Клиническое использование расширенного генетического обследования в тактике ведения пар с бесплодием неясного генеза

Цель: Уточнить долю бесплодия неясного генеза в общей структуре бесплодия, проанализировать клинические, эмбриологические и генетические особенности пациенток с бесплодием неясного генеза (БНГ).
Материалы и методы: Отбор пациентов для проведения настоящего исследования осуществлялся среди пар, обратившихся для проведения программы ЭКО/ИКСИ. На ретроспективном этапе исследования были проанализированы клинико-анамнестические данные 1500 супружеских пар, которым было проведено 2156 стимулированных циклов в период с 2020 г. по 2022 г. в НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова. Группу наблюдения составили 156 супружеских пар, обратившихся для проведения программы ЭКО, которым был установлен диагноз «бесплодие неясного генеза».
Результаты: Из общего количества пациентов, включенных в исследование, 10,4% был установлен диагноз «бесплодие неясного генеза». У 89,6% пар были установлены причины, приводящие к отсутствию наступления беременности. Пациентки с БНГ характеризовались большей продолжительностью бесплодия (в среднем 4,3 (1,2) года), чем пациентки с установленной причиной бесплодия (3,2 (2,4) года), различие статистически значимо (p<0,001, t-критерий Стьюдента). Для пациенток с БНГ характерны более низкие значения АМГ и числа антральных фолликулов по сравнению с контрольной группой: средние значения составили 2,6 (0,46) и 13,3 (2,9) соответственно против 3,61 (2,04) и 14,2 (4,0) (p<0,001 и p=0,004, U-критерий Манна–Уитни). Количество ооцитов, полученное с помощью трансвагинальной пункции яичников, оказалось практически одинаковым в обеих группах пациенток. Сравнение показателей последующих стадий эмбриологического этапа свидетельствует о том, что в группе пациенток с БНГ все они заметно снижены, по сравнению с таковыми в группе пациенток с установленной причиной бесплодия: зрелых ооцитов меньше на 33,3%, правильно оплодотворившихся – на 45,5%, эмбрионов (бластоцист) для переноса – на 82,2%. Пациенткам с БНГ, у которых не было получено бластоцист на 5-е сутки культивирования, произведено генетическое обследование. Были обнаружены генетические варианты, которые потенциально могли сыграть роль в неудачах ЭКО. 
Заключение: Идентификация конкретной генетической детерминанты женского бесплодия позволяет поставить окончательный диагноз супружеской паре, которая затем может рассмотреть альтернативные варианты ВРТ. Это также дает возможность выявить молекулярных игроков и биологические пути, задействованные в приобретении компетентности ооцитов. 

Вклад авторов: Мартиросян Я.О., Кадаева А.И., Большакова А.С., Назаренко Т.А., Бирюкова А.М., Аскералиева А.Н. – разработка дизайна исследования, получение данных для анализа, обзор публикаций по теме статьи, анализ полученных данных, написание текста рукописи.
Конфликт интересов: Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Финансирование: Источник финансирования – НИР 121040600410-7 Назаренко Т.А. «Решение проблемы бесплодия в современных условиях путем разработки клинико-диагностической модели бесплодного брака и использования инновационных технологий в программах вспомогательной репродукции».
Одобрение Этического комитета: Исследование было одобрено локальным Этическим комитетом ФГБУ «НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Согласие пациентов на публикацию: Все пациентки подписали утвержденную на этическом комитете форму информированного согласия на участие в исследовании и публикацию своих данных. 
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Мартиросян Я.О., Кадаева А.И., Большакова А.С., Назаренко Т.А., Бирюкова А.М., Аскералиева А.Н. Клиническое использование расширенного генетического обследования 
в тактике ведения пар с бесплодием неясного генеза.
Акушерство и гинекология. 2024; 12: 50-58
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2024.274

Женское бесплодие – сложное заболевание, характеризующееся крайней гетерогенностью, которая обусловлена сложным взаимодействием многочисленных факторов. Генетические, иммунологические, эндокринные и анатомические аномалии – это те элементы, которые могут повлиять на вероятность наступления беременности у женщины. У женщин наличие бесплодия как отдельного симптома – не редкость. Однако, в отличие от мужского бесплодия, о генетической основе изолированного женского бесплодия известно очень мало. Из-за недостатка знаний о том, как генетика влияет на женскую фертильность, лишь немногие генетические исследования рутинно рекомендуются для исследования основных причин бесплодия. В результате у значительной части пар, нуждающихся в применении методов вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), диагностируется идиопатическое бесплодие, когда не удается выявить очевидную причину репродуктивных неудач. В некоторых из этих случаев использование экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и интрацитоплазматической инъекции сперматозоида (ИКСИ) позволяет выявить дефекты процессов созревания и развития ооцитов и эмбрионов, которые можно наблюдать только ex vivo, включая полную остановку созревания ооцитов, полную неспособность к оплодотворению и полную преимплантационную эмбриональную летальность [1–3].

