Эпидемиология и Инфекционные болезни. Актуальные вопросы №3 / 2012
Использование молекулярно-биологических методов при этиологической диагностике оппортунистических инфекций центральной нервной системы у пациентов с ВИЧ-инфекцией
ФБУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва; ГОУ ВПО Московский государственный медико-стоматологический университет Минздравсоцразвития России; ГКУЗ Инфекционная клиническая больница № 2 Департамента здравоохранения города Москвы
Цель исследования. Оценка эффективности использования молекулярно–биологических методов (ПЦР) при этиологической диагностике оппортунистических инфекций центральной нервной системы (ЦНС) у пациентов с ВИЧ-инфекцией.
Материалы и методы. В период с января 2009 г. по июнь 2010 г. обследовано 96 пациентов с ВИЧ-инфекцией и клиническими признаками поражения ЦНС. Обследование включало динамическое клиническое наблюдение, оценку неврологического статуса, лабораторное исследование периферической крови и спинномозговой жидкости (СМЖ). При летальном исходе учитывались результаты патологоанатомического исследования.
Результаты. Выявлена зависимость частоты обнаружения ДНК возбудителей ВИЧ-ассоциированных инфекций ЦНС от степени иммунодефицита. Показана высокая специфичность метода ПЦР при дифференциальной диагностике оппортунистических инфекций ЦНС по сравнению с традиционно используемыми лабораторными методами.
Заключение. Одновременное исследование периферической крови и СМЖ повышает эффективность этиологической диагностики поражений ЦНС у пациентов с ВИЧ-инфекцией.
Наиболее частыми и тяжелыми осложнениями у пациентов с ВИЧ-инфекцией являются поражения центральной нервной системы (ЦНС). Они могут быть непосредственно связаны с воздействием ВИЧ на клетки головного мозга или являться следствием развития аутоиммунных процессов, оппортунистических и вторичных заболеваний, злокачественных новообразований и других факторов. С момента появления антиретровирусной терапии число случаев поражений ЦНС оппортунистическими инфекциями уменьшилось, однако спектр данных нарушений не изменился [1, 2].
Установлено, что главной причиной неврологической патологии у больных на поздних стадиях ВИЧ-инфекции является церебральный токсоплазмоз: 34,7% случаев поражения головного мозга и 11% – в виде генерализованного процесса с вовлечением головного мозга, печени, легких и глаз. Ежегодная частота выявления криптококкового менингита среди поражений ЦНС при ВИЧ-инфекции составляет от 0,5 до 1,4%. Цитомегаловирусный вентрикулоэнцефалит ежегодно диагностируют в 0,9–4% случаев поражения ЦНС. Туберкулезный менингоэнцефалит регистрирют у 16–32% больных. В 20% случаев причина поражения ЦНС остается нерасшифрованной [3].
Этиологическая диагностика поражений ЦНС у пациентов с ВИЧ-инфекцией представляет собой особую сложность, обусловленную нечеткостью клинической картины, а также недостаточной информативностью рутинных методов исследования [1–3].
У больных ВИЧ-инфекцией с выраженным иммунодефицитом использование иммунологических методов, основанных на определении маркеров оппортунистических инфекций (специфических антител классов IgА, IgG с определением авидности, IgМ), ограничено [1–4]. Поэтому основную роль при верификации диагноза у данных пациентов играет использование прямых методов исследования.
Традиционно используемые рутинные бактериологические и паразитологические методы обладают высокой специфичностью, но низкой чувствительностью. Применение вирусологических методов ограничено в связи с их технической сложностью и высокой стоимостью. Основным недостатком культуральных методов лабораторной диагностики также является продолжительность исследования. Так, для выделения и идентификации C. neoformans необходимо не менее 3–10 дней [5]. Таким образом, использование более чувствительных и точных методик на основе ПЦР является наиболее перспективным.
Цель исследования – оценить эффективность использования молекулярно–биологических методов (ПЦР) при этиологической диагностике оппортунистических инфекций ЦНС у пациентов с ВИЧ-инфекцией.
Материалы и методы
В период с января 2009 г. по июнь 2010 г. обследовано 96 пациентов с ВИЧ–инфекцией на различных стадиях заболевания (диагноз подтвержден стандартными методами) с клиническими признаками поражения ЦНС (общемозговая, менингеальная, очаговая симптоматика), проходивших стационарное лечение в ИКБ № 2 Москвы. Возраст пациентов составил от 19 до 52 лет (средний возраст 26 лет). Среди них женщины составляли 31%, мужчины – 69%. Обследование включало динамическое клиническое наблюдение, оценку неврологического статуса, в том числе с использованием метода нейровизуализации [магнитно-резонансная томография (МРТ) головного мозга], определение иммунного статуса, общий клинический, бактериологический и микроскопический анализ спинномозговой жидкости (СМЖ), исследование периферической крови, СМЖ с использованием молекулярно-биологического (ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией результатов амплификации в режиме реального времени) и иммунологического (ИФА) методов диагностики. При летальном исходе (10 пациентов) диагноз был верифицирован на основании результатов патологоанатомического исследования.
Материалом для исследования являлись 96 образцов периферической крови и 96 образцов СМЖ. Методом ПЦР в крови выявляли ДНК Varicella–Zoster virus, количествен...
