Акушерство и Гинекология №4 / 2013
Клинические и молекулярно-генетические факторы риска преждевременного разрыва плодных оболочек
ФГБУ НЦ АГиП им. В.И. Кулакова Минздрава России, Москва; ООО «Эко-мед-сМ», Москва, Россия
Цель исследования. Оценить роль полиморфизмов генов структурных белков и системы регуляции гомеостаза экстрацеллюлярного матрикса (ЭЦМ) соединительной ткани в развитии преждевременного развития плодных оболочек (ПРПО).
Материал и методы. В исследование были включены 82 роженицы с ПРПО (I группа, основная), 97 рожениц без ПРПО (II группа, сравнения) (179 пар: мать-ребенок) на сроке беременности 37–41-я неделя. В качестве потенциальных молекулярно-генетических предикторов ПРПО были выбраны однонуклеотидные генные полиморфизмы (SNP), ассоциированные с нарушением гомеостаза соединительной ткани.
Результаты исследования. Установлены полиморфизмы генов MMP9 (генотип С/С MMP9 -1562 C>T) матери и MMP2 плода (генотип А/А гена MMP2: -735 C>A), при которых увеличивается риск ПРПО.
Заключение. Риск возникновения ПРПО увеличивается при наличии полиморфизмов генов MMP9 у матери и MMP2 у плода. Нарушение гомеостаза соединительной ткани может являться предрасполагающим фактором ПРПО.
Работа частично поддержана Государственным контрактом Министерства образования и науки РФ № 16.522.12.2009 от 29.09.2011.
Распространенность преждевременного разрыва плодных оболочек (ПРПО) колеблется от 3 до 19% [1–4], достигая 38–51% при преждевременных родах [5–9]. Несмотря на актуальность данной проблемы в акушерстве патогенез ПРПО, основным фактором которого считается инфекционно- воспалительный, изучен недостаточно. Вместе с тем, учитывая строение плодных оболочек (ПО), возможное участие факторов дезорганизации соединительной ткани, нарушение их архитекто- ники, интерес представляет изучение роли нарушения гомеостаза соединительной ткани в генезе ПРПО. Поэтому дальнейшее проведение молекулярно-генетических исследований актуально для поиска генетических предикторов уточнения патогенеза ПРПО.
Целью исследования было оценить роль полиморфизмов генов структурных белков и системы регуляции гомеостаза экстрацеллюлярного матрикса (ЭЦМ) соединительной ткани в развитии ПРПО.
Материали методы исследования
В пилотное исследование случай-контроль были включены 179 пациенток в возрасте от 18 до 45 лет (179 пар: мать-ребенок), на сроке беременности 37–41-я неделя. Перед включением в исследование у каждой пациентки было получено информированное согласие на участие. ПРПО определяли как излитие околоплодных вод не менее чем за два часа до начала регулярной родовой деятельности. Проводилось исследование влагалища и шейки матки при помощи стерильных зеркал, при этом отмечалось наличие жидких выделений в заднем своде влагалища. Также проводилось тестирование содержимого заднего свода влагалища на наличие α2-микроглобулина.
Пациентки с тяжелой вирусной и/или бактериальной инфекцией во время данной беременности, тяжелой экстрагенитальной патологией матери, дифференцированной дисплазией соединительной ткани (дДСТ), пороками развития плода в исследование не включались. Дополнительным критерием исключения для группы контроля послужило начало операции «кесарево сечение» до наступления регулярной родовой деятельности у пациенток с оперативными родами.
Все пациентки были разделены на две группы. I (основную) составили 82 роженицы, роды которых осложнились ПРПО, II (сравнения) – 97 рожениц, роды которых не осложнялись ПРПО. Были изучены особенности анамнеза, исходная клиническая характеристика, течение беременности, родов и послеродового периода, проанализированы особенности течения раннего неонатального периода.
У 56 пациенток всех групп и их новорожденных изучались однонуклеотидные генные полиморфизмы (SNP), которые представлены в табл. 1. Для определения полиморфизмов генов у пациенток использовалась венозная кровь, у новорожденных – пуповинная кровь. Забор крови из вены у беременных производился до родов по стандартной методике. Забор пуповинной крови производился в стерильных условиях в третьем периоде родов или во время кесарева сечения из сосудов пуповины.
Таблица 1. Список изученных полиморфизмов.
Определение замен одиночных нуклеотидов (табл. 1) проводили модифицированным методом «примыкающих проб» (adjacent probes, kissing probes), используя оригинальные олигонуклеотиды. Полимеразную цепную реакцию и определение температуры плавления олигонуклеотидных проб проводили с помощью детектирующего ам...
