Исходы программ вспомогательных репродуктивных технологий у супружеских пар с различными видами патозооспермии у мужчин

Цель исследования. Изучение эффективности программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) у пар с различными видами патозооспермии у мужчин в зависимости от уровня анеуплоидии хромосом сперматозоидов.
Материал и методы. В проспективное когортное исследование были включены 86 супружеских пар, проходящих лечение бесплодия в программах ВРТ, которые были поделены на три группы: группа 1 (n=26) – пациенты с тератозооспермией (ТЗС), группа 2 (n=35) – пациенты с астенозооспермией (АЗС) и/или олигозооспермией (ОЗС), группа 3 (n=25) – пациенты с нормозооспермией (НЗС). Количество хромосом сперматозоидов X, Y и 18 оценивалось при помощи флюоресцентной in situ гибридизации (FISH-метод). Стимуляция функции яичников проводилась по единому «короткому» протоколу. Первичной конечной точкой было скорректированное отношение шансов (ОШкор) наступления беременности в зависимости от уровня анеуплоидии хромосом сперматозоидов. Вторичными конечными точками были: средний уровень анеуплоидии хромосом сперматозоидов, средний уровень фертилизации в сравниваемых группах пациентов, пороговый уровень анеуплоидии в ядрах сперматозоидов, корреляционная зависимость между различными параметрами спермограммы, а также уровнем фертилизации и уровнем анеуплоидии хромосом сперматозоидов.
Результаты. Уровень анеуплоидии сперматозоидов статистически значимо отличался в группах пациентов и составил 0,93±0,61% в группе 1, 0,74±0,78% в группе 2, и 0,34±0,12% в группе 3 (p=0,0003). Была выявлена отрицательная корреляционная связь между нормальными формами сперматозоидов и уровнем анеуплоидии (r=-0,21, р=0,047), а также отрицательная корреляционная связь между уровнем анеуплоидии сперматозоидов и уровнем фертилизации (r=-0,31, р=0,0035).В протоколах ВРТ было получено сходное количество эмбрионов в 3 группах пациентов. В каждом цикле проводился перенос 2 эмбрионов одинакового качества. Клинически было диагностировано 24 беременности: 4 – в группе 1 (15,4%), 8 – в группе 2 (22,8%), и 12 – в группе 3 (48%) (р=0,0237), ОШкор составило 4,51, 95% ДИ=1,09; 18,68. ROC-анализ с площадью под кривой 0,63 определил пороговое значение уровня анеуплоидии ядер сперматозоидов в зависимости от эффективности программ ВРТ, который составил 0,7%.
Заключение. Патозооспермия, особенно ТЗС у мужчин способствует повышенному риску неудачных исходов программ ВРТ. Одной из причин подобных исходов может быть повышенный уровень анеуплодии хромосом в сперматозоидах. Молекулярно-цитогенетическое исследование эякулята у мужчин с патозооспермией должно быть рекомендовано парам, проходящим лечение бесплодия методом ЭКО/ИКСИ, для принятия решения о проведении преимпланта¬ционной генетической диагностики эмбрионов или донации спер¬мы, что может улучшить исходы программ ЭКО.

По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), бесплодны 8% супружеских пар. Примерно в половине случаев причиной бесплодия является мужской фактор [1]. Вследствие неправильного расхождения хромосом в мейозе могут возникать хромосомные анеуплоидии в половых клетках. Было отмечено, что у мужчин с различными видами патозооспермии статистически значимо увеличивается риск анеуплоидии хромосом сперматозоидов по сравнению с мужчинами без нарушения сперматогенеза [2, 3], а также риск анеуплоидии хромосом у полученных эмбрионов в программах экстракорпорального оплодотворения/ интрацитоплазматической инъекции сперматозоида (ЭКО/ИКСИ) [4–6]. Следствием анеуплоидии эмбрионов может быть более низкая частота имплантации и наступления беременности и более высокая частота самопроизвольных выкидышей по сравнению с парами, в которых у мужчин отмечаются нормальные параметры спермограммы [7, 8]. Также повышенный уровень анеуплоидии хромосом сперматозоидов увеличивает риск развития хромосомной патологии у детей [9].

