИКСИ, однако дробление зиготы отсутствовало. Незрелые ооциты были зафиксированы в день аспирации и отправлены на ультраструктурное исследование.
Результаты исследования. Электронно-микроскопическое исследование ооцитов выявило деструктивные изменения цитоплазматических компонент: кластеризация органелл в клетке, набухание цистерн гладкого эндоплазматического ретикулума, исчезновение митохондрий и их вакуолизацию.
Выводы. Наблюдаемые ультраструктурные изменения ооцита могут отражать деструктивные процессы, связанные с начавшимся апоптозом, при котором, не смотря на наступившее оплодотворение, дальнейшее эмбриональное развитие клетки невозможно
Анализ морфологии ооцитов, полученных в циклах экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) — необходимый и важный этап успеха цикла преодоления бесплодия. Особо пристального внимания заслуживают патологии цитоплазматического компартмента, которые, по некоторым данным, являются индикаторами генетических, эпигенетических и метаболических дефектов, индуцирующих патологическое развитие эмбрионов человека [1].
Грубозернистая центрально выраженная деструкция цитоплазмы ооцита — достаточно редко встречаемая аномалия женских половых клеток, которая может поражать как всю когорту ооцитов, так и некоторые. В настоящий момент опубликовано несколько работ, посвященных изучению ооцитов с центрально расположенной гранулярностью [1, 2, 3]. S. Kahraman с коллегами не выявили корреляции между центрально расположенной гранулярностью ооцитов и дальнейшим развитием эмбрионов за исключением количества развивающихся беременностей, которое оказалось значительно ниже в группе ооцитов с гранулярностью. Авторы предполагают, что гранулярность служит признаком цитоплазматической незрелости. Данная аномалия может поражать как все ооциты пациентки, так и некоторые из полученной когорты, при этом у некоторых женщин во всех попытках ЭКО ооциты имеют данную патологию, независимо от протокола стимуляции суперовуляции.
B. Balaban с коллегами, напротив, отмечали снижение выживаемости после криоконсервации и нарушение развития эмбрионов, полученных из ооцитов с центральной гранулярностью [1]. Van Blerkom (1995) показал, что ооциты MII с грубозернистой деструкцией цитоплазмы имеют более низкий внутриклеточный рН, содержание аденозинтрифосфорной кислоты (АТФ) и часто анеуплоидный набор хромосом с их рассеиванием [3]. Авторы связывают появление аномалии ооцитов с гипоксией фолликулов.
Однако ни в одной из описываемых работ не провели электронно-микроскопического исследования данной патологии. Это представляет несомненный интерес для эмбриологов и репродуктологов и было проведено в настоящем исследовании.
Материал и методы исследования
Пациентка Л., 31 год обратилась с жалобами на отсутствие беременности в течение 5 лет при регулярной половой жизни без предохранения. Менструальный цикл регулярный. Беременностей не было, гормональное исследование — без особенностей, при ультразвуковом исследовании органов малого таза патологии не выявлено, фолликулярный аппарат в обоих яичниках выражен. У мужа (31 год) нормозооспермия. В анамнезе одна попытка ЭКО по короткому протоколу, в которой получено 2 ооцита, перенос не производили из-за отсутствия эмбрионов хорошего качества. Поставлен диагноз: Бесплодие первичное, трубноперитонеальный фактор.
Супружеской паре было проведено лечение бесплодия по программе ЭКО-ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида) по короткому протоколу на фоне агониста гонадотропин-рилизинг гормона (диферелин 0,1 мг). Контролируемую овариальную стимуляцию проводили пурегоном 300 МЕ/сут в течение 5 дней, затем менопуром 225 МЕ/сут в течение 10 дней. Триггер овуляции — прегнил в дозе 10 000 МЕ. При трансвагинальной пункции фолликулов получено 11 ооцитов, из которых 2 находились на стадии MII (метафаза II), 6 — MI (метафаза I), 3 — GV (герминальный везикул). Все аспирир...
