Иммуногистохимические особенности эутопического и эктопического эндометрия у пациенток с рецидивирующим течением эндометриоидных кист яичников

Цель исследования. Изучить экспрессию факторов пролиферации и апоптоза (ki-67, bcl-2), воспалительных факторов (NF-kβ p65, COX-2), факторов адгезии (b-катенин), эстрогеновых (ER-α) и прогестероновых (PR-α) рецепторов в эутопическом эндометрии и капсуле эндометриоидных кист яичников (ЭКЯ) у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ.
Материал и методы. В исследование включены 60 пациенток репродуктивного возраста с ЭКЯ, находившихся на лечении в отделении оперативной гинекологии ФГБУ НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова Минздрава России в 2015–2016 гг. В зависимости от течения заболевания за период наблюдения 1,5 года после оперативного лечения пациентки разделены на две группы: 1-я группа – 41 пациентка без рецидива ЭКЯ (группа сравнения); 2-я группа – 19 пациенток с рецидивом ЭКЯ (основная группа). В работе использовали гистологический и иммуногистохимический методы исследования. Иммуногистохимическое исследование эутопического эндометрия и капсулы ЭКЯ проводили при помощи набора Tissue-Tek Quick-Ray. В исследовании использовались антитела к ki-67 (clone 30-9, VENTANA), Bcl-2 (clone 124, VENTANA), NF-kβ p65 (clone p65, Spring Bioscience Corp.), COX-2 (clone СХ-294, Agilent), b-катенину (clone 14, VENTANA), ER-α (clone SP1, VENTANA) и PR-α (clone 1E2, VENTANA).
Результаты. Эктопический эндометрий (капсула ЭКЯ) характеризуется изменением экспрессии ER-α, PR-α, ki-67, bcl-2, NF-kb p65, СОХ-2 и b-катенина, которые являются факторами, участвующими в патогенезе эндометриоза. У пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ повышена экспрессия PR-α в эпителиальном компоненте капсулы ЭКЯ (р=0,0277), понижена экспрессия ki-67 в эпителиальном компоненте капсулы ЭКЯ (р=0,044), понижена экспрессия NF-kb p65 и СОХ-2 в стромальном компоненте капсулы ЭКЯ (р=0,0082, р=0,00245 соответственно) и повышена экспрессия b-катенина в стромальном компоненте капсулы ЭКЯ (р=0,017). У пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ повышена экспрессия PR-α в секреторную фазу в эпителиальном компоненте эутопического эндометрия (р=0,0253) и экспрессия NF-kb p65 в пролиферативную фазу в стромальном компоненте эутопического эндометрия (р=0,0278).
Заключение. Иммуногистохимическое исследование экспрессии PR-α, ki-67, NF-kb p65, СОХ-2 и b-катенина в капсуле ЭКЯ и экспрессии PR-α и NF-kb p65 в эутопическом эндометрии может помочь сразу после оперативного лечения выявлять пациенток с высоким риском рецидивирования ЭКЯ. Дальнейшие исследования этих факторов позволят изучить молекулярные механизмы, лежащие в основе патогенеза рецидивирования ЭКЯ, что позволит воздействовать на эти механизмы для устранения фундаментальных причин рецидива эндометриоза.

Эндометриоз – процесс, при котором за пределами полости матки происходит доброкачественное разрастание ткани, по морфологическим и функциональным свойствам подобной эутопическому эндометрию. Эндометриоз поражает 10% женщин репродуктивного возраста и 35–50% женщин с тазовой болью и бесплодием [1–3]. Изменения тазовой анатомии, вызванные эндометриозом, приводят к нарушению выделения ооцита яичником, а также могут ингибировать захват яйцеклетки фимбриальным отделом и ее дальнейшую транспортировку по маточной трубе. Биохимические изменения в брюшной полости при эндометриозе приводят к иммобилизации спермы, ухудшению акросомальной реакции и, в свою очередь, нарушению слияния сперматозоида с яйцеклеткой [4, 5]. У женщин с эндометриозом отмечают плохое качество ооцитов и эмбрионов, а также снижение рецептивности эутопического эндометрия [6]. Эндометриоз яичников приводит к снижению овариального резерва, как в результате самого заболевания, так и в результате его хирургического лечения [4].

