Клиническая Нефрология №6 / 2010
Интерференционная фазометрия ядерных структур лимфоцитов при трансплантации почки
ГУ МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского, Москва; Российский геронтологический научно-клинический центр Росздрава, Москва; МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва
Цель. Изучение возможностей интерференционной фазометрии ядерных структур лимфоцитов в доклинической диагностике острого отторжения почечного трансплантата и оценке эффективности противокризовой терапии.
Материал и методы. В исследование включены 36 больных с терминальной стадией хронической почечной недостаточности (ХПН), которым выполнена трансплантация почки в 2005–2008 гг., в т. ч. 18 мужчин и 18 женщин в возрасте от 20 до 59 лет (средний возраст – 42,0 ± 9,5 лет). Для определения показателей нормы морфофункционального состояния ядерных структур лимфоцитов были обследованы 30 практически здоровых добровольцев в возрасте от 18 до 59 лет (средний возраст – 36,0 ± 7,6 года). Метод компьютерной фазовой морфометрии (КФМ) был применен для изучения количественных показателей молекулярной организации интерфазного хроматина ядер лимфоцитов периферической крови.
Результаты. При терминальной почечной недостаточности отмечено достоверное снижение фазовой активности ядер Т-лимфоцитов. Рост этого показателя наблюдался при развитии острого криза отторжения почечного трансплантата.
Заключение. Изменения морфометрических показателей иммунокомпетентных клеток могут служить ранними критериями развития острой реакции отторжения почечного трансплантата и эффективности проводимой противокризовой терапии.
Введение
Трансплантация почки является методом выбора в лечении больных с терминальной стадией хронической почечной недостаточности (ТХПН). Одной из главных причин потери трансплантата является острое отторжение, поэтому своевременная его диагностика и адекватное проведение противокризовой терапии – первоочередные задачи клинициста.
В настоящее время диагностика острой реакции отторжения основывается на комплексной оценке клинических симптомов, лабораторных показателей и результатов специальных инструментальных методов, включая ультразвуковое, допплеровское исследования и динамическую нефросцинтиграфию. Однако большинство определяемых признаков не является строго специфичным для острого отторжения [1, 2]. Они могут регистрироваться в различных комбинациях вследствие острого канальцевого некроза, инфекционных, хирургических осложнений, токсичности ингибиторов кальциневрина и других лекарственных средств [3, 4].
Достоверным методом диагностики острой реакции отторжения является пункционная биопсия, однако и этот метод не лишен недостатков в связи с инвазивностью и возможным развитием ряда осложнений.
Поиск безопасных и информативных методов в оценке контроля посттрансплантационного иммунитета, эффективных в диагностике и контроле лечения криза отторжения является актуальной задачей трансплантологии [4, 5].
Цель настоящей работы заключалась в изучении возможностей интерференционной фазометрии ядерных структур лимфоцитов в доклинической диагностике острого отторжения почечного трансплантата и оценке эффективности противокризовой терапии.
Материал и методы
В исследование были включены 36 больных с ТХПН, которым выполнена трансплантация почки в 2005– 2008 гг. в ГУ МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского. В исследовании участвовали 18 мужчин и 18 женщин в возрасте от 20 до 59 лет (средний возраст – 42 ± 9,5 лет). Для определения показателей нормы морфофункционального состояния ядерных структур лимфоцитов были обследованы 30 практически здоровых добровольцев в возрасте от 18 до 59 лет (средний возраст – 36 ± 7,6 года).
Причинами, приведшими к ТХПН, являлись хронический гломерулонефрит – 61 % (n = 22), хронический пиелонефрит – 22,2 % (n = 8), синдром Альпорта – ,6 % (n = 2), подагра – 5,6 % (n = 2), хронический тубулоинтерстициальный нефрит – 5,6 % (n = 2).
Все больные до аллотрансплантации трупной почки (АТТП) получали заместительную почечную терапию − гемо- или перитонеальный диализ. Средний срок нахождения на диализе составил 29,7 ± 18,4 месяца.
Во всех случаях органы были получены от трупных доноров. Среднее время холодовой ишемии донорской почки составило 22,1 ± 2,6 часа.
Степень HLA-совместимости оценена по числу антигенов HLA донора, совпадающих с антигенами HLA реципиента. Уровень предсуществующих антител у реципиента определен в стандартном комплемент-зависимом лимфоцитотоксическом тесте.
В послеоперационном периоде использован следующий протокол иммуносупрессии: Циклоспорин (ЦсА) 2,5 мг/кг массы тела, Селлсепт 1,5–2 г/сут, Преднизолон 0,5 мг/кг. Зенапакс 1 мг/кг массы тела вводился в/в перед операцией, на 14-й, 28-й и 42-й дни, метилпреднизолон – в/в перед включением почки в кровоток, на 2-е и 4-е сутки.
Острое отторжение почечного трансплантата купировали “пульсами” метилпреднизилона до общей дозы 3,0 г. При стероидрезистентных кризах применялся антитимоцитарный глобулин – AТГ (Фрезениус). При остром отторжении сосудистого или смешан...
