Характеристика микробиоты влагалища у беременных с досрочным преждевременным разрывом плодных оболочек

Цель. Исследование микробиоты влагалища у женщин с преждевременным разрывом плодных оболочек (ПРПО) в сроке 22–36 недель и 6 дней беременности.
Материалы и методы. Обследованы 150 женщин в возрасте от 18 до 40 лет, которые были разделены на 3 группы: 1-я группа – беременные с ПРПО (n=50), 2-я группа – беременные с интактными плодными оболочками (n=50), родоразрешенные в сроке 22–36 недель и 6 дней, 3-я группа – беременные со спонтанными своевременными (≥37 недель) родами (n=50). Было проведено комплексное микробиологическое и молекулярно-генетическое исследование вагинальной микробиоты. Видовую идентификацию микроорганизмов проводили методом MALDI TOF MS с использованием времяпролетного масс-спектрометра.
Результаты. Беременные с ПРПО были соматически отягощены частыми респираторными и одонтогенными воспалительными заболеваниями; характерно осложненное течение данной беременности: угрожающий выкидыш, обусловленный наличием протракционной ретроамниотической гематомы, волнообразный характер кровянистых выделений из половых путей, развитие истмико-цервикальной недостаточности, требующей хирургической коррекции. Методом родоразрешения у беременных статистически значимо чаще было кесарево сечение. Женщины с ПРПО имели смешанную, дисбиотическую вагинальную микрофлору. В отличие от беременных со своевременными родами, для женщин с ПРПО характерны дефицит лактобацилл и увеличение относительной численности условно-патогенных микроорганизмов, преимущественно факультативно-анаэробного происхождения.
Заключение. По составу микробиоты влагалища возможно предположить риск возникновения ПРПО. Мониторинг состава влагалищной микробиоты в течение беременности является ключевым этапом для разработки прогностических, профилактических и терапевтических стратегий.

Преждевременные роды (ПР) являются основной причиной неонатальной заболеваемости и смертности во всем мире [1]. У недоношенных детей часто развиваются хронические респираторные и сердечно-сосудистые заболевания, бронхолегочная дисплазия, отмечается высокий риск физических и психоневрологических дефицитов [2]. Преждевременный разрыв плодных оболочек (ПРПО) при недоношенной беременности имеет место в 30% всех спонтанных ПР и является важной проблемой в акушерской практике [3]. Патогенез разрыва плодных оболочек и последующие материнские и неонатальные заболевания четко ассоциированы с инфекцией [4, 5]. В 80% случаев роды происходят в течение 9 дней с момента разрыва оболочек; за этот промежуток времени полость матки, плацента и плод в результате восходящей инфекции подвержены высокому риску развития хориоамнионита и фунисита, которые связаны с неблагоприятными материнскими и неонатальными исходами [6–10]. Изучение микробиоты влагалища у беременных и ее особенностей при дисбиотических нарушениях играет важную роль для исхода беременности [11, 12]. Дисбиотическая вагинальная микробиота является признанным фактором риска для досрочного ПРПО (22–36 недель и 6 дней) [13–15].

Цель исследования – исследовать микробиоту влагалища у женщин с ПРПО в сроке беременности 22–36 недель и 6 дней.

Материалы и методы

Проведено одномоментное сравнительное исследование. Обследованы 150 женщин в возрасте от 18 до 40 лет. Все пациентки разделены на 3 группы: 1-ю группу составили 50 пациенток с ПРПО в сроке беременности до 36 недель и 6 дней, 2-ю группу – 50 пациенток с интактными плодными оболочками в сроке до 36 недель и 6 дней, 3-ю группу – 50 соматически здоровых беременных с неотягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом и спонтанными своевременными (≥37 недель) родами. Критерии включения в 1-ю и 2-ю группы: одноплодная спонтанно наступившая беременность, завершившаяся ПР в 22–36 недель и 6 дней с ПРПО (1-я группа) и ПР при наличии интактных плодных оболочек (2-я группа). Критерии включения в 3-ю группу: одноплодная, спонтанно наступившая беременность, завершившаяся своевременными спонтанными родами (≥37 недель). У всех пациенток было получено информированное согласие на участие в исследовании. Критерии исключения: многоплодная беременность, наступление беременности в результате применения вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), структурные и хромосомные аномалии, тяжелая соматическая патология у беременной, развитие преэклампсии (ПЭ) во время данной беременности, пороки развития матки, проведение антибактериальной терапии.

У 150 беременных одномоментно взят материал из заднего свода влагалища для культурального исследования, микроскопии вагинальных мазков по Граму и количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) («Фемофлор-16»). Сбор материала в группе беременных с ПРПО производился на момент разрыва плодных оболочек и до проведения антибиотикотерапии.

Комплексное микробиологическое исследование включало оценку микробиоценоза влагалища по данным микроскопии мазка вагинального отделяемого, окрашенного по Граму, и культурального исследования в соответствии с медицинской технологией «Интегральная оценка состояния микробиоты влагалища. Диагностика оппортунистических вагинитов». Вагинальное отделяемое засевали на стандартные питательные среды. Для выделения факультативно-анаэробных микроорганизмов использовали: колумбийский агар, маннит-солевой агар (Сonda, Испания), среду Эндо и агар Сабуро (ФГУН «ГИЦПМиБ», Оболенск, Россия). Лактобактерии культивировали на среде Лактобакагар (ФГУН «ГИЦПМиБ», Оболенск, Россия), строгие анаэробы – на прередуцированном агаре Schaedler (Сonda, Испания) с необходимыми добавками. Инкубировали посевы в условиях СО2-инкубатора (Jouan, Франция). Строгие анаэробы и лактобациллы культивировали в анаэробном боксе (Jouan, Франция) в атмосфере трехкомпонентной газовой смеси (N2 – 80%; CO2 – 10%; Н2 – 10%). Видовую идентификацию микроорганизмов проводили методом MALDI TOF MS с использованием времяпролетного масс-спектрометра AutoFlex III c программным обеспечением MaldiBioTyper (BrukerDaltoniks, Германия). Молекулярно-генетическое исследование микроценоза влагалища методом количественной ПЦР проводили, используя тест-систему «Фемофлор-16» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) в детектирующем амплификаторе ДТ-96 (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия), согласно инструкции производителя.

Для проведения клинико-анамнестической характеристики исследуемых групп женщин использовали следующее описание: количественные данные были представлены в виде среднего арифметического и стандартного отклонения M (SD). Для сравнения групп по качественным бинарным признакам использовали метод хи-квадрат Пирсона, если одно из значе...

Ходжаева З.С., Гусейнова Г.Э., Муравьева В.В., Донников А.Е., Мишина Н.Д., Припутневич Т.В.