Маркеры проницаемости и функционального состояния плацентарного барьера при беременности, осложненной хламидийной инфекцией

Цель: Оценка проницаемости плацентарного барьера и функционального состояния плаценты при беременности, осложненной хламидийной инфекцией. Материалы и методы: Исследованы околоплодные воды и сыворотка крови от 124 беременных в сроке 38–40 недель с инфекцией Chlamydia trachomatis в разных вариантах течения. 1-я группа – 83 беременных с острой инфекцией, бессимптомное течение (ПЦР+; IgМ+; IgG в титре <1:60), из них у 39 родились дети с врожденным инфекционным заболеванием (ВИЗ) и у 44 – здоровые дети. 2-я группа – 41 беременная с носительством Chlamydia trachomatis (ПЦР-, IgM-, IgG в титре >1:60), из них у 22 родились дети с ВИЗ и у 19 – здоровые дети. Контроль – 37 здоровых беременных в аналогичном сроке. В околоплодных водах определялись сывороточные белки: высокомолекулярный альфа2-макроглобулин (α2-МГ, 720 кДа) иммуноферментным методом и низкомолекулярный альбумин (68 кДа) методом количественного ракетного иммуноэлектрофореза. В сыворотке крови определялась концентрация α2-МГ методом количественного ракетного иммуноэлектрофореза, альбумина биохимическим методом и плацентарных белков: ассоциированного с беременностью протеина-А (РАРР-А), трофобластического β1-глобулина (ТБГ) иммуноферментным методом. Результаты: Уровень альбумина в околоплодных водах беременных был повышен при рождении детей с ВИЗ независимо от формы течения инфекции (5,5 (2,3–11,5) г/л против 1,8 (1,2–2,9) г/л при носительстве и 3,3 (2,3–7,4) г/л против 1,8 (1,0–2,2) г/л при острой форме). Уровень α2-МГ в околоплодных водах был повышен только при носительстве возбудителя хламидийной инфекции, наиболее высокая его концентрации была при рождении детей с ВИЗ (55,0 (25,4–111,4) мг/л против 13,8 (5,5–37,2) мг/л у женщин с носительством Chlamydia trachomatis, родивших детей без ВИЗ). В сыворотке крови женщин с острой формой хламидийной инфекции выявлено повышение содержания α2-МГ в 1-й группе с ВИЗ у новорожденных (3,3 (2,9–3,6) г/л против 2,5 (2,3–2,7) г/л у женщин, родивших детей без ВИЗ). У беременных с носительством Chlamydia trachomatis при рождении детей с ВИЗ выявлено достоверное снижение в крови уровня плацентарного белка РАРР-А по сравнению с контролем и по сравнению с женщинами, родившими детей без ВИЗ. Заключение: Определение содержания α2-МГ и альбумина в околоплодных водах беременных с носительством Chlamydia trachomatis и с острой формой хламидийной инфекции можно использовать в оценке проницаемости плацентарного барьера. Повышенный уровень α2-МГ в крови беременных с острой хламидийной инфекцией свидетельствует о ВИЗ у плода/новорожденного.

Одной из причин развития врожденных инфекционных заболеваний (ВИЗ) новорожденных является инфекция Chlamydia trachomatis матери, имеющая несколько стадий (хроническая, персистентная, латентная, острая), которые определяют различные варианты клинического течения заболевания, в том числе: носительство Chlamydia trachomatis (IgM-, IgG в титре >1:60, ПЦР-) или острое бессимптомное (ПЦР+, IgМ+ и/или IgG в титре <1:60) [1–5]. Ведущая роль в защите плода при инфицировании беременной принадлежит плацентарному барьеру, который состоит из эпителия трофобласта, синцития, покрывающего ворсинки хориона плаценты, соединительной ткани ворсинок и эндотелия их капилляров. Клетки трофобласта, составляющие ворсинки хориона плаценты, генерируют субпопуляцию инвазивных экстравиллярных клеток, отделяющих мембраной фетальную кровь от материнской. Слияние дифференцированного цитотрофобласта формирует синцитиотрофобласт, полностью обволакивающий развивающуюся плаценту, и образует эффективный барьер, селективно регулирующий газообмен, а также перенос питательных веществ и экзогенных агентов (лекарств, токсинов, вирусов и пр.). Плотный поляризованный эпителиальный монослой содержит соединения, препятствующие латеральной и парацеллюлярной диффузии субстратов для защиты развивающегося плода; однако ряд вирусов и бактерий способны преодолевать плацентарный барьер, проницаемость которого оценивается по уровням белков в составе околоплодных вод, синтезируемых печенью беременных [6–9].

Chlamydia trachomatis выявляется во всех тканевых структурах плаценты женщин с генитальным хламидиозом. Пораженные хламидиями клетки обнаруживаются в просвете капилляров ворсин хориона, что указывает на возможный гематогенный путь передачи инфекции от матери к плоду (наименее изученный путь, по сравнению с восходящим – через оболочки амниона). В плацентах женщин с генитальным хламидиозом происходит нарушение иммунного гомеостаза с образованием патогенных иммунных комплексов (ПИК), включающих IgM, IgG, IgA и фиксирующих С3-фракцию комплемента как маркер патогенности. Показано, что фиксация ПИК на мембранных структурах плаценты приводит к разрушению мембран синцития и плацентарного барьера [10]. Немаловажную роль в сохранении плотности и целостности трофобластных и эндотелиальных клеток плаценты играют адгезивные межклеточные соединения (окклюзин, VE-кадгерин и β-катенин), которые разрушаются избытком провоспалительных цитокинов – интерлейкина (IL)-1β и трансформирующего фактора роста (TGF) и способствуют развитию хориоамнионита, проникновению инфекционных патогенов к плоду [11]. Повышенная концентрация провоспалительных цитокинов в околоплодных водах является, по мнению некоторых авторов, маркером нарушения плацентарного барьера [12]. Кроме того, Chlamydia trachomatis способна манипулировать множеством процессов, чтобы обеспечить свой цикл развития, активировать сигнальные пути и способствовать высвобождению белков, повреждающих ткани, цитокинов и других биологически активных соединений, а также самостоятельно ремоделировать эпителиальные поверхности путем реорганизации межклеточных адгезий, перепрограммирования мембранного переноса и сигналов иммунного ответа [11].

Следует отметить, что не всякое поражение последа сопровождается развитием внутриутробной инфекции, ВИЗ плода и новорожденного. Большинство детей рождаются в срок, жизнеспособными и даже здоровыми. При этом более чем у 90% инфицированных детей сразу после рождения отсутствуют симптомы заболевания [13]. Поэтому весьма важным является изучение компенсаторных реакций плацентарного барьера, его защитных функций, в том числе и специфических иммунных [10]. Необходимо отметить, что данных по этому вопросу имеется недостаточно, и поэтому по-прежнему остается актуальным поиск методов оценки функционального состояния и проницаемости плаценты у инфицированных беременных еще до родов для прогноза ВИЗ плода и новорожденного, для определения тактики лечения, метода и срока родоразрешения.

По содержанию белков сывороточного происхождения различной молекулярной массы в составе околоплодных вод можно судить о степени проницаемости плацентарного барьера, а уровни синтезируемых при беременности плацентарных белков в крови свидетельствуют о ее функциональном состоянии.

Альфа2-макроглобулин (α2-МГ) и альбумин синтезируются преимущественно клетками печени. Средняя концентрация α2-МГ в крови колеблется в пределах 2–3 г/л, молекулярная масса 720 кДа; белок способен как связывать протеиназы патогенов, препятствуя их инвазии, так и связываться с токсинами патогенов, провоцируя апоптоз клеток. Комплексы α2-МГ с цитокинами оказывают иммуномодулирующее воздействие, в то время как комплексы окисленного (поврежденного) α2-МГ с частично сохранившими литическую активность протеиназами и аутоантителами могут разрушать клетки [14]. Концентрация альбумина в крови составляет 40–60 г/л, молекулярная масса 67 кДа. Через неповрежденные гемотканевые барьеры (плацентарный, спинномозговой) вышеперечисленные белки проникают в незначительных количествах или синтезируются в минимальных концентрациях (нанограммы, пикограммы). Роль синтезируемых трофобластом и плацентой белков в механизмах вынашивания плода и оценке функционального состояния плацентарного барьера активно изучается в настоящее время [15, 16]. Наиболее изучены из них трофобластический β1-глобулин (ТБГ) и ассоциированный с беременностью плацентарный протеин А (РАРР-А).

Цель работы: поиск маркеров проницаемости плацентарного барьера, а также функционального состояния плаценты при беременности, осложненной инфекцией Chlamydia trachomatis при различных вариантах ее течения и состояния новорожденного.

Материалы и методы

Исследование проводилось на базе Пери­натального центра г. Новокузнецка (2015–2020 гг.) и иммунологической лаборатории ГОУ ДПО НГИУВ – филиала РМАНПО Минздрава России. Обследовано 125 беременных, поступивших в акушерский стационар в сроке 38–40 недель, с беременностью, осложненной инфекцией Chlamydia trachomatis.

1-я основная группа – 83 беременных имели лабораторные признаки острой хламидийной инфекции (ПЦР+, IgM антитела, IgG в титре <1:60 к Chlamydia trachomatis). Беременным в данной группе антибактериальная терапия в условиях женской консультации не проводилась. Из них у 39 женщин родились дети с ВИЗ. У 44 беременных с острой инфекцией новорожденные были здоровы.

2-я группа наблюдения – 42 беременных...

1:60) [1–5].>

Ренге Л.В., Зорина В.Н., Гребнева В.С., Григорьева Е.Ю., Власенко А.Е.