Микробиом эндометрия при многократных неудачах вспомогательных репродуктивных технологий и у здоровых женщин: где норма и где патология?

Цель. Изучить особенности микробиома эндометрия у здоровых фертильных пациенток и у пациенток с многократными неудачами вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ).
Материалы и методы. С целью оценки различий микробиома эндометрия у 20 женщин с бесплодием и многократными неудачными попытками ВРТ (1-я группа) и у 15 фертильных здоровых женщин, имевших хотя бы одни роды в доношенном сроке в анамнезе (2-я группа), был изучен микробиом эндометрия путем секвенирования нового поколения гена 16S рРНК.
Результаты. Самыми представленными в группе здоровых фертильных пациенток были роды Lactobacillus – 29,4%, Comamonas – 16,8% и Mesorhizobium – 6,0%, а в группе бесплодных пациенток с многократными неудачами ЭКО – Lactobacillus – 33,3%, Ralstonia – 7,9% и Pediococcus – 4,8%. При этом доля лактобактерий у пациенток 1-й группы значимо не отличалась от пациенток 2-й группы (33,3% и 29,4% соответственно). В группе женщин с бесплодием и многократными неудачными попытками ЭКО регистрировалась значимо более высокая относительная представленность бактерий родов Brevundimonas и Ralstonia. При этом у фертильных женщин 2-й группы регистрировалась статистически значимо более высокая представленность Acidovorax, Brevibacillus, Caulobacter, Comamonas, Delftia, Distigma, Pseudomonas, Schlegelella, Thermus.
Заключение. Представленные данные подтверждают концепцию нестерильности эндометрия и существования маточного микробиома в целом. Лактобактерии являются доминирующим родом в составе маточного микробиома, однако нельзя утверждать, что это абсолютно доминирующий род, т.е. более 90%. При этом доли лактобактерий у фертильных пациенток и у пациенток с многократными неудачами ВРТ значимо не отличались.

Эндометрий всегда было принято считать стерильным у небеременных, беременных женщин и в послеродовом периоде, что доказывалось культуральными методами диагностики [1, 2]. И действительно, инфекционный процесс в эндометрии или присутствие высоких концентраций микробных продуктов – эндотоксинов – привычно ассоциировалось с неудачами имплантации, спонтанными самопроизвольными выкидышами, привычным невынашиванием беременности или спонтанными преждевременными родами [3–8].

При этом сложно представить, что слизистая оболочка матки, находясь в непосредственной анатомической близости к различным микроорганизмам нижних отделов репродуктивной системы, как и постоянно взаимодействуя со сперматозоидами, которые потенциально способны переносить на себе бактерии, при этом продолжает оставаться зоной, свободной от бактериальной колонизации.

Восходящий путь попадания бактерий через шейку матки считается самым вероятным источником существования бактерий в эндометрии [9]. Например, в экспериментальных моделях было показано, что меченые частицы, по размерам идентичные сперматозоидам (микроагрегаты человеческого белка альбумина) могут попадать из влагалища в матку через цервикальный канал в течение нескольких минут у небеременных женщин [10]. Таким образом, маточные перистальтические контракции, способствующие попаданию сперматозоидов в полость матки из влагалища, могут также осуществлять механизм обсеменения эндометрия бактериями. С другой стороны, особое строение шейки матки и цервикальная слизь защищают матку от попадания микроорганизмов из влагалища. Возможно, поэтому имеются данные о быстро снижающейся относительной и абсолютной представленности лактобактерий в нижней, средней и верхней трети эндометрия соответственно; то есть чем выше мы «движемся» по репродуктивному тракту в сторону дна матки и маточных труб, тем меньше представленность лактобактерий [9]. Таким образом, представления об эндометрии как о стерильной ткани на сегодняшний день подвергаются существенным сомнениям.

Недавние исследования в этой области с использованием молекулярных технологий доказывают наличие резидентной микрофлоры в эндометрии человека и ее потенциальное влияние на репродуктивное здоровье женщин, особенно на процессы имплантации оплодотворенной яйцеклетки и исходы беременности [11–25].

Наиболее распространенной и обсуждаемой на сегодняшний день гипотезой является гипотеза о «лактобациллярном» и «не-лактобациллярном» микробиоме эндометрия. Так, показано, что доминирование лактобактерий (относительная доля более 90%) в составе микробиоты эндометрия ассоциировалось с успешной имплантацией и высокой частотой живорождений у пациенток, прошедших процедуру ЭКО [15, 21]. В связи с этим появилось логичное утверждение, что увеличение относительной доли лактобактерий до 90% и более у женщин с не-лактобациллярной микрофлорой эндометрия может способствовать увеличению частоты имплантации у бесплодных женщин и ассоциировано с понятием «здорового» маточного микробиома.

К сожалению, на сегодняшний день количество научных публикаций и накопленный научный материал не позволяют в полной мере формировать понятие о нормальном и дисбиотическом маточном микробиоме, тем более о способах его коррекции.

Целью настоящего исследования явилась оценка маточного микробиома у женщин с бесплодием и многократными неудачными попытками вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) и у здоровых фертильных женщин без осложненного акушерско-гинекологического анамнеза, имевших хотя бы одни успешные вагинальные роды в анамнезе.

Материалы и методы

В исследование были включены 35 женщин, разделенных на 2 группы. Все пациентки были обследованы на базе кафедры акушерства и гинекологии №1 ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России (Ростов-на-Дону, Россия). В 1-ю группу вошли 20 женщин с бесплодием различного генеза и многократными неудачными попытками ЭКО (2 и более попытки) в возрасте от 20 до 42 лет. Критериями исключения были любая патология матки, в том числе врожденные аномалии развития, миомы, полипы, внутриматочные синехии, внутриматочные манипуляции в течение последних 6 месяцев, присутствие внутриматочной спирали в течение последних 6 месяцев, любое системное воспалительное заболевание или тяжелая экстрагенитальная патология, применение системной антибактериальной терапии в последние 3 месяца.

Во 2-ю группу вошли 15 здоровых женщин от 20 до 42 лет без каких-либо жалоб, без отягощенного акушерско-гинекологического анамнеза, имевших хотя бы одни роды через естественные родовые пути в анамнезе. Критерии исключения, помимо критериев для 1-й группы, включали в себя также хирургические аборты, самоаборты, неразвивающиеся беременности, выскабливания стенок полости матки в послеродовом периоде, кесарево сечение в анамнезе.

Каждая участница исследования заполнила информированное добровольное согласие на исследование. Локальный этический комитет ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России одобрил проведение настоящего исследования.

Забор обр...

Баринова В.В., Кузнецова Н.Б., Буштырева И.О., Оксенюк О.С., Дудурич В.В., Шаталов А.Е.