Липидные маркеры неопластической трансформации эпителия шейки матки при заболеваниях, ассоциированных с вирусом папилломы человека

Цель исследования. Изучение особенностей липидного состава неопластически трансформированного эпителия шейки матки при заболеваниях, ассоциированных с вирусом папилломы человека (ВПЧ).
Материал и методы. В исследование была включена 41 пациентка с неопластическими процессами эпителия шейки матки, вызванными ВПЧ, обратившаяся в поликлиническое отделение ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Всем включенным в исследование женщинам была проведена биопсия шейки матки (строго по показаниям) с последующим гистологическим исследованием биоптатов и анализом их липидного состава. Качественную и количественную оценку липидных экстрактов биоптатов проводили с помощью масс-спектрометрии с электрораспылительной ионизацией. В результате анализа были идентифицированы липиды, относящиеся к пяти классам: фосфатидилхолины, фосфатидилэтаноламины, сфингомиелины, ди- и триглицериды. Полученные экспериментальные данные были проанализированы с помощью многофакторного метода OPLS-DA.
Результаты. Выявлено статистически значимое изменение уровней липидов, относящихся к фосфатидилхолинам (PC 32:0, PC 34:1, PC 36:4, PC 34:0, PC 38:4), этаноламинам (PE O-46:0, LPE 46:0, PE O-48:0, LPE 48:0, PE O-46:1) и сфингомиелинам (SM 34:0, SM 42:2) в тканях, подвергшихся неопластической трансформации вследствие воздействия ВПЧ.
Заключение. Данное исследование выявило изменение содержания ряда глицерофосфолипидов и сфинголипидов в неопластически трансформированных тканях шейки матки по сравнению с нормальной тканью. Найденные липиды можно использовать при создании панели для прогнозирования течения цервикальных неоплазий в сторону регресса или малигнизации.

Несмотря на впечатляющие успехи молекулярной биологии, которые позволили раскрыть основные механизмы и этапы канцерогенеза, создать ряд принципиально новых по механизму действия противоопухолевых препаратов, значительно улучшить возможности инструментальной диагностики, проблема онкологических заболеваний продолжает оставаться одной из самых серьезных проблем современности. Так, в структуре онкологической заболеваемости женского населения России за 2015 г. Рак шейки матки (РШМ) занимает 6-е место, его удельный вес в структуре составил 5,2% (16 710 случаев), в то время как в возрастной группе 25–49 лет он занял 2-е место (после рака молочной железы) и составил 16,8%. За этот период времени под диспансерным наблюдением в онкологических учреждениях России находились 174 822 больных РШМ, смертность от РШМ составила 6628 случаев [1].

В 96% случаев причиной развития РШМ являются вирусы папилломы человека (ВПЧ) высокого, вероятного и возможного канцерогенного риска (IARC, 2012) [2]. По данным ВОЗ, распространенность в мире цервикальных интраэпителиальных неоплазий (CIN) составляет 40 млн случаев: CIN 1-й степени – 30 млн, CIN 2–3-й степени – 10 млн случаев. Частота прогрессии CIN 2–3 в карциному in situ варьирует от 40 до 60%. Так, в структуре патологии шейки матки у женщин репродуктивного возраста CIN составляет от 17 до 20%. Согласно данным литературы, после инфицирования ВПЧ CIN 2–3 развивается уже через 3 года у 27% женщин [3].

В настоящее время для поиска биомаркеров СIN и РШМ широко исследуют геном и транскриптом человека, то есть поиск ведется «внутри» клетки. Полученные биомаркеры связаны непосредственно с опухолевой клеткой и продуктами ее жизнедеятельности [4].

Большой интерес представляют появившиеся в последние годы исследования в области геномики, транскриптомики, протеомики [5–7] и особенно метаболомики, в частности липидомики [8, 9].

Известно, что при канцерогенезе повышается число не только молекулярно-генетических, но и метаболических повреждений эпителия шейки матки. Доказано, что злокачественная трансформация цервикального эпителия сопровождается количественными и качественными изменениями показателей уровня синтеза не только белков, но и различных низкомолекулярных соединений, включая липиды, в пораженных клетках [10, 11].

Атипические (предраковые и раковые) клетки находятся в окружении различных факторов, которые формируют их микроокружение (различные клетки, простые химические вещества и сложные макромолекулы) [12].

На сегодняшний день данные по исследованию липидного состава тканей шейки матки при ее ВПЧ-ассоциированных поражениях различной степени тяжести, включая РШМ, методом масс-спектрометрии в мировой литературе отсутствуют.

Требуется поиск потенциальных биомаркеров, которые могут обладать диагностической и прогностической значимостью в скрининговых программах или при разработке таргетной терапии.

Целью данной работы были выявление и оценка изменений липидомного состава тканей шейки матки при ВПЧ-ассоциированных поражениях различной степени тяжести у пациенток репродуктивного возраста.

Материал и методы исследования

В одномоментное проспективное исследование была включена 41 женщина в возрасте от 21 до 45 лет (средний возраст 34 года), обратившаяся в научно-поликлиническое отделение ФГБУ Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России по поводу наличия патологии шейки матки.

Критерии включения: папилломавирусная инфекция, ВПЧ-ассоциированные заболевания шейки матки, регулярный менструальный цикл, подписанное информированное согласие.

Критерии исключения: наличие хронических заболеваний в стадии обострения, беременность, период лактации, прием гормональной терапии, наличие инфекций, передающихся половым путем, нарушение функции почек, печени, легких в стадии декомпенсации.

Комплексное обследование женщин включало сбор клинико-анамнестических данных, определение гинекологического статуса, цитологическое исследование, ВПЧ-типирование, расширенную кольпоскопию, ...

Некрасова М.Е., Чаговец В.В., Стародубцева Н.Л., Кононихин А.С., Салимова Д.Ф., Токарева А.О., Лагутин В.В., Наумов В.А., Назарова Н.М., Франкевич В.Е., Сухих Г.Т.