Акушерство и Гинекология №4 / 2018
Митохондриальные белки микровезикул плазмы периферической крови как триггеры асептических воспалительных реакций у женщин с угрожающим и привычным выкидышем и физиологическим течением беременности
ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва
Цель исследования. Определение уровней провоспалительных факторов митохондриального происхождения (миМАСП) в периферической крови пациенток с угрожающим и привычным выкидышем, беременность которых была пролонгирована при помощи лекарственной терапии в сравