Хронический цервицит, ассоциированный с вирусом папилломы человека и маркеры воспаления у женщин репродуктивного возраста

DOI: https://dx.doi.org/10.18565/aig.2019.4.49-57

06.05.2019
63

1) ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России; 2) ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» МЗ РФ
Цель исследования. Изучить частоту выявления хронического цервицита (ХЦ), распространенность различных типов вируса папилломы человека (ВПЧ), значимость вирусной нагрузки, особенности экспрессии мРНК генов регуляции клеточного цикла, апоптоза, иммунитета, матриксных металлопротеиназ и уровень метилирования промоторного участка гена WIF1 среди пациенток с ХЦ, ассоциированным с папилломавирусной инфекцией (ПВИ). Материал и методы. В исследование включено 202 пациентки в возрасте от 25 до 49 лет. Проведено комплексное клинико-лабораторное обследование (сбор анамнестических данных, гинекологическое исследование, кольпоскопия, ВПЧ-тестирование, жидкостная цитология и прицельная биопсия шейки матки (по показаниям), микроскопия вагинальных мазков, оценка микробиоценоза влагалища), исследование транскрипционного профиля генов KI67, CDKN2A, BCL2, PGR, IFNAR1, IL1RN, CCND1, EGFR, IL1B, IL10, IL18, TNFA, GATA3, TLR4, CD68, TGFB1, CXCL5, CXCL10 CXCL13, MMP8, MMP9, определение уровня метилирования промоторного участка гена WIF1. Результаты. В структуре патологии шейки матки ВПЧ-ассоциированный ХЦ выявлен у 25,7% женщин. Наиболее часто обнаружены 16, 33, 35, 66 типы. При наличии ПВИ в соскобах из цервикального канала повышается уровень экспрессии мРНК гена CDKN2A/p16 в 1,8 раза и IL10 в 2,4 раза (p

В настоящее время изучение хронического цервицита (ХЦ), ассоциированного с вирусом папилломы человека (ВПЧ) является одним из приоритетных направлений гинекологии ввиду высокой частоты его выявления среди женщин репродуктивного возраста (15–40% случаев) [1]. ВПЧ на сегодняшний день является наиболее распространенной инфекцией, передающейся половым путем, являющейся значимым фактором индукции и поддержания хронического воспаления шейки матки [2]. ВПЧ- ассоциированный ХЦ, в зависимости от персистенции или транзиторного характера течения инфекции, имеет ряд клинических, кольпоскопических и морфологических особенностей [3]. Развитие цервицитов обусловлено сложными взаимоотношениями микробиоты влагалища – возбудителей инфекций, передаваемых половым путем (Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium) с грибами, условно-патогенными аэробными и анаэробными микроорганизмами [4]. В последние годы, наряду с папилломавирусной инфекцией (ПВИ) доказана значимая роль хронического воспаления, ассоциированного с ВПЧ в развитии дисплазии и рака шейки матки [5]. Поиск современных информативных методов диагностики и определение молекулярно-генетических маркеров хронического воспаления позволит персонализировать подход и определить правильную тактику ведения пациенток [6].

Цель исследования: Изучить частоту выявления ХЦ, распространенность различных типов ВПЧ, значимость вирусной нагрузки, особенности экспрессии мРНК генов регуляции клеточного цикла, апоптоза, иммунитета, матриксных металлопротеиназ (ММР) и уровень метилирования промоторного участка гена WIF1 среди пациенток с ХЦ, ассоциированным с ПВИ.

Материал и методы

В исследование включено 202 пациентки 25–49 лет, средний возраст которых составил 31,8 (5,8) лет, обратившихся с целью диагностики и лечения патологии шейки матки на прием в научно-поликлиническое отделение ФГБУ «НМИЦ АГИ им. В.И. Кулакова» Минздрава России в период с октября 2016 г. по сентябрь 2018 г.

Критерии включения: женщины в возрасте от 25 до 49 лет с диагнозом ХЦ, подтвержденным данными цитологического и/или гистологического исследования и ВПЧ – положительным тестом; пациентки с диагнозом ХЦ при ВПЧ – отрицательным тесте; пациентки с положительным тестом на ВПЧ при отсутствии признаков ХЦ; женщины с ВПЧ – отрицательным тестом при отсутствии признаков ХЦ (контрольная группа). Всеми пациентками подписано информированное согласие на участие в исследовании.

