Эпидемиология и Инфекционные болезни. Актуальные вопросы №3 / 2012

Использование молекулярно-биологических методов при этиологической диагностике оппортунистических инфекций центральной нервной системы у пациентов с ВИЧ-инфекцией

1 сентября 2012

ФБУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва; ГОУ ВПО Московский государственный медико-стоматологический университет Минздравсоцразвития России; ГКУЗ Инфекционная клиническая больница № 2 Департамента здравоохранения города Москвы

Цель исследования. Оценка эффективности использования молекулярно–биологических методов (ПЦР) при этиологической диагностике оппортунистических инфекций центральной нервной системы (ЦНС) у пациентов с ВИЧ-инфекцией.
Материалы и методы. В период с января 2009 г. по июнь 2010 г. обследовано 96 пациентов с ВИЧ-инфекцией и клиническими признаками поражения ЦНС. Обследование включало динамическое клиническое наблюдение, оценку неврологического статуса, лабораторное исследование периферической крови и спинномозговой жидкости (СМЖ). При летальном исходе учитывались результаты патологоанатомического исследования.
Результаты. Выявлена зависимость частоты обнаружения ДНК возбудителей ВИЧ-ассоциированных инфекций ЦНС от степени иммунодефицита. Показана высокая специфичность метода ПЦР при дифференциальной диагностике оппортунистических инфекций ЦНС по сравнению с традиционно используемыми лабораторными методами.
Заключение. Одновременное исследование периферической крови и СМЖ повышает эффективность этиологической диагностики поражений ЦНС у пациентов с ВИЧ-инфекцией.

Наиболее частыми и тяжелыми осложнениями у пациентов с ВИЧ-инфекцией являются поражения центральной нервной системы (ЦНС). Они могут быть непосредственно связаны с воздействием ВИЧ на клетки головного мозга или являться следствием развития аутоиммунных процессов, оппортунистических и вторичных заболеваний, злокачественных новообразований и других факторов. С момента появления антиретровирусной терапии число случаев поражений ЦНС оппортунистическими инфекциями уменьшилось, однако спектр данных нарушений не изменился [1, 2].

Установлено, что главной причиной неврологической патологии у больных на поздних стадиях ВИЧ-инфекции является церебральный токсоплазмоз: 34,7% случаев поражения головного мозга и 11% – в виде генерализованного процесса с вовлечением головного мозга, печени, легких и глаз. Ежегодная частота выявления криптококкового менингита среди поражений ЦНС при ВИЧ-инфекции составляет от 0,5 до 1,4%. Цитомегаловирусный вентрикулоэнцефалит ежегодно диагностируют в 0,9–4% случаев поражения ЦНС. Туберкулезный менингоэнцефалит регистрирют у 16–32% больных. В 20% случаев причина поражения ЦНС остается нерасшифрованной [3].

Этиологическая диагностика поражений ЦНС у пациентов с ВИЧ-инфекцией представляет собой особую сложность, обусловленную нечеткостью клинической картины, а также недостаточной информативностью рутинных методов исследования [1–3].

У больных ВИЧ-инфекцией с выраженным иммунодефицитом использование иммунологических методов, основанных на определении маркеров оппортунистических инфекций (специфических антител классов IgА, IgG с определением авидности, IgМ), ограничено [1–4]. Поэтому основную роль при верификации диагноза у данных пациентов играет использование прямых методов исследования.

Традиционно используемые рутинные бактериологические и паразитологические методы обладают высокой специфичностью, но низкой чувствительностью. Применение вирусологических методов ограничено в связи с их технической сложностью и высокой стоимостью. Основным недостатком культуральных методов лабораторной диагностики также является продолжительность исследования. Так, для выделения и идентификации C. neoformans необходимо не менее 3–10 дней [5]. Таким образом, использование более чувствительных и точных методик на основе ПЦР является наиболее перспективным.

Цель исследования – оценить эффективность использования молекулярно–биологических методов (ПЦР) при этиологической диагностике оппортунистических инфекций ЦНС у пациентов с ВИЧ-инфекцией.

Материалы и методы

В период с января 2009 г. по июнь 2010 г. обследовано 96 пациентов с ВИЧ–инфекцией на различных стадиях заболевания (диагноз подтвержден стандартными методами) с клиническими признаками поражения ЦНС (общемозговая, менингеальная, очаговая симптоматика), проходивших стационарное лечение в ИКБ № 2 Москвы. Возраст пациентов составил от 19 до 52 лет (средний возраст 26 лет). Среди них женщины составляли 31%, мужчины – 69%. Обследование включало динамическое клиническое наблюдение, оценку неврологического статуса, в том числе с использованием метода нейровизуализации [магнитно-резонансная томография (МРТ) головного мозга], определение иммунного статуса, общий клинический, бактериологический и микроскопический анализ спинномозговой жидкости (СМЖ), исследование периферической крови, СМЖ с использованием молекулярно-биологического (ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией результатов амплификации в режиме реального времени) и иммунологического (ИФА) методов диагностики. При летальном исходе (10 пациентов) диагноз был верифицирован на основании результатов патологоанатомического исследования.

Материалом для исследования являлись 96 образцов периферической крови и 96 образцов СМЖ. Методом ПЦР в крови выявляли ДНК Varicella–Zoster virus, количествен...

Сафонова А.П., Домонова Э.А., Скачкова Т.С., Романюк Т.Н., Шипулина О.Ю., Киреев Д.E., Венгеров Ю.Я., Серебряков Е.М., Иванников Е.В., Мартынова Н.Н., Шипулин Г.А.
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.