Эпидемиология и Инфекционные болезни. Актуальные вопросы №1 / 2011
Клинико-иммунологическое обоснование применения имунофана в комплексной терапии геморрагической лихорадки с почечным синдромом
МУ Городская клиническая больница № 13, Уфа; ФГУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва; ГОУ ВПО Башкирский государственный медицинский университет Росздрава, Уфа
Изучена эффективность имунофана в комплексной терапии геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС). Препарат применяли у 60 больных со среднетяжелой и тяжелой формой ГЛПС в возрасте от 18 до 55 лет на стационарном этапе лечения. Группу сравнения составили 75 больных ГЛПС, получавших общепринятую терапию. Выявлено, что включение имунофана в комплексную терапию ГЛПС способствует статистически достоверному уменьшению уровня ФНО-α, ИЛ-4, ИЛ-10 и повышению уровней ИФН-γ и ИЛ-2, оказывает нормализующее действие на показатели клеточного иммунитета, увеличивает индекс индукции и емкость функционального резерва фагоцитов, что сопровождается положительным клиническим эффектом. Отмечена хорошая переносимость препарата имунофан.
Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) остается одной из актуальных проблем современной медицины в связи с сохраняющейся высокой заболеваемостью, нередко тяжелым течением и отсутствием эффективной этиотропной терапии. Концепция о ведущей роли иммунных реакций в патогенезе вирусных инфекций получила всеобщее признание. Особенности взаимоотношений вируса и иммунной системы определяют тяжесть течения заболевания и его исход [1]. В патогенезе ГЛПС иммунные механизмы занимают одно из ведущих мест, следовательно, лечение ГЛПС должно быть комплексным, затрагивающим все звенья патогенеза, в том числе и иммунологические. В связи с этим представляет интерес клинико-иммунологическая оценка эффективности имунофана — препарата с доказанной иммуномодулирующей активностью — в лечении тяжелых и среднетяжелых форм ГЛПС.
Отсутствие побочных эффектов и токсичности, четко продемонстрированное в экспериментальных и клинических исследованиях [2—5], указывает на возможность применения имунофана в качестве лечебного и профилактического средства при инфекционных заболеваниях как бактериального, так и вирусного генеза.
Целью настоящего исследования явилось изучение эффективности применения иммуномодулятора имунофана в комплексной терапии ГЛПС различной степени тяжести.
Материалы и методы
В исследование включили 135 больных, находившихся на стационарном лечении в МУ Городская клиническая больница № 13 Уфы с серологически подтвержденным методом непрямых флюоресцирующих антител диагнозом ГЛПС, из них 119 мужчин (82,1%) и 26 женщин (17,9%). Возраст обследованных колебался от 18 до 55 лет, средний возраст составил 37,4±2,6 года. Из исследования исключали тех лиц, у которых до заболевания ГЛПС имелись болезни почек, печени, сердечно-сосудистой системы, нервной системы, эндокринологические и онкологические заболевания. При определении степени тяжести заболевания использовали классификацию Б.З. Сиротина [6]. Среднетяжелая форма выявлена у 73 больных (50,3%), тяжелая — у 62 больных (49,7%). Контрольную группу составили 30 практически здоровых лиц, сопоставимых по полу и возрасту.
Методика определения концентрации цитокинов в сыворотке крови
Кровь для исследования брали из локтевой вены утром натощак в объеме 9 мл. Кровь центрифугировали для отделения сыворотки от клеточных элементов и сразу замораживали. Пробы хранили при -20°С до момента исследования. Для определения концентрации цитокинов (ИНФ-γ, ФНО-α, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-10) использовали наборы реагентов ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск). Уровень цитокинов определяли иммуноферментным методом в соответствии с инструкцией производителя. Метод определения основан на «сандвич-варианте» твердофазного иммуноферментного анализа с применением моно- и поликлональных антител.
Методика определения субпопуляционного состава лимфоцитов крови
Забор крови осуществлялся в мерные силиконированные пробирки с антикоагулянтом (2,6% раствор динатриевой соли ЭДТА) из локтевой вены утром натощак. Иммунофенотипирование клеток периферической крови осуществлялось методом прямой иммунофлюоресценции с помощью проточного цитофлюориметра FACS Calibur (фирма Becton Dickinson, США) c помощью реагентов
фирмы Becton Dickinson с характеристикой основных маркеров иммунокомпетентных клеток (CD3+,
CD4+, CD8+, CD16+, CD19+, CD25+, иммунорегуляторный индекс CD4/CD8).
Методика исследования хемилюминесценции цельной крови
Венозную кровь отбирали в пластиковую пробирку (в стеклянной активируется дыхательный взрыв фагоцитов), содержащую раствор гепарина. Регистрацию свечения проводили на хемилюминометре ХЛМ-003. В качестве наиболее информативных показателей хемилюминесценции были взяты светосумма спонтанная и стимулированная (S и S ) и максимальная амплитуда медленной вспышки — I.
Математическую обработку результатов исследования проводили с использованием стандартного статистического пакета программ Statistica 7.0 for Windows. Среднее значение М и ошибку среднего значения m вычисляли в Microsoft Excel.
Результаты и обсуждение
Данные первичного обследования больных ГЛПС среднетяжелой и тяжелой формы приведены в табл. 1. Обследование проводили в разгар заболевания (в олигурический период) и перед выпиской из стационара (в полиурический период). Как видно из табл. 1, изменения иммунологических параметров у больных обеих групп однотипны. В период максимально выраженных клинических проявлений (олигоанурический) наблюдали статистически значимое снижение числа общих Т-лим...