Критерии исключения: беременность и период лактации, дисплазия и рак шейки матки, неспособность отвечать на требования протокола.

Проводился сбор клинико-анамнестических данных, общий и гинекологический осмотр, типирование с количественной оценкой ВПЧ, жидкостная цитология и/или прицельная биопсия шейки матки с последующим гистологическим исследованием (по показаниям), расширенная кольпоскопия, а также молекулярно-биологические методы исследования.

Методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с определением результатов в режиме реального времени (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия, РУ Росздравнадзора № ФСР 2010/08811) проводили исследование на ВПЧ 21 типа (6, 11, 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 44(55), 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) с определением вирусной нагрузки. С помощью специального зонда проводили забор материала из цервикального канала в пробирки эппендорф объемом 1,5 мл с 0,9% раствором натрия хлорида [7].

Результаты жидкостной цитологии оценивали согласно классификации Бетесда (TDS – Terminology Bethesda System) (2014). Биопсию шейки матки и гистологическое исследование проводили по показаниям и оценивали по классификации ВОЗ (2014).

Оценка результатов расширенной кольпоскопии проводилась в соответствии с рекомендациями по кольпоскопической терминологии, представленной на 16-м Всемирном Конгрессе Международной Федерации по цервикальной патологии и кольпоскопии (IFCPC) (Орландо, 2017 г.). При проведении расширенной кольпоскопии оценивалось состояние эпителия шейки матки, сосудов, кольпоскопические признаки, такие как гипертрофия, наличие деформации, множественных наботовых кист, выраженный сосудистый рисунок, наличие или отсутствие ацетобелого эпителия на пробе с 3% раствором уксусной кислоты, неравномерное йодпозитивное и йоднегативное окрашивание шейки матки на пробе Шиллера [8].

Определение уровня экспрессии мРНК генов врожденного иммунитета IFNAR1, IL1RN, IL1B, IL10, IL18, TNFA, GATA3, TLR4, CD68, TGFB1, CXCL5, CXCL10, CXCL13, регуляции клеточного цикла и апоптоза KI67, CCND1, CDKN2A, BCL2, MMP8, MMP9, рецепторов прогестерона PGR и эпидермального ростового фактора EGFR проведено методом количественной ПЦР в режиме реального времени с предварительной обратной транскрипцией (реактивы и детектирующие амплификаторы производства ООО «НПО ДНК-Технология», Россия). В реакциях обратной транск...

Список литературы

  1. Серов В.Н., Сухих Г.Т., Прилепская В.Н., Радзинский В.Е., ред. Руководство по амбулаторно-поликлинической помощи в акушерстве и гинекологии. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2016. 1136с.
  2. Centers for Disease Control and Prevention. Incidence, prevalence, and cost of sexually transmitted infections in the United States. February 2013.
  3. Амирханян А.С., Прилепская В.Н., Байрамова Г.Р., Бурменская О.В., Костава М.Н., Асатурова А.В. Хронический цервицит: современные возможности диагностики и лечения. Акушерство и гинекология. 2018; 4: 22-7.
  4. Ollendorff A.T. Cervicitis. Updated: Feb 09, 2017.
  5. World Health Organization. Comprehensive cervical cancer control. A guide to essential practice. 2nd ed. Geneva: WHO; 2014. Available at: http//www.who.int/repro ductivehealth/ publications/ cancers/cervical-cancer-guide/en
  6. Jayakumar N.K. Cervicitis: how often is it non-specific! J. Clin. Diagn. Res. 2015; 9(3): EC11-2. https://dx.doi.org/10.7860/JCDR/2015/11594.5673.
  7. Burd E.M. Human papillomavirus laboratory testing: the changing paradigm. Clin. Microbiol. Rev. 2016; 29(2): 291-319. https://dx.doi.org/10.1128/CMR.00013-15.
  8. Quaas J., Reich O., Frey Tirri B., Küppers V. Explanation and use of the colposcopy terminology of the IFCPC (International Federation for Cervical Pathology and Colposcopy) Rio 2011. Geburtshilfe Frauenheilkd. 2013; 73(9): 904-7. https://dx.doi.org/10.1055/s-0033-1350824.
  9. Bourmenskaya O., Bayramova G., Nepsha O., Rebrikov D., Trofimov D., Muravieva V., Sukhikh G. Vaginal smear TNF-alpha, IL18, and GATA3 mRNA levels correlate with local inflammation. Int. J. Biomed. 2014; 4(4): 204-8.
  10. Vasiljević N., Scibior-Bentkowska D., Brentnall A.R., Cuzick J., Lorincz A.T. Credentialing of DNA methylation assays for human genes as diagnostic biomarkers of cervical intraepithelial neoplasia in high-risk HPV positive women. Gynecol. Oncol. 2014; 132(3): 709-14. https://dx.doi.org/10.1016/j.ygyno.2014.02.001.
  11. Kan Y.Y., Liou Y.L., Wang H.J., Chen C.Y., Sung L.C., Chang C.F., Liao C.I. PAX1 methylation as a potential biomarker for cervical cancer screening. Int. J. Gynecol. Cancer. 2014; 24(5): 928-34. https://dx.doi.org/10.1097/IGC.0000000000000155.
  12. Arbyn M., Tommasino M., Depuydt C., Dillner J. Are 20 human papillomavirus types causing cervical cancer? J. Pathol. 2014; 234(4): 431-5. https://dx.doi.org/10.1002/path.4424.
  13. Piroozmand A., Mostafavi Zadeh S.M., Madani A., Soleimani R., Nedaeinia R., Niakan M. et al. The association of high risk human papillomaviruses in patients with cervical cancer: an evidence based study on patients with squamous cell dysplasia or carcinoma for evaluation of 23 human papilloma virus genotypes. Jundishapur J. Microbiol. 2016; 9(4): e32728. https://dx.doi.org/10.5812/jjm.32728.
  14. Сухих Г.Т., Ашрафян Л.А., Байрамова Г.Р., Бабкина И.О., Чернова В.Ф., Осипьянц А.И., Королькова А.И., Полозников А.А., Асфарова Г.Р., Муллабаева С.М., Коган Е.А., Муйжнек Е.Л., Друх В.М., Киселев В.И. Метилирования гена WIF 1 при цервикальных плоскоклеточных интраэпителиальных поражениях. Акушерство и гинекология. 2017; 5: 114-23.

