Характеристика системы комплемента у больных ишемической болезнью сердца при умеренном и выраженном гемолизе после операций с искусственным кровообращением

Проведено исследование системы комплемента у кардиохирургических больных с умеренным (n=40) и выраженным (n=18) гемолизом после коронарного шунтирования в условиях искусственного кровообращения. До и после операции изучали содержание эритроцитов СD35+, СD55+ и ретикулоцитов в крови, свободного гемоглобина в плазме крови, показатели функционального состояния классического, лектинового, альтернативного путей активации комплемента и концентрацию его терминального комплекса в сыворотке крови. Установлено, что развитие выраженного гемолиза ассоциировано с более высоким, чем при умеренном гемолизе, содержанием терминального комплекса комплемента и ретикулоцитов в крови до операции, а также с дефицитом эритроцитов СD55+ и низкой активностью альтернативного пути.

Наряду с последними достижениями мини-инвазивной кардиохирургии операции коронарного шунтирова­ния (КШ) на остановленном сердце до сих пор остаются общепринятым способом лечения коронарной недоста­точности при множественном поражении коронарного русла и сочетанной патологии. Тем не менее выполнение искусственного кровообращения (ИК) неразрывно связано с развитием внутрисосудистого гемолиза, выраженность которого после операции сильно варьирует. Среди причин интраоперационного лизиса эритроцитов в качестве глав­ной рассматривается механическое повреждение формен­ных элементов крови в экстракорпоральном контуре [1, 2]. Однако немаловажную роль в этом процессе может играть активация системы комплемента.

Показано, что у кардиохирургических больных во время ИК возрастает содержание в крови терминального ком­плекса комплемента и фрагментов С5а, С4а и С3а [3, 4]. При этом концентрация последнего остается высокой и после проведения ИК, положительно коррелируя с его продолжительностью и риском развития послеоперацион­ных осложнений [5]. Независимо от причинного фактора и путей активации системы комплемента каскад реакций завершается формированием гидрофобного мембраноата­кующего комплекса С5b-9 (МАК), способного в виде поро- образующей молекулы встраиваться в липидный бислой клетки (в том числе эритроцитов) и вызывать ее лизис за счет увеличения неспецифической проницаемости мемб­раны [6, 7].

Необходимо отметить, что гемолитический эффект системы комплемента определяется не только степенью ее активации, но и экспрессией на мембране эритроци­тов протективных молекул: рецептора комплемента CR1 (CD35), белка DAF (decay-accelerating factor — фактор, ускоряющий распад; он же CD55) и протектина (CD59), которые предотвращают комплемент-зависимый лизис клеток крови. Очевидно, что конечный цитолитический эффект комплемента будет зависеть от соотношения бел­ков-индукторов и ингибиторов данной системы [6—8].

Целью настоящего исследования явилось исследова­ние путей активации системы комплемента и экспрессии молекул CD35 и CD55 на мембране эритроцитов у больных ишемической болезнью сердца (ИБС) при умеренном и выраженном гемолизе после операций с ИК.

Материал и методы

В исследование были включены 58 больных (51 мужчина и 7 женщин) в возрасте от 48 до 67 лет, страдающих ИБС с многососудистым поражением и перенесших операцию КШ с использованием ИК. Реваскуляризацию миокарда проводили в условиях нормотермии (36,07±0,18 °С) и кристаллоидной кардиоплегии. Экстракорпоральную перфузию осуществляли на аппаратах ИК производства, оснащен­ных роликовыми насосами, с применением одноразовых мембранных оксигенаторов. Критериями исключения из исследования считали проведение у пациентов продленно­го после операции ИК и выполнение сочетанных операций.

Исследование проводили в 2 группах пациентов, сфор­мированных в зависимости от концентрации свободного гемоглобина в плазме крови после операции: с умеренным гемолизом (уровень гемоглобина в крови менее 40 мг/дл; n=40) и с выраженным гемолизом (уровень гемоглобина в крови более 40 мг/дл; n=18). Концентрация свободно­го гемоглобина в плазме крови 40 мг/дл была выбрана в качестве критерия распределения больных на группы с учетом того, что при гемоглобинемии выше этого уровня наблюдаются клинические проявления внутрисосудистого гемолиза (прежде всего, желтуха) [9]. Больные 2 групп были сопоставимы по полу и возрасту, функциональному классу стенокардии и длительности ИБС, но несколько различа­лись по характеру сопутствующей патологии и продолжи­тельности ИК (табл. 1).

Таблица 1. Характеристика больных ИБС с умеренным и выраденным гемолизом после операций в условиях ИК.

Примечание. Данные представлены в виде числа больных (в %), если не указано другое. * — р<0,05. ИК — искусственное кровообращение; ИБС — ишемическая болезнь сердца; ХСН — хроническая сердечная недостаточность; NYHA — Нью-Йоркская Ассоциация сердца.

В контрольную группу вошли 12 практически здоровых доноров, сопоставимых по полу и возрасту с больными ИБС.

Материалом исследования служили гепаринизированная 50 ед/мл венозная кровь (2 мл) и сыворотка крови (2 мл). Из цельной крови готовили тонкие мазки, которые суправитально окрашивали 1,2% раствором бриллиантового крезилового синего для подсчета количества ретикулоцитов. В плазме крови определяли содержание свободного гемоглобина бензидиновым методом [10]. Эритроциты, трижды отмытые изоосмолярным 10 мМ трис-HCl буфером (рН 7,4), использовали для изучения экспрессии CD35 и CD55 на мембране эритроцитов методом прямой поверх­ностной иммунофлюоресценции с применением монокло­нальных антител к CD35 и CD55, меченных флюоресцеина изотиоцианатом. Исследование вы...

Чумакова С.П., Уразова О.И., Новицкий В.В., Шипулин В.М., Хохлов О.А., Емельянова Т.В., Михайлова М.А.