Изучение вирусной нагрузки и показателей иммунного статуса у женщин с хронической HBV-инфекцией в III триместре беременности

Цель исследования. Изучение вирусной нагрузки и показателей иммунного статуса у женщин с хроническим гепатитом В (ХГВ) в III триместре беременности.
Материалы и методы. Обследовано 50 женщин с ХГВ на сроке беременности 28–36 нед.
Результаты. Выявлено, что хроническая HBV-инфекция у беременных, представленная преимущественно HBeAg-негативным гепатитом, сопровождается в III триместре редкими цитолитическими обострениями, повышением вирусной нагрузки, снижением показателей количества Т-хелперов и иммунорегуляторного индекса, повышением количества активированных Т-лимфоцитов и естественных киллеров и уровня циркулирующих иммунных комплексов, их положительной корреляцией с уровнем АЛТ и АСТ, повышением уровня IgG и их положительной корреляционной связью с уровнями IgA и IgM.
Заключение. Вирусная нагрузка у беременных с ХГB в III триместре характеризуется стойкими умеренными положительными корреляционными связями с уровнем Т-лимфоцитов и отрицательными связями с содержанием естественных киллеров.

По данным ВОЗ, вирусом гепатита В (HBV) в мире инфицировано около 2 млрд человек, около 350 млн человек имеют хроническую инфекцию, около 600 000 человек ежегодно умирают от острой или хронической формы гепатита В [1].

В России отмечаются стабильно высокие уровни заболеваемости впервые выявленными хроническими формами гепатитов, из которых хронический гепатит В (ХГВ) составляет 24,1% [2]. Несмотря на проведение вакцинации против гепатита В и снижение заболеваемости острым гепатитом В во всех возрастных группах, в 2010 г. среди заболевших довольно значительным был удельный вес детей 1-го года жизни – 27,4%, показатель «носительства» HBV у них превышал показатель «носительства» среди детей до 17 лет в 4,4 раза [3]. Исходом инфицирования HBV на 1-ом году жизни в 90% случаев является ХГВ [1].

Основной путь инфицирования HBV детей 1-го года жизни – вертикальная передача от матери [4, 5]. Частота выявления HBsAg у беременных в Российской Федерации на протяжении последних лет составляет около 1,0–1,3 %, а частота выделения HBsAg у новорожденных детей от матерей-носителей HBV – 2,6% [3]. ХГВ у беременных характеризуется маловыраженной симптоматикой [6] и у 80% женщин во время беременности выявляется впервые [7].

Инфицирование HBV ребенка от матери происходит, главным образом, во время родов, но может происходить трансплацентарно, редко – постнатально [5]. Ведущим фактором риска вертикальной передачи HBV считают высокий уровень вирусной нагрузки у матери во время беременности и в момент родов [5, 6].

Известно, что элиминация вируса и патогенез заболевания в значительной степени опосредованы адаптивным иммунным ответом на HBV-инфекцию [8]. Дефицит клеточного иммунного ответа сопровождается высоким уровнем репликации HBV в печени пациентов даже при отсутствии цитологических нарушений или воспаления [8].

Цель исследования – изучение вирусной нагрузки и показателей иммунного статуса у женщин с хронической HBV-инфекцией в III триместре беременности.

Материалы и методы

Исследование у беременных с хронической HBV-инфекцией проводили согласно правилам национального стандарта Российской Федерации (ГОСТ Р 52379–2005) «Надлежащая клиническая практика» на основании заключения ЛЭК Сибирского государственного медицинского университета (регистрационный № 1371 от 19.04.2010). В исследование были включены 50 беременных с подтвержденным диагнозом ХГВ в фазе репликации, без дельта-инфекции, подписавших информированное согласие. Контрольную группу составили 34 практически здоровые беременные.

Исследование маркерного спектра проводили методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием наборов реагентов для диагностики гепатита В ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск). Выявление ДНК HBV в сыворотке крови осуществляли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией с использованием набора реагентов «АмплиСенсR HBV-FL» (Москва). Количественное содержание ДНК HBV (вирусная нагрузка) определяли методом ПЦР в режиме реального времени с использованием тестовых систем компании «ДНК-Технология» (Москва).

Иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови проводили методом лазерной проточной цитофлуориметрии с использованием моноклональных антител к дифференцировочным антигенам лимфоцитов периферической крови на проточном цитофлуориметре COULTERR EPICSR XL («Beckman Coulter», США). В периферической крови у беременных на сроке 28–36 нед были определены относительное и абсолютное количество показателей иммунного статуса: CD3+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+CD4+/CD3+CD8+, CD3-CD16+56+, CD19+, CD3+HLA-DR+, NKT-клетки.

Определение сывороточных иммуноглобулинов классов M, A, G проводили методом ИФА с использованием тестовых систем «Иммуноскрин-G, M, A – ИФА – БЕСТ» (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск). Определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови выполняли с помощью 4% раствора полиэтиленгликоля методом преципитации.

Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью программы PASW Statistics for Windows® Release 18.0. Проверку выборок на соответствие нормальному закону распределения выполняли на основании критерия Шапиро–Уилка. Оценку показателей клеточного и гуморального иммунного статуса проводили с использованием параметрического критерия Стьюдента для независимых выборок (t). Уровень вирусной нагрузки рассчитывали на основании медианы (Ме) и интерквартильной широты [Q1; Q3]. Оценку динамики вирусной нагрузки определяли с помощью непараметрического критерия Уилкоксона (в парных выборках). Проверку статистической значимости различий между относительными частотами событий проводили с помощью критерия χ². Анализ взаимосвязей между количественными данными, подчиняющихся но...

Ковалева Т.А., Чуйкова К.И.