Повторение указанных дефектов оо- и эмбриогенеза, особенно если они наблюдаются в течение нескольких циклов лечения, является свидетельством их возможной генетической причины. Применение в таких случаях расширенного обследования, в том числе и высокопроизводительного секвенирования, позволило обнаружить новые геномные варианты, которые могут серьезно повлиять на оогенез и развитие эмбриона. Идентификация конкретной генетической детерминанты женского бесплодия не только позволяет поставить окончательный диагноз супружеской паре, которая затем может рассмотреть альтернативные варианты ВРТ, но и дает возможность выявить молекулярных игроков и биологические пути, задействованные в приобретении компетентности ооцитов. Ниже мы рассмотрим примеры того, как применение данного подхода позволило выявить патологические механизмы, влияющие на компетентность ооцитов и приводящие к отдельным фенотипам бесплодия.

Цель исследования: уточнить долю бесплодия неясного генеза (БНГ) в общей структуре бесплодия, проанализировать клинические, эмбриологические и генетические особенности пациенток с БНГ.

Материалы и методы

Отбор пациентов для проведения настоящего исследования осуществлялся среди пар, обратившихся для проведения программы ЭКО/ИКСИ на базе научно-клинического отделения ВРТ им. Ф. Паулсена (заведующая отделением: д.м.н., профессор Назаренко Т.А.) с учетом критериев включения/невключения в соответствии с целью исследования и поставленными для ее достижения задачами.

Критерии включения: наличие бесплодия у пациенток; показания для проведения программы ЭКО; наличие безуспешных программ ЭКО/ИКСИ; отсутствие противопоказаний к ВРТ.

Критерии невключения: использование донорских гамет в изучаемом цикле ВРТ; острые инфекционные заболевания; со стороны супруга – абсолютная астенозооспермия, криптозооспермия (единичные сперматозоиды в эякуляте), получение сперматозоидов хирургическим путем.

Всем супружеским парам, участвующим в исследовании, проведено полное клинико-лабораторное обследование в соответствии с действующими нормативно-правовыми документами Российской Федерации. Все пациентки подписывали утвержденную на этическом комитете форму информированного согласия.

На ретроспективном этапе исследования были проанализированы клинико-анамнестические данные 1500 супружеских пар, которым было проведено 2156 стимулированных циклов в период с 2020 г. по 2022 г. в НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова. На первом этапе проводился анализ причин бесплодия у пар, включенных в исследование. Выделены 2 основные группы: 1-я группа – пациенты с установленной причиной бесплодия и 2-я группа – пациенты с БНГ.

156 супружеским парам, обратившимся для проведения программы ЭКО, был установлен диагноз БНГ – это номенклатурная форма бесплодия, по МКБ-10 кодируется как «N97.8 Другие формы женского бесплодия», так как не выделено в отдельную форму бесплодия (XXXII Ежегодная международная конференция РАРЧ «Репродуктивные технологии сегодня и завтра», 2022).

Контрольную группу составили пациентки, страдающие вторичным бесплодием, с окклюзией маточных труб, после операций по поводу гидро- и сактосальпинкса, спаечного процесса в малом тазу и т.д., имеющие/имевшие детей без генетических нарушений.

Дополнительно из группы наблюдения было выбрано 50 пациенток в возрасте до 38 лет с первичным БНГ, имеющих в анамнезе неоднократные неудачные попытки в циклах ЭКО, которые сопровождались отсутствием у этих пациенток эмбрионов, пригодных для переноса в полость матки. Данным супружеским парам было проведено расширенное генетическое обследование, которое включало на первом этапе анализ на кариотип, на втором этапе – высокопроизво...

Мартиросян Я.О., Кадаева А.И., Большакова А.С., Назаренко Т.А., Бирюкова А.М., Аскералиева А.Н.