Нарушения сперматогенеза выражаются в различных видах патозооспермии: олигозооспермии (ОЗС), астенозооспермии (АЗС), тератозооспермии (ТЗС) и др. Эффективность программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) может различаться в зависимости от вида патозооспермии вследствие различного уровня анеуплоидии хромосом сперматозоидов и, как следствие, эмбрионов. В литературе существуют противоречивые данные о преимущественном негативном влиянии того или иного вида патозооспермии на исходы программ ВРТ. Например, в ряде работ были получены данные о важной роли ТЗС в развитии неудач ЭКО [10, 11]. У мужчин с ТЗС часто наблюдается повышение уровня анеуплоидии хромосом в половых клетках [5, 12]. Другие исследователи подчеркивают, что ОЗС и АЗС в большей степени, чем ТЗС, влияют на исходы программ ВРТ вследствие выявленного повышенного уровня анеуплоидии хромосом сперматозоидов в этой группе мужчин [13, 14]. Однако в целом исследований по оценке влияния различных нарушений сперматогенеза на исходы ЭКО/ИКСИ вследствие повышенного уровня анеуплоидии хромосом сперматозоидов недостаточно, они сопряжены со значительными ошибками исследования (недостаточный объем выборки, различные методы оценки параметров спермограммы, различные методы определения анеуплоидии хромосом и исходов ЭКО).

На основании этого целью исследования стало изучение эффективности программ ВРТ у пар с различными видами патозооспермии у мужчин в зависимости от уровня анеуплоидии сперматозоидов.

Материалы и методы

В проспективное когортное исследование были рекрутированы 86 супружеских пар с мужским фактором бесплодия, проходящих лечение в отделении ВРТ. Критериями включения со стороны женщины были: нормальный кариотип, возраст до 38 лет, нормальный овариальный резерв, уровень фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) менее 12 мМЕ/мл, отсутствие противопоказаний к проведению ВРТ, указание на наличие не более двух неудачных попыток ЭКО в анамнезе. Со стороны мужчины условиями включения в исследование были нормальный кариотип, отсутствие указаний на проведение химио- или лучевой терапии в анамнезе, отсутствие острых воспалительных заболеваний, обструкции семявыносящих путей и приема лекарственных средств со спермотоксичным действием. Критериями исключения были развитие синдрома гиперстимуляции яичников средней или тяжелой степени на фоне стимуляции функции яичников в данном цикле ЭКО, а также другие состояния и осложнения, требующие отмены переноса эмбрионов (ПЭ) в изучаемом цикле. Все пациенты подписали информированное согласие на участие в исследовании.

Мужчинам проводился анализ эякулята согласно рекомендациям ВОЗ 2010 года дважды с интервалом в 3 месяца [15]. Эякулят собирался путем мастурбации после 3 дней полового воздержания. В зависимости от результатов спермограммы у мужчин супружеские пары были поделены на 3 группы. Группу 1 составили пациенты с ТЗС (доля патологических форм сперматозоидов более 96%) без других значимых нарушений сперматогенеза. Группа 2 была представлена пациентами с АЗС и/или ОЗС (общая подвижность сперматозоидов менее 40% и подвижность сперматозоидов с прогрессивным движением менее 32%) без ТЗС. Группу сравнения (группу 3) составили пациенты с нормозооспермией (НЗС).

Перед включением в протокол ЭКО пациенты были обследованы согласно приказу Минздрава Российской Федерации от 30.08.2012 № 107н «О порядке использования вспомогательных репродуктивных технологий, противопоказаниях и ограничениях к их применению» [...

Долгушина Н.В., Сокур С.А., Глинкина Ж.И., Калинина Е.А.