Кардиология №12 / 2010
Количественные и качественные изменения циркулирующих в крови клеток-предшественников эндотелиоцитов у больных с гиперхолестеринемией
Институт кардиологии, 2025 Кишинев, ул. Н. Тестемицану, 29/1, Молдавия
Целью настоящего исследования явилось изучение диагностической значимости количественных и качественных показателей циркулирующих в крови клеток-предшественников эндотелиоцитов (КПЭ), число эндотелиоцитов, находящихся в состоянии апоптоза (ЭНА), а также влияния основных факторов риска на изучаемые параметры у пациентов с коронарным атеросклерозом и гиперхолестеринемией. Обследованы 24 пациента с ишемической болезнью сердца — ИБС (14 мужчин, 10 женщин, средний возраст 58,4±2,3 года) со стенозирующими поражениями коронарных артерий >75% по данным коронарографии и гиперхолестеринемией (основная группа), а также 15 здоровых добровольцев (контрольная группа). Количество циркулирующих КПЭ оценивали в периферической крови методом цитофлуориметрии. Функциональные параметры изолированных КПЭ определяли после культивирования в фибронектине человека. Способность к адгезии определяли на культуре клеток иммуногистохимическим методом после 7 дней инкубации. Способность к пролиферации изучали по количеству КПЭ в 1 мм3 среды на 7-й день культивации. Определение и подсчет ЭНА проводили цитофлуорометрическим методом с иммуномаркацией клеток анексином V и CD-31 после предварительной обработки культуры эндотелиоцитов перекисью водорода (H2O2), сравнивая результаты с контрольной культурой эндотелиоцитов. Количество циркулирующих КПЭ у больных ИБС было на 58,7% меньше, чем у здоровых. Способность к адгезии КПЭ у пациентов с ИБС была снижена на 43%. Количество КПЭ, выживших в культуре клеток, также оказалось на 80,9% меньше, чем в контрольной группе. В то же время количество циркулирующих ЭНА у пациентов с ИБС возрастало более чем в 2,5 раза. Уменьшение количества КПЭ, способность к адгезии, а также рост числа ЭНА статистически значимо коррелировали с количеством пораженных коронарных артерий, наличием сахарного диабета и статусом курильщика. Наличие артериальной гипертензии и уровень холестерина крови не коррелировали с количественными и качественными показателями КПЭ. Таким образом, количественные и качественные показатели циркулирующих КПЭ и клеток, находящихся в состоянии апоптоза, могут рассматриваться как маркеры дисфункции эндотелия и предикторы атеросклеротического поражения сосудов у больных с гиперхолестеринемией.
Дисфункция эндотелия (ДЭ) считается независимым предиктором основных сердечно-сосудистых заболеваний [1, 2], в том числе атеросклероза [3].
ДЭ — обратимый процесс, с одной стороны, состоящий из повреждающих факторов, высвобождение (активация) которых происходит под влиянием многочисленных факторов риска (дислипидемия, артериальная гипертония (АГ), гипергликемия, курение, оксидативный стресс и т.д.). С другой
стороны, существуют механизмы естественной регенерации (реэндотелизации) сосудов, основная роль в которых принадлежит циркулирующим в периферической крови взрослого человека клеткам-предшественникам эндотелиоцитов (КПЭ), происходящим из костного мозга [4].
Согласно полученным в последние годы данным у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС) отмечается уменьшение количества циркулирующих КПЭ с возможным нарушением их функции [5—7]. Количественные и функциональные способности КПЭ также изменяются при наличии факторов риска развития ИБС [8, 9], в то время как возрастает количество эндотелиоцитов, находящихся в состоянии апоптоза.
Целью настоящего исследования явились изучение количественных и качественных показателей циркулирующих в крови клеток- предшественников эндотелиоцитов, число эндотелиоцитов, находящихся в состоянии апоптоза (ЭНА), а также оценка влияния основных факторов риска на изучаемые параметры у пациентов с ИБС и гиперхолестеринемией.
Материал и методы
Количественные и качественные показатели циркулирующих КПЭ, а также концентрацию ЭНА в крови определяли у 24 пациентов (14 мужчин, 10 женщин, средний возраст 58,4±2,3 года) с ИБС, стенозирующими поражениями коронарных артерий >75% по данным коронарографии, иперхолестеринемией (средний уровень общего холестерина — ХС 5,82±1,15 ммоль/л, уровень липопротеидов низкой плотности — ЛНП 3,77±0,79 ммоль/л), которые составили основную группу, и у 15 здоровых добровольцев (контрольная группа).
Однососудистые поражения встречались у 12 (50%) пациентов, поражения 2 сосудов — у 7 (29%) и 3 сосудов — у 5 (21%). У всех больных была сохранена сократительная способность левого желудочка, фракция выброса составляла в среднем 53,1±2,8%. У 15 (62,5%) пациентов имелась АГ, у 10 (41,6%) —
сахарный диабет (табл. 1).
Контрольную группу составили 15 добровольцев без ИБС (9 мужчин, 6 женщин), сопоставимых по возрасту, у которых определяли количественные и функциональные показатели циркулирующих КПЭ по аналогичной методике.
Количество циркулирующих КПЭ в периферической крови определяли методом цитофлуориметрии. КПЭ были выделены из сыворотки при помощи моноклональных антител к CD34 (Becfon Dickinson) и по рецептора фактора роста сосудистого эндотелия 2-го типа (VEGF-2) (vascular endothelial growth factor) (Pharmingen...