Поступила 15.02.2019

Принята в печать 22.02.2019

Об авторах / Для корреспонденции

Амирханян Армине Самвеловна, аспирант научно-поликлинического отделения, ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (926) 605-00-48. Е-mail: 07062005@mail.ru
Байрамова Гюльдана Рауфовна, д.м.н., заведующая по клинической работе научно-поликлинического отделения, ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова»
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (926) 526-69-05. Е-mail: bayramova@mail.ru
Киселев Всеволод Иванович, д.б.н., профессор, член-корреспондент РАН, заместитель директора Института онкогинекологии и маммалогии ФГБУ «НМИЦ АГП
им. В.И. Кулакова» Минздрава России. 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Е-mail: vkis10@mail.ru
Прилепская Вера Николаевна, д.м.н., профессор, заместитель директора ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, 4. Телефон: 8 (495) 438-69-34 Е-mail: VPrilepskaya@mail.ru
Полозников Андрей Александрович, кандидат химических наук, заведующий лабораторией биохимии и энзимологии ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева»
МЗ РФ. Адрес: 117997, Россия, Москва, ГСП-7, ул. Саморы Машела, д. 1. Телефон: 8 (495) 287-65-70 доб. 5509. Е-mail: andrey.poloznikov@fccho-moscow.ru
Бурменская Ольга Владимировна, доктор биологических наук, заведующая лабораторией онкологической генетики ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова»
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-22-92. Е-mail: o_bourmenskaya@oparina4.ru
Бабкина Ирина Олеговна, м.н.с. лаборатории биохимии и энзимологии ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева» МЗ РФ.
117997 г. Москва, ГСП-7, ул. Саморы Машела, д. 1. Телефон: 8 (495) 287-65-70 доб. 5509. Е-mail: iobabkina@gmail.com
Асатурова Александра Вячеславовна, к.м.н., старший научный сотрудник 1-го патоморфологического отделения ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова»
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, 4. Телефон: 8 (495) 438-22-92. E-mail: a_asaturova @oparina4.ru

Для цитирования: Амирханян А.С., Байрамова Г.Р., Киселев В.И., Прилепская В.Н., Полозников А.А., Бурменская О.В., Бабкина И.О., Асатурова А.В. Хронический цервицит, ассоциированный с вирусом папилломы человека и маркеры воспаления у женщин репродуктивного возраста. Акушерство и гинекология. 2019; 4: 49-57.
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2019.4.49-57

Полный текст публикаций доступен только подписчикам

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь