Акушерство и Гинекология №3 / 2018

Изменение концентрации внеклеточной ДНК во время беременности

4 апреля 2018

1 ФГБУ Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии
им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва;
2 ГБОУВПО Первый московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Минздрава России

Цель исследования. Определить концентрацию внеклеточной ДНК (оДНК) и ее фракций в плазме крови в динамике беременности с учетом возможного влияния индекса массы тела (ИМТ) женщины, анемии беременных, массы плода и плаценты. Материал и методы. Определена концентрация оДНК, ДНК плода (пДНК) и ДНК матери (мДНК) в крови женщины в промежутках 11–14, 24–26 и 30–32 недели. Уровень оДНК был оценен количественной полимеразной цепной реакцией путем определения концентрации гена RASSF1A, уровень пДНК – путем определения гиперметилированной части RASSF1A гена. Результаты. Концентрация внеклеточной оДНК и мДНК существенно не меняется в течение беременности. пДНК относительно стабильна до середины срока гестации (в среднем 1265,11±577,51 ГЕ/мл в 11–14 недель и 1309,09±561,01 ГЕ/мл в 24–26 недель) и значительно возрастает во второй половине беременности. Уровень внеклеточной ДНК и ее фракций не меняется в зависимости от ИМТ женщины, массы плода и плаценты. При анемии концентрация мДНК составила в среднем 12362,33±5533,22 ГЕ/мл и была достоверно меньше, что у здоровых беременных (в среднем 15268,49±5973,43) (р<0,05). Заключение. Полученные данные подтверждают изменение концентрации внеклеточной ДНК в динамике беременности, что необходимо учитывать при прогнозировании ее осложнений. Для исключения влияния других материнских и плодовых факторов необходимо продолжение исследований.

Последние годы ознаменовались разработкой и внедрением в клиническую практику методов неинвазивного пренатального тестирования анеуплоидий на основе анализа внеклеточной ДНК плода (пДНК) [1]. В настоящее время определение пДНК активно используется в неинвазивной пренатальной диагностике анеуплоидий плода, определении RhD принадлежности и заболеваний, сцепленных с полом плода [2].

Выделяется пДНК из общей внеклеточной ДНК (оДНК), в состав которой входит также ДНК матери (мДНК). Основным источником пДНК в материнской крови являются клетки трофобласта, подвергающиеся апоптозу [3, 4]. Под влиянием гипоксии и окислительного стресса значительно усиливается апоптоз клеток трофобласта, что, как известно, является важным патогенетическим звеном в развитии осложнений беременности, таких как преэклампсия и задержка роста плода [5]. Тем самым, определение концентрации внеклеточной пДНК в крови женщины может также служить маркером патофизиологических изменений в плаценте и предиктором осложнений беременности, ассоциированных с плацентарной дисфункцией. Клиническое применение данного маркера с целью прогнозирования осложнений беременности не может быть реализовано без учета потенциальных факторов, которые могут оказывать влияние на концентрацию внеклеточной пДНК в различные сроки беременности. Так, имеются данные о влиянии возраста женщины, индекса массы тела (ИМТ), курения, массы плода и плаценты. Некоторые исследователи, такие как M. Haghiac и соавт. (2012), продемонстрировали, что концентрация оДНК повышена у женщин с ожирением, в отличие от пДНК [6]. Напротив, O. Lapaire и соавт. (2009) не нашли корреляции концентрации, как оДНК с увеличением ИМТ женщины, так и пДНК [7]. M. Smid и соавт. (2003) обнаружили существенную положительную корреляцию между увеличением массы плаценты и концентрацией пДНК, в то время как другие исследователи аналогичную связь не обнаружили [7, 8]. Кроме того, представляет интерес определение содержания внеклеточной ДНК у женщин с измененным клеточным составом крови вследствие анемии. В литературе имеется только одно исследование, в котором изучали концентрацию пДНК при анемии беременных, однако нет сведений об оДНК и мДНК [9]. Таким образом, существуют противоречивые данные о влиянии материнских и плодовых факторов на уровни внеклеточной мДНК и пДНК в крови матери.

В связи с этим целью данной работы стало определение концентрации внеклеточной ДНК и ее фракций в динамике беременности с учетом возможного влияния ИМТ, анемии беременных, массы плода и плаценты.

Материал и методы исследования

Исследование проводили в ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России с 15 января 2016 г. по 15 апреля 2017 г.

В исследование включены 24 женщины с одноплодной беременностью. Все женщины были соматически здоровы и имели неотягощенный акушерско-гинекологический анамнез. Критериями исключения из исследования послужили такие осложнения беременности, как преэклампсия, преждевременные роды, задержка роста плода, гестационная артериальная гипертензия, гестационный сахарный диабет, хромосомные аномалии и пороки развития плода, аномалии прикрепления и расположения плаценты, острая фаза и обострение хронических инфекционных заболеваний. У 13 женщин беременность протекала без осложнений, у 11 женщин была выявлена анемия легкой степени во II (n=2) и III (n=11) триместрах беременности. На проведение исследования получено разрешение комиссии по этике ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Перед забором биологического материала все женщины подписали информированное согласие на участие в клиническом исследовании.

Забор венозной крови для определения внеклеточной ДНК производили трижды: в промежутках 11–14, 24–26 и 30–32 недели. Было собрано по пять мл периферической крови в вакуумные пробирки, содержащие ЭДТА, и обработано в течение часа после забора. Плазма крови была выделена центр фугиров...

Карапетян А.О., Красный А.М., Садекова А.А., Хлестова Г.В., Балашов И.С., Баев О.Р.
Статья платная, чтобы прочесть ее полностью, вам необходимо произвести покупку
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.