Акушерство и Гинекология №10 / 2019
Исследование полиморфизмов rs3020434, rs11742635, rs124577644, rs12637801, rs2861221, rs17677069 у женщин с миомой матки и отягощенным анамнезом
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии
им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия
Цель. Оптимизация диагностики, тактики ведения пациенток и прогнозирования риска рецидивирования путем поиска генетических маркеров развития миомы матки (ММ).
Материалы и методы. Сбор образцов тканей 329 миом и аликвот крови от 106 пациенток исследуемой группы и 24 образца крови от пациенток контрольной группы. Выделение ДНК и амплификация экзона 2 гена MED 12 и генотипирование по шести локусам (rs3020434, rs11742635, rs124577644, rs12637801, rs2861221, rs17677069) генов ESR1, FBN2, CELF4, KCWMB2.
Результаты и обсуждение. Статистический анализ показал, что частоты редких аллелей однонуклеотидных полиморфизмов rs3020434, rs11742635, rs2861221 и rs176069 ниже среди женщин с ММ и практически не встречаются в группе пациенток с отягощенным анамнезом по сравнению с группой контроля и общей популяционной частотой, что, вероятно, может свидетельствовать о «протективной» роли данных аллелей, следовательно, возможно их использование в качестве маркеров прогнозирования вероятности развития и рецидивирования ММ.
Заключение. Редкие аллели полиморфизмов генов rs3020434, rs11742635, rs2861221 и rs17677069 не встречаются в группах с отягощенным анамнезом, что, вероятно, позволит в будущем применять их для комплексного диагностирования вероятности развития ММ, а также прогнозирования риска рецидивирования.
В последние несколько десятилетий во всем мире наблюдается повышение частоты обнаружения гормонозависимых опухолей. Среди таких патологий репродуктивной системы лидирующее положение занимает миома матки (ММ).
Лейомиома матки – доброкачественная моноклональная, хорошо отграниченная, капсулированная опухоль, происходящая из гладкомышечных клеток шейки или тела матки, частота которой среди женщин репродуктивного возраста варьирует от 30 до 70% [1, 2].
Несмотря на доброкачественность процесса, симптоматика данного заболевания достаточно многообразна: дисфункция тазовых органов, аномальные маточные кровотечения, анемия, болевой синдром. Данные симптомы и определяют высокую частоту оперативных вмешательств по поводу ММ в гинекологических стационарах, особенно высока доля гистерэктомий у женщин репродуктивного возраста в связи с наличием данной опухоли [1, 3]. Развитие ММ может также стать причиной бесплодия, осложнять течение беременности, вызывая проблемы не только при вынашивании, но и в родах [4].
Упомянутые выше факты делают данное заболевание одной из важнейших социально значимых проблем репродуктивной системы женщин и определяют актуальность изучения патогенеза ММ, оптимизации диагностики, тактики ведения пациенток и прогнозирования риска рецидивирования данного заболевания.
Этиопатогенетические механизмы развития ММ до настоящего времени остаются дискуссионными и недостаточно изученными. Однако имеются сведения, согласно которым развитию ММ могут способствовать репродуктивный возраст, этническое происхождение (например, среди жительниц США миомы чаще встречаются у женщин афроамериканского происхождения), семейный анамнез, повышенный индекс массы тела (ИМТ) [5], стрессы, патологические процессы в иммунной системе, беременность, гормональный статус, а также генетические механизмы [5–7].
Наличие «семейных форм» данного заболевания у 5–10% женщин с ММ [6] свидетельствует о ключевой роли генетических механизмов в патогенезе данного заболевания.
Поиски генетических маркеров развития ММ активно ведутся на протяжении последних нескольких лет. Наиболее значимым открытием в этой области оказалось описание соматических мутаций в гене MED12, который кодирует одну из субъединиц медиаторного комплекса РНК-полимеразы II.
После публикации в 2015 г. группой авторов исследования [8], согласно которому встраивание в геном мышей мутантного аллеля гена MED12 ведет к развитию ММ, по всему миру начали активно исследовать данный ген у женщин с ММ в зависимости от локализации узлов, их размеров, количества [9, 10].
В предыдущем нашем исследовании мы выявили, что в общей популяции российских женщин в 50% образцов миоматозных узлов обнаруживались соматические мутации в экзоне 2 гена MED12 [11].
Дальнейшее изучение соматических мутаций в гене MED12 позволило нам обнаружить взаимосвязь между наличием мутаций в изучаемом гене и отягощенным анамнезом. Согласно полученным нами данным, в 61% узлов, полученных от женщин с отягощенным анамнезом, были обнаружены соматические мутации в экзоне 2 гена MED12 против 48% в группе женщин без отягощенного анамнеза (р=0,109) [12]. Также в ходе проведения исследования мы описали несколько уникальных соматических мутаций, которые ранее в источниках литературы и базах данных не упоминались.
Создание панелей генетических маркеров до сих пор остается одним из самых наукоемких направлений в репродуктивной генетике. Применение таких панелей может способствовать оптимизации тактики ведения, ранней диагностики, прогнозирования рисков рецидивирования ряда распространенных гинекологических заболеваний.
Цель исследования – выявить ассоциации полиморфизмов генов rs3020434, rs11742635, rs124577644, rs12637801, rs2861221, rs17677069 с отягощенностью анамнеза пациенток по ММ с дальнейшим выделением группы генов, способствующих развитию миомы, и «протективных» генов, препятствующих развитию данного заболевания.
Материалы и методы
В 2017–2018 гг. в отделении оперативной гинекологии ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» были собраны образцы тканей 329 миом и аликвоты крови от 106 пациенток (от 1 до 5 миоматозных узлов от каждой), а также 24 аликвоты крови от пациенток для группы контроля.
Всем пациенткам проведено полное клинико-анамнестическое обследование: сбор анамнеза, общий и гинекологический осмотр, ультразвуковое исследование (УЗИ) органов малого таза, клинико-лабораторное обследование. Эндоскопическую операцию проводили по стандартизированной методике с помощью эндовидеохирургического оборудования фирмы KarlStorz (Германия). Сбор образцов тканей миом производили непосредственно во время операций по миомэктомии (МЭ) или гистероэктомии (ГЭ) в зависимости от размера и количества узлов. Фрагменты тканей помещали в физиологический раствор, отправляли в биобанк ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» и замораживали на –70 °С для последующего хранения в коллекции. Образцы каждого узла также подвергали гистологическому исследованию с целью подтверждения наличия исключительн...
