Кардиология №12 / 2010

Количественные и качественные изменения циркулирующих в крови клеток-предшественников эндотелиоцитов у больных с гиперхолестеринемией

1 декабря 2010

Институт кардиологии, 2025 Кишинев, ул. Н. Тестемицану, 29/1, Молдавия

Целью настоящего исследования явилось изучение диагностической значимости количественных и качественных показателей циркулирующих в крови клеток-предшественников эндотелиоцитов (КПЭ), число эндотелиоцитов, находящихся в состоянии апоптоза (ЭНА), а также влияния основных факторов риска на изучаемые параметры у пациентов с коронарным атеросклерозом и гиперхолестеринемией. Обследованы 24 пациента с ишемической болезнью сердца — ИБС (14 мужчин, 10 женщин, средний возраст 58,4±2,3 года) со стенозирующими поражениями коронарных артерий >75% по данным коронарографии и гиперхолестеринемией (основная группа), а также 15 здоровых добровольцев (контрольная группа). Количество циркулирующих КПЭ оценивали в периферической крови методом цитофлуориметрии. Функциональные параметры изолированных КПЭ определяли после культивирования в фибронектине человека. Способность к адгезии определяли на культуре клеток иммуногистохимическим методом после 7 дней инкубации. Способность к пролиферации изучали по количеству КПЭ в 1 мм3 среды на 7-й день культивации. Определение и подсчет ЭНА проводили цитофлуорометрическим методом с иммуномаркацией клеток анексином V и CD-31 после предварительной обработки культуры эндотелиоцитов перекисью водорода (H2O2), сравнивая результаты с контрольной культурой эндотелиоцитов. Количество циркулирующих КПЭ у больных ИБС было на 58,7% меньше, чем у здоровых. Способность к адгезии КПЭ у пациентов с ИБС была снижена на 43%. Количество КПЭ, выживших в культуре клеток, также оказалось на 80,9% меньше, чем в контрольной группе. В то же время количество циркулирующих ЭНА у пациентов с ИБС возрастало более чем в 2,5 раза. Уменьшение количества КПЭ, способность к адгезии, а также рост числа ЭНА статистически значимо коррелировали с количеством пораженных коронарных артерий, наличием сахарного диабета и статусом курильщика. Наличие артериальной гипертензии и уровень холестерина крови не коррелировали с количественными и качественными показателями КПЭ. Таким образом, количественные и качественные показатели циркулирующих КПЭ и клеток, находящихся в состоянии апоптоза, могут рассматриваться как маркеры дисфункции эндотелия и предикторы атеросклеротического поражения сосудов у больных с гиперхолестеринемией.

Дисфункция эндотелия (ДЭ) считается независимым предиктором основных сердечно-сосудистых заболеваний [1, 2], в том числе атеросклероза [3].

ДЭ — обратимый процесс, с одной стороны, состоящий из повреждающих факторов, высвобождение (активация) которых происходит под влиянием многочисленных факторов риска (дислипидемия, артериальная гипертония (АГ), гипергликемия, курение, оксидативный стресс и т.д.). С другой
стороны, существуют механизмы естественной регенерации (реэндотелизации) сосудов, основная роль в которых принадлежит циркулирующим в периферической крови взрослого человека клеткам-предшественникам эндотелиоцитов (КПЭ), происходящим из костного мозга [4].

Согласно полученным в последние годы данным у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС) отмечается уменьшение количества циркулирующих КПЭ с возможным нарушением их функции [5—7]. Количественные и функциональные способности КПЭ также изменяются при наличии факторов риска развития ИБС [8, 9], в то время как возрастает количество эндотелиоцитов, находящихся в состоянии апоптоза.

Целью настоящего исследования явились изучение количественных и качественных показателей циркулирующих в крови клеток- предшественников эндотелиоцитов, число эндотелиоцитов, находящихся в состоянии апоптоза (ЭНА), а также оценка влияния основных факторов риска на изучаемые параметры у пациентов с ИБС и гиперхолестеринемией.

Материал и методы

Количественные и качественные показатели циркулирующих КПЭ, а также концентрацию ЭНА в крови определяли у 24 пациентов (14 мужчин, 10 женщин, средний возраст 58,4±2,3 года) с ИБС, стенозирующими поражениями коронарных артерий >75% по данным коронарографии, иперхолестеринемией (средний уровень общего холестерина — ХС 5,82±1,15 ммоль/л, уровень липопротеидов низкой плотности — ЛНП 3,77±0,79 ммоль/л), которые составили основную группу, и у 15 здоровых добровольцев (контрольная группа).

Однососудистые поражения встречались у 12 (50%) пациентов, поражения 2 сосудов — у 7 (29%) и 3 сосудов — у 5 (21%). У всех больных была сохранена сократительная способность левого желудочка, фракция выброса составляла в среднем 53,1±2,8%. У 15 (62,5%) пациентов имелась АГ, у 10 (41,6%) —
сахарный диабет (табл. 1).

Клиническая и лабораторная характеристика обследованных пациентов (n=24)

Контрольную группу составили 15 добровольцев без ИБС (9 мужчин, 6 женщин), сопоставимых по возрасту, у которых определяли количественные и функциональные показатели циркулирующих КПЭ по аналогичной методике.

Количество циркулирующих КПЭ в периферической крови определяли методом цитофлуориметрии. КПЭ были выделены из сыворотки при помощи моноклональных антител к CD34 (Becfon Dickinson) и по рецептора фактора роста сосудистого эндотелия 2-го типа (VEGF-2) (vascular endothelial growth factor) (Pharmingen...

Иванова В.М., Костин С.И., Попович И.М., Чебану Н.В., Кобец В.А., Попович М.И.
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.