Микробиота полости матки и ее влияние на репродуктивные исходы

Одной из причин неэффективности программ экстракорпорального оплодотворения являются неудачи имплантации. Изучение микробиоты матки и ее влияния на успешность имплантации является предметом исследований последних лет. Описаны возможности культурального и молекулярно-генетического методов диагностики, в частности секвенирования 16S рРНК, метагеномного секвенирования в изучении состояния микробиоты полости матки и ее влияния на частоту имплантации, наступления и исходов беременности. Анализ имеющихся литературных данных и результаты проводимых ранее исследований подтверждают актуальность изучения микробиоты полости матки с целью разработки алгоритма ведения пациенток с повторными неудачами имплантации в зависимости от микробной обсемененности.

В настоящее время проблема бесплодия является одной из самых актуальных и приоритетных в медицине развитых стран, учитывая неблагоприятные демографические показатели народонаселения. По статистике Всемирной Организации Здравоохранения с проблемой зачатия сталкиваются не менее 15% супружеских пар репродуктивного возраста [1].

По данным отчета Российской ассоциации репродукции человека за 2016 год в программах экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) частота наступления беременности из расчета на перенос эмбриона в полость матки составила 38,7% и не имеет выраженной тенденции к росту [2].

Одной из причин неэффективности программ ЭКО являются неудачи имплантации, которые могут произойти при:

• нарушении рецептивности эндометрия, которое в ряде случаев обусловлено различными гинекологическими заболеваниями (эндометриоз, наличие полипов эндометрия, последствия перенесенных воспалительных заболеваний, нарушение гормональной регуляции) [3–5];
• наличии хромосомных аномалий у эмбриона [6, 7];
• утолщении zona pellucida, затрудняющем высвобождение эмбриона и его прикрепление к эндометрию, что чаще встречается у женщин старшего репродуктивного возраста [8, 9].

Изучение микробиоты матки и ее влияния на успешность имплантации является предметом исследований последних лет.

Микробиота – это совокупность микроорганизмов, представленных в отдельном биотопе человека, находящихся в симбиозе с организмом хозяина. Несмотря на то, что эти симбиотические отношения сложились эволюционно, наше понимание физиологической и патофизиологической роли микробиоты в большей степени остается недостаточным [10, 11].

Важность физиологической роли микробиоты различных биотопов продемонстрирована на здоровых волонтерах в исследовании «Human Microbiome Project» (HMP), проведенном сотрудниками Национального Института Здоровья США в 2007 году с использованием высокочувствительных молекулярно-генетических методов.

Изучены образцы биоматериала, полученные из полости рта, носа, с поверхности кожи, фекальные пробы. У женщин исследовали отделяемое влагалища и аспират из полости матки. Для определения видового состава микробиоты использовали метод секвенирования субъединицы 16S рибосомальной РНК (рРНК), уникальной для каждой бактерии и содержащей определенное число гипервариабельных участков, служащих идентификаторами генов. Данные HMP и других исследований показали, что в организме человека такие биотопы, как полость матки и плацента, ранее считавшиеся стерильными, колонизированы своей уникальной микрофлорой [10–13].

Следует отметить, что большая часть исследований микробиоты репродуктивного тракта основана на изучении образцов, полученных из влагалища. В норме в вагинальной микробиоте здоровой женщины доминируют лактобациллы, хотя данный показатель характеризуется значительной вариабельностью и зависит от многих факторов, таких как возраст, показатели гормонального статуса и др. Например, вагинальная микрофлора в детстве представлена ассоциациями факультативно и облигатно-анаэробных бактериальных популяций, которые включают роды Prevotella, Streptococcus, Staphylococcus и представителей семейства Enterobacteriaceae. Под влиянием эстрогенов в период полового созревания происходит нарастание уровня гликогена и снижение pH вагинальной среды, что обуславливает в дальнейшем доминирование лактобацилл [14–17].

Методы исследования микробиоты

Микробиота репродуктивного тракта преимущественно исследуется двумя методами: культуральным и молекулярно-генетическим.

Культуральный метод

Культуральные методы, несмотря на стремительное развитие микробиологии и появление новых способов идентификации бактерий, таких как времяпролетная масс-спектрометрия – MALDI-TOF-MS, имеют ограничения. К ним можно отнести длительность и трудоемкость исследования при выявлении полимикробных ассоциаций условно-патогенных микроорганизмов (особенно строгих анаэробов), требующих получения чистых культур для видовой идентификации, и оснащение микробиологических лабораторий специальным оборудованием [14]. Кроме того, при культуральном исследовании не представляется возможным выявлять труднокультивируемые формы, затруднена идентификация микроорганизмов, требующих длительной инкубации (Megasphaera spp., Mobiluncus spp., и др.). Cущественным ограничением культурального метода является необходимость обеспечения жизнеспособности микроорганизмов, что накладывает жесткие требования к хранению и транспортировке биоматериала [18, 19]. В последние годы накоплены данные, свидетельствующие о способности микроорганизмов к образованию биопленок, что значительно затрудняет их выявление, и соответственно, делает невозможным дальнейшее эффективное лечение нарушений микробио...

Кебурия Л.К., Смольникова В.Ю., Припутневич Т.В., Муравьева В.В.