Митохондриальная дисфункция и качество эмбрионов: перспективы антиоксидантной коррекции миоинозитолом и D-хироинозитолом в соотношении 5:1, марганцем и фолиевой кислотой

Цель: Оценить функциональную активность митохондрий клеток кумулюса и качества эмбрионов в протоколах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) у пациенток репродуктивного возраста с ановуляторным бесплодием и ожирением на фоне приема комплекса миоинозитола (МИ) и D-хироинозитола (ДХИ) в соотношении 5:1 в комбинации с марганцем и фолиевой кислотой.
Материалы и методы: В исследование включены 22 пациентки с ожирением и ановуляторным бесплодием. Пациентки основной группы (n=11) получали по 1 саше комплекса «Дикироген» 2 р/день в течение 6 месяцев перед проведением протокола ВРТ, группа сравнения (n=11) Дикироген не получала. Культивирование полученных эмбрионов проводили в инкубаторе «ЭмбриоВизор» с функцией time-lapse. Митохондриальную активность клеток кумулюса изучали с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии.
Результаты: При сравнении морфокинетических параметров эмбрионов статистически значимых различий не выявлено, однако частота бластуляции в основной группе была значимо выше, чем в группе сравнения (57,01±1,99 vs 48,19±3,13; p=0,04). При оценке митохондриальных сетей в клетках кумулюса интенсивность эмиссии в основной группе была значимо выше, чем в группе сравнения (48,28±1,14 и 42,03±1,24; p=0,002)
Заключение: Комбинированная терапия антиоксидантами, витаминами и микроэлементами 
(2000 мг МИ, 400 мг ДХИ, 400 мкг фолиевой кислоты, 10 мг марганца) в течение 6 месяцев перед 
проведением протокола ВРТ снижает митохондриальную дисфункцию клеток кумулюса, что приводит к ослаблению окислительного стресса и реализуется в повышении качества ооцитов.

Вклад авторов: Объедкова К.В. – подготовка публикации, анализ полученных данных; Рыжов Ю.Р. – подготовка публикации; Халенко В.В. –статистическая обработка данных, проведение конфокальной микроскопии; Ищук М.А., Сагурова Я.М., Лесик Е.А. – проведение эмбриологического этапа протоколов ВРТ; Комарова Е.М. – проведение эмбриологического этапа протоколов ВРТ, разработка дизайна исследования, подготовка публикации; 
Гзгзян А.М., Беспалова О.Н., Коган И.Ю. – разработка дизайна исследования; Тапильская Н.И. – разработка дизайна исследования, подготовка публикации, анализ полученных данных.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование: Исследование выполнено в рамках ПНИ №1024062500021-3-3.2.2 (FGWN-2024-0020) «Создание инновационных подходов в области вспомогательных репродуктивных технологий человека с применением биобанкирования и импортозамещающих генетических, регенеративных и эмбриологических платформ».
Одобрение Этического комитета: Исследование одобрено локальным этическим комитетом ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта» 12.05.2023 и выполнено в соответствии с принципами Хельсинкской декларации (1964 г.).
Согласие пациентов на публикацию: Пациентки подписали информированное согласие на публикацию своих данных.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Объедкова К.В., Рыжов Ю.Р., Халенко В.В., Ищук М.А., Сагурова Я.М., Лесик Е.А., Комарова Е.М., Гзгзян А.М., Беспалова О.Н., Коган И.Ю., Тапильская Н.И. Митохондриальная дисфункция и качество эмбрионов: перспективы антиоксидантной коррекции миоинозитолом и D-хироинозитолом в соотношении 5:1, марганцем и фолиевой кислотой.
Акушерство и гинекология. 2024; 12: 148-156
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2024.299

Интрафолликулярная среда, интегрирующая фолликулярную жидкость и клетки кумулюса, формирует микроокружение ооцита, при этом представления о функциональной роли данной ниши постоянно дополняются новыми данными, включающими особенности пластического и энергетического обмена, а также многообразие факторов, прямо влияющих на созревание ооцита. Функциональные нарушения клеток кумулюса могут, с одной стороны, выступать в качестве одной из причин суб­оптимального ответа яичников на стимуляцию в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), а с другой – служить маркерами качества ооцитов [1, 2].

Наряду с изучением метаболома и профиля экспрессии генов клеток кумулюса одним из перспективных направлений исследований является изучение митохондриальной дисфункции, определяющей как вариабельность биологического старения организма, так и угасание репродуктивной функции у женщин. При этом продемонстрирована высокая корреляция между имеющимися соматическими заболеваниями и нарушением функционирования митохондрий кумулюсных клеток [3–5].

Имеющиеся научные данные вызывают определенный оптимизм в связи с возможностью потенциальной коррекции митохондриальной дисфункции как при лечении соматических заболеваний и модификации образа жизни, так и при лекарственной терапии. Например, одни и те же методы лечения и профилактики имеют не только клинический эффект в отношении восстановления репродуктивной функции, но и при более глубоком изучении – определенные метаболические эффекты, в том числе касающиеся коррекции митохондриальной дисфункции. Так, предыдущие исследования продемонстрировали, что пероральный прием D-хироинозитола (ДХИ) у женщин с ановуляторным бесплодием и/или ожирением коррелировал с восстановлением овуляторной функции и нормализацией метаболических маркеров [6–10].

Целью нашего исследования явилась оценка функциональной активности митохондрий клеток кумулюса и качества эмбрионов в протоколах ВРТ у пациенток репродуктивного возраста с ановуляторным бесплодием и ожирением на фоне приема комплекса миоинозитола (МИ) и ДХИ в соотношении 5:1 в комбинации с марганцем и фолиевой кислотой.

Материалы и методы

Общий дизайн исследования

С мая 2023 г. по сентябрь 2024 г. включительно проведено одноцентровое открытое проспективное сравнительное рандомизированное исследование по влиянию биологически активной добавки к пище «Дикироген» (Pizeta Pharma S.p.A., Италия), содержащей комбинацию 1000 мг МИ и 200 мг ДХИ, а также 200 мкг фолиевой кислоты и 5 мг марганца в форме органической соли – марганца пидолата, являющихся синергистами инозитолов, на функциональную активность клеток кумулюса и качество эмбрионов у пациенток с диагнозом ановуляторного бесплодия и ожирением в программах ВРТ. Все пациентки, включенные в исследование, соответствовали критериям включения и не имели критериев невключения. Контрольная группа по качеству эмбрионов и функциональной активности клеток кумулюса состояла из доноров ооцитов.

Критерии включения: возраст от 24 до 36 лет, первичное ановуляторное бесплодие, индекс массы тела (ИМТ) 30–32 кг/м2.

Критерии невключения: общие противопоказания к использованию ВРТ, сахарный диабет, прием препаратов, влияющих на функцию CYP3A4.

Прием комплекса «Дикироген»

Пациентки основной группы (n=11) перед вступлением в протокол ВРТ принимали Дикироген по следующей схеме – по 1 саше 2 раза в день после еды в течение 180±7 дней.

Селекция и рандомизация пациенток

Селекция большей части пациенток проводилась из нашей базы данных ранее выполненного исследования по оценке эффективности комплекса МИ и ДХИ в соотношении 5:1 в комбинации с марганцем и фолиевой кислотой у пациенток репродуктивного возраста с нерегулярным менструальным циклом, при этом выборка была расширена за счет включения 6 первичных пациенток [11]. Рандомизация проводилась после подписания информированного согласия методом закрытых конвертов с учетом критериев включения и исключения (рис. 1).

Проведение протокола ВРТ

Стимуляцию суперовуляции начинали на 2–3-й день менструального цикла с использованием рекомбинантного фоллитропина альфа («Гонал-Ф», Merck Serono S.p.A., Италия). Во время овариальной стимуляции выполняли ультразвуковой мониторинг фолликулогенеза и роста эндометрия. При достижении лидирующим фолликулом диаметра 14 мм назначали антагонисты гонадолиберина («Цетротид», Merck Serono S.p.A., Италия). В качестве триггера финального созревания ооцитов использовали рекомбинантный

Объедкова К.В., Рыжов Ю.Р., Халенко В.В., Ищук М.А., Сагурова Я.М., Лесик Е.А., Комарова Е.М., Гзгзян А.М., Беспалова О.Н., Коган И.Ю., Тапильская Н.И.