Метаболизм тромбоцитов у больных ишемической болезнью сердца резистентных и чувствительных к клопидогрелу

Цель исследования. Изучить особенности уровней активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ в тромбоцитах у больных ишемической болезнью сердца (ИБС) после аортокоронарного шунтирования (АКШ) в зависимости от их чувствительности к клопидогрелу. Материал и методы. Обследовали 51 больного с хронической формой ИБС до и после АКШ и 35 здоровых мужчин (контроль). Спонтанную и индуцированную агрегацию тромбоцитов проводили на агрегометре «Биола» до АКШ (двухнедельная отмена антитромбоцитарных препаратов), после АКШ на фоне терапии 75 мг клопидогрела и через 6 мес после операции. В зависимости от подавления АДФ-зависимой агрегации тромбоцитов на 50% от исходной через 2 нед лечения клопидогрелом или отсутствия таковой все пациенты были разделены на 2 группы: чувствительные (n=41) и резистентные (n=10) к клопидогрелу. Биолюминесцентным методом определяли активность НАДФ-зависимых дегидрогеназ тромбоцитов. Результаты и заключение. Установлено, что метаболизм тромбоцитов больных ИБС независимо от чувствительности к клопидогрелу характеризуется снижением активности анаэробной энергетики, глутатионзависимой антиоксидантной системы, а также реакций, осуществляющих перенос продуктов липидного катаболизма на гликолиз и НАДФН-зависимый отток субстратов с лимонного цикла на аминокислотный обмен. Метаболическими особенностями тромбоцитов, характеризующими состояние резистентности к клопидогрелу, являются низкая активность ключевой реакции пентозофосфатного цикла, отражающей состояние пластического обмена и субстратного потока по циклу трикарбоновых кислот, определяющего интенсивность аэробной энергетики. Только у чувствительных к клопидогрелу больных ИБС в тромбоцитах повышается активность НАДФМДГ (ключевой реакции липидного анаболизма).

Успешность профилактики сосудистых осложнений во многом зависит от эффективности антитромбоцитарной терапии, в том числе у больных после коронарного шунтирования. В последние 10—15 лет появилось большое количество работ, свидетельствующих о наличии у ряда больных недостаточного ответа агрегации тромбоцитов на ацетилсалициловую кислоту [1—5]. Тиенопиридины также не всегда успешно предотвращают сердечно-сосудистые осложнения (ССО). При наличии слабо функционального аллеля CYP2C19 у пациентов с острым инфарктом миокарда, получавших клопидогрел, отмечена более высокая частота развития ССО, в 3,58 раза превышающая таковую у других пациентов. Особенно это было заметно среди пациентов, перенесших чрескожные коронарные вмешательства (ЧКВ) [6]. G. Parodi и соавт. показали, что тикагрелор и прасугрел недостаточно ингибируют агрегацию тромбоцитов у больных с острым коронарным синдромом (ОКС). Через 2 ч после ЧКВ у 44% пациентов, получивших прасугрел, и у 60%, получивших тикагрелор, отмечена высокая остаточная реактивность тромбоцитов [7]. Становится очевидным, что у некоторых больных, в силу целого ряда в основном неизвестных причин, тромбоциты недостаточно отвечают на антитромбоцитарные препараты, независимо от их механизма действия. Результаты приведенных исследований побуждают к более детальному изучению влияния метаболических изменений на рецепторную (агрегационную) активность тромбоцитов при ишемической болезни сердца (ИБС).

Тромбоцитам в системе гемостаза отводится ключевая роль. При этом функциональная активность тромбоцитов во многом определяется состоянием их метаболической системы. Именно от активности внутриклеточного метаболизма зависит синтез поверхностных рецепторов, биологически активных веществ, которые выделяются тромбоцитами, состояние мембран тромбоцитов, что напрямую определяет реактивность системы гемостаза в целом, в том числе патофизиологических процессов [8—11]. Известно, что у больных стабильной стенокардией отмечаются значительные изменения метаболического статуса тромбоцитов [12].

Цель: изучить особенности уровней активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ в тромбоцитах у больных ИБС после аортокоронарного шунтирования (АКШ) в зависимости от их чувствительности к клопидогрелу.

Материал и методы

Под нашим наблюдением находился 51 больной мужского пола в возрасте от 45 до 72 лет с хронической формой ИБС. В качестве контроля обследованы 35 здоровых мужчин сопоставимого возраста. У всех больных было выполнено АКШ. Изучение спонтанной и индуцированной агрегации тромбоцитов под действием 5 мкМ АДФ проводили на агрегометре «Биола» до операции (двухнедельная отмена антитромбоцитарных препаратов), после АКШ на фоне терапии 75 мг клопидогрела и через 6 мес после операции. В зависимости от подавления зависимой от АДФ агрегации тромбоцитов на 50% от исходной или отсутствия таковой все пациенты были разделены на 2 группы: чувствительные (n=41) и резистентные (n=10) к клопидогрелу.

Уровни активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в тромбоцитах крови определяли с помощью биолюминесцентного метода [13]. Биолюминесцентный анализ проводили с использованием биферментного препарата, выделенного из Photobacterium leognathi (получен в Институте биофизики СО РАН, Красноярск), и биохемилюминесцентного анализатора БХЛ-3606М (специальное конструкторско-технологическое бюро «Наука», Красноярск). Данным методом определяли активность следующих ферментов: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), глицерол-3-фосфатдегидрогеназы (Г3ФДГ), малик-фермента (НАДФ-МДГ), НАД- и НАДН-зависимой реакции лактатдегидрогеназы (ЛДГ и НАДН-ЛДГ), НАД- и НАДН-зависимой реакции малатдегидрогеназы (МДГ и НАДН-МДГ), НАД- и НАДФ-зависимой глутам...

Гринштейн И.Ю., Савченко А.А., Гринштейн Ю.И., Филоненко И.В., Косинова А.А.