Характеристика динамических изменений протеомного состава цервиковагинальной жидкости при заболеваниях шейки матки, ассоциированных с вирусом папилломы человека

Цель. Создание неинвазивного подхода для дифференциальной диагностики заболеваний шейки матки, ассоциированных с вирусом папилломы человека (ВПЧ), у пациенток репродуктивного возраста с «малыми» поражениями эпителия шейки матки на базе протеомного анализа цервиковагинальной жидкости (ЦВЖ).
Материалы и методы. Образцы ЦВЖ были получены от 7 пациенток в возрасте 26–36 лет (31±4) с «малыми» формами ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки (ASCUS и LSIL) в ходе динамического наблюдения (0, 6 и 12 мес). Полуколичественный анализ протеомных данных (ВЭЖХ-МС/МС), включая идентификацию и аннотацию белков, осуществлялся с использованием программных пакетов MaxQuant и STRING.
Результаты. Было выявлено значимое изменение уровня 7 белков: SOD1, CSTA, FGB, ENO1, BPI, BPIFB1, SERPINB13 на протяжении всего динамического наблюдения. Анализ обогащения функциональных групп по базе GeneOntology обнаружил, что данные белки в наибольшей степени ассоциированы с активацией иммунных (врожденный иммунитет) и антимикробных процессов, а также участвуют в регуляции апоптоза и эпителиально-мезенхимальной трансформации. Вероятно, изменение уровня данных белков опосредовано элиминированием вируса ВПЧ и ассоциированной с ним неопластической трансформацией эпителия шейки матки.
Заключение. В результате протеомного анализа была выявлена панель белков, которая может быть использована для оценки динамики развития патологического процесса и эффективности выбранной тактики лечения пациенток с неопластическими изменениями шейки матки.

В настоящее время регистрируется повышение числа случаев заболеваний шейки матки, ассоциированных c длительной персистенцией вируса папилломы человека (ВПЧ) у женщин репродуктивного возраста [1]. По статистике Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), ежегодно диагностируется более 490 тысяч новых случаев ВПЧ-ассоциированного рака шейки матки (РШМ). Как правило, онкологическому процессу предшествуют цервикальные интраэпителиальные неоплазии различной степени тяжести. Зачастую при плоскоклеточном интраэпителиальном поражении легкой степени (LSIL) процесс спонтанно регрессирует в течение нескольких месяцев. Однако длительная персистенция ВПЧ высокого риска приводит в 27% случаев к тяжелым плоскоклеточным интраэпителиальным поражениям (HSIL), которые в 40–45% случаев прогрессируют в РШМ [2, 3]. Трансформация эпителия шейки матки от отсутствия внутриклеточного поражения или злокачественности (NILM) к HSIL при папилломавирусной инфекции занимает от 1 до 10 лет. На молекулярном уровне происходят изменение дифференцировки клеток, дисбаланс механизмов пролиферации и апоптоза клеток.

В разных странах применяются различные схемы диагностики HSIL и РШМ, включающие морфологическое исследование биопсийного материала (золотой стандарт), цитологическое исследование соскоба клеток эпителия, расширенную кольпоскопию, жидкостную цитологию, ВПЧ-типирование с определением вирусной нагрузки и другие методы. Наиболее распространенным методом диагностики характера патологически измененного эпителия шейки матки является проведение кольпоскопического исследования с последующим взятием биоптата [4]. Однако при гистологическом исследовании оценивается структура ткани, что не позволяет оценить риск прогрессирования патологического процесса. Выбор тактики ведения пациента, в том числе объема инвазивных вмешательств, является ключевом моментом для пациенток репродуктивного возраста с цервикальной интраэпителиальной неоплазией. Динамическое наблюдение является преимущественной тактикой для пациентов с LSIL, однако в ряде случаев необходимо проведение терапии, в частности, при наличии высокого риска прогрессирования заболевания. В связи с этим диагностика заболеваний, ассоциированных с ВПЧ на ранних этапах развития, является важной своевременной помощью пациентам, находящимся в группе риска.

Применение современных методов исследования для анализа молекулярного состава различных биологических жидкостей является перспективным для диагностики ВПЧ-ассоциированных заболеваний шейки матки. Все чаще в подобных исследованиях для поиска биомаркерных молекул применяются постгеномные методы, в частности, протеомные, позволяющие определить особенности белкового состава плазмы крови, мочи, цервиковагинальной жидкости (ЦВЖ), ликвора и других [5–7].

Идентификация потенциальных маркерных белков в ЦВЖ при ...

Стародубцева Н.Л., Бржозовский А.Г., Бугрова А.Е., Кононихин А.С., Гусаков К.И., Назарова Н.М., Франкевич В.Е.