Изменение содержания регуляторных Т-лимфоцитов и концентрации растворимого рецептора интерлейкина-2 в крови больных ишемической болезнью сердца после ангиопластики коронарных артерий с имплантацией стентов с рапамициновым покрытием

Изучена динамика содержания субпопуляций лимфоцитов, в том числе регуляторных и эффекторных Т-лимфоцитов, а также концентрации растворимой формы рецептора интерлейкина-2 (sCD25) в периферической крови у больных, перенесших коронарное стентирование (КС) с имплантацией стентов с рапамициновым покрытием (СРП). В исследование включены 62 пациента со стабильной стенокардией напряжения II—III функционального класса. Каждому пациенту была выполнена коронарография (КГ), 42 больным проведено КС с имплантацией одного или двух СРП. Образцы крови забирали до КГ/КС, через 24, 48 ч, 7 дней, 1 и 3 мес после вмешательства. Содержание Т-, хелперных и цитотоксических Т-клеток, В-, NK-, NKT-клеток, активированных эффекторных Т-лимфоцитов (CD4+CD25lowCD127high) и регуляторных Т-лимфоцитов (CD4+CD25highCD127low) определяли с помощью прямой иммунофлуоресценции и цитометрии в потоке. Лимфоциты CD4+ выделяли из мононуклеарной фракции клеток крови доноров методом магнитной сепарации, содержание регуляторных Т-лимфоцитов в культуре определяли по экспрессии специфического маркера FOXP3+. Концентрацию sCD25 измеряли хемилюминесцентным методом. Показано, что содержание основных субпопуляций лимфоцитов в крови не изменялось после проведения КС или КГ. Содержание регуляторных Т-лимфоцитов и sCD25 в крови значимо повышалось через 7 дней и 1 мес после КС, но не после КГ. Концентрация sCD25 в плазме коррелировала с содержанием регуляторных Т-лимфоцитов через 1 мес после имплантации СРП. При культивировании лимфоцитов CD4+ в присутствии рапамицина отмечались антипролиферативный эффект в отношении FOXP3-клеток и накопление регуляторных FOXP3+Т-лимфоцитов. Таким образом, имплантация в коронарные артерии СРП приводит к увеличению количества циркулирующих регуляторных Т-лимфоцитов и концентрации sCD25 в крови. Изменения этих показателей после КС могут отражать особенности локальной и системной реакции, возникающей в ответ на внедрение стента с лекарственным покрытием и иметь значение для оценки прогноза заболевания.

Одним из перспективных способов лечения ишемической болезни сердца (ИБС) является стентирование коронарных артерий. Имплантация стента в суженный участок коронарной артерии позволяет эффективно расширить просвет сосуда, но в ответ на наносимую сосуду травму в стентированном участке возникает воспалительная реакция, которая в конечном итоге может привести к развитию рестеноза. Существенно снизить частоту рестенозирования позволили стенты с лекарственным покрытием, среди которых широкое распространение получили стенты, покрытые рапамицином (сиролимусом).

Рапамицин, а также его производные (зотаролимус, эверолимус, такролимус) относятся к группе макроциклических лактонных антибиотиков. По данным многочисленных экспериментальных исследований, рапамицин подавляет пролиферацию фибробластов, эндотелиальных и гладких мышечных клеток, а также В-лимфоцитов и большинства Т-лимфоцитов [1, 2], играющих решающую роль в воспалительном процессе в стенке сосуда, индуцированном установкой стента, и росте неоинтимы. Противоположным образом рапамицин действует на субпопуляцию регуляторных Т-лимфоцитов, способствуя их накоплению как в культуре лимфоцитов [3, 4], так и в крови больных на фоне перорального приема препарата [5, 6]. Считают, что такой эффект рапамицина обусловлен наличием в регуляторных Т-лимфоцитах альтернативных путей внутриклеточного сигнала, который препятствует остановке клеточного цикла и апоптозу клеток [7].

Регуляторные Т-лимфоциты являются основной субпопуляцией лимфоцитов, осуществляющей гомеостаз иммунной системы за счет супрессорной активности по отношению к другим клеткам, в том числе эффекторным Т-лимфоцитам [8]. Регуляторные Т-лимфоциты выявлены в атеросклеротических бляшках сонных [9] и коронарных артерий человека [10]. Предполагается, что регуляторные Т-лимфоциты оказывают противовоспалительное действие и способны стабилизировать атеросклеротический процесс [11, 12]. В периферической крови человека естественные регуляторные Т-клетки составляют 5—10% от лимфоцитов CD4+ и характеризуются высокой мембранной плотностью рецептора интерлейкина (ИЛ) 2 (идентифицируемого по α-субъединице CD25) и низкой экспрессией рецептора ИЛ-7 (идентифицируемого по α-субъединице CD127). Специфическим маркером регуляторных Т-лимфоцитов служит внутриклеточный фактор транскрипции FOXP3 [13].

При коронарном стентировании постепенное, в течение 3—4 нед, высвобождение рапамицина из покрытия коронарного стента подавляет развитие воспалительного процесса, миграцию и пролиферацию гладких мышечных клеток стенки сосуда и, таким образом, существенно замедляет рост неоинтимы [14]. В доступной нам литературе мы не обнаружили данных о влиянии имплантации стентов с рапамициновым покрытием (СРП) на субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови. Ранее мы показали, что установка СРП в коронарные артерии приводит к увеличению содержания регуляторных Т-лимфоцитов в системном кровотоке через 1 мес после вмешательства [15].

Целью настоящего исследования явилось изучение динамики содержания основных субпопуляций лимфоцитов, в том числе регуляторных и эффекторных Т-лимфоцитов, а также концентрации растворимой формы рецептора ИЛ-2 (sCD-25) в периферической крови у больных, перенесших коронарное стентирование (КС) с имплантацией СРП.

Материал и методы

В исследование были включены 62 пациента со стабильной стенокардией напряжения и наличием показаний к проведению коронарографии (КГ). В исследование не включали пациентов с острым коронарным синдромом, воспалительными заболеваниями, хронической почечной или печеночной недостаточностью. Группу КС составили 42 пациента, которым была выполнена успешная коронарная ангиопластика с имплантацией одного (n=26, 61,9%) или двух (n=16, 38,1%) СРП (Cypher, производство Cordis, США). В контрольную группу были включены 20 пациентов, которым выполнялась только диагностическая КГ. По основным клинико-анамнестическим характеристикам группы больных были сопоставимы (табл. 1).

Таблица 1. Характеристика группы больных, перенесших КС с имплантацией СРП, и контрольной группы больных ИБС, которым выполнялась только диагностическая КГ

Примечание. Данные представлены в виде абсолютного числа больных (%), если не указано другое. КС — коронарное стентирование; СРП — стент с рапамициновым покрытием; ИБС — ишемическая болезнь сердца; КГ — коронарография.

КГ выполняли на аппарате Coroscop-33 (Siemens); съемку каждого стеноза проводили как минимум в 2 ортогональных проекциях для его лучшей...

А.В. ПОТЕХИНА, В.О. СОКОЛОВ, Е.А. ПЫЛАЕВА, С.И. ПРОВАТОРОВ, В.П. МАСЕНКО, Е.Г. БОСЫХ, Е.А. НОЕВА, Т.Л. КРАСНИКОВА, Т.И. АРЕФЬЕВА