Все медикаментозные препараты, назначаемые при эндометриозе, подавляют овуляцию, а также имеют высокую стоимость, поэтому их назначение всем пациенткам после оперативного лечения может быть не целесообразным [7–9]. Медикаментозная терапия может быть эффективной только для купирования болевого синдрома, однако, убедительных данных о ее влиянии на фертильность не представлено [7, 8, 10]. Выявление пациенток с высоким риском рецидивирования после первичной операции позволяет дифференцированно назначать медикаментозную терапию, что уменьшит ненужные расходы, но не снизит фертильность у всех женщин. Кроме того, женщины с высоким риском рецидивирования эндометриоидных кист яичников (ЭКЯ) смогут своевременно сдать свои яйцеклетки в банки ооцитов [4]. Поэтому, определение и идентификация факторов риска рецидивирования ЭКЯ важны для повышения эффективности послеоперационной терапии и индивидуализации ведения пациенток в послеоперационном периоде [11].

Несмотря на большой интерес мирового сообщества к эндометриозу, практически не изучен вопрос о прогнозировании рецидивирования различных фенотипических форм эндометриоза [12, 13]. Почти все исследования сосредоточены на изучении эпидемиологических факторов и интраоперационных данных, а их результаты часто противоречат друг другу [14–17]. Биомаркеры, определяемые в тканевых образцах, могли бы стать более надежными предикторами и иметь большое практическое значение. В недавно опубликованных исследованиях найдены возможные биомаркеры рецидивирования ЭКЯ, однако, результаты некоторых работ прямо противоположны друг другу [4, 18].

Цель исследования: изучить экспрессию факторов пролиферации и апоптоза (ki-67, bcl-2), воспалительных факторов (NF-kβ p65, COX-2), факторов адгезии (b-катенин), эстрогеновых (ER-α) и прогестероновых (PR-α) рецепторов в эутопическом эндометрии и капсуле ЭКЯ у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ иммуногистохимическим методом.

Материал и методы исследования

В исследование включены 60 пациенток с ЭКЯ (средний возраст составил 31,78±5,52 года) находившихся на лечении в отделении оперативной гинекологии ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России в 2015–2017 гг.

Всем пациенткам проведено полное клинико-анамнестическое обследование: сбор анамнеза, общий и гинекологический осмотр, ультразвуковое исследование (УЗИ) органов малого таза, клинико-лабораторное обследование. Эндоскопическую операцию проводили по стандартизированной методике с помощью эндовидеохирургического оборудования фирмы «Karl Storz» (Германия). Всем пациенткам выполнены лапароскопия и гистероскопия. Во время операции осматривали органы брюшной полости и малого таза, при обнаружении ЭКЯ и/или эндометриоидных очагов оценивали степень распространенности эндометриоза. Диагноз ЭКЯ устанавливали на основании интраоперационного и гистологического исследований. Контроль эффективности проведенного лечения оценивали при клинико-анамнестическом обследовании через 1 и 1,5 года после оперативного вмешательства. Оценивали динамику жалоб, проводили общий и гинекологический осмотр, УЗИ органов малого таза, оценивали рецидивирование заболевания. Рецидив ЭКЯ определяли при наличии у пациентки соответствующих жалоб и выявлении кисты яичника более 1,0 см в диаметре при трансвагинальном УЗИ, не разрешающейся в течение нескольких последовательных менструальных циклов и имеющей другие ультразвуковые признаки ЭКЯ.

Критерии включения в исследование: репродуктивный возраст (18–45 лет); ЭКЯ, выявленные при лапароскопическом оперативном вмешательстве и подтвержденные при последующем гистологическом исследовании; отсутствие гормональной терапии в течение 6 месяцев до оперативного вмешательства; подписанное информированное согласие на участие в исследовании. Критерии исключения: тяжелая сопутствующая экстрагенитальная патология; злокачественные новообразования половых органов; острые воспалительные заболевания органов малого таза; наличие заболеваний, являющихся противопоказанием для ...

Пшеничнюк Е.Ю., Асатурова А.В., Адамян Л.В., Зайцев Н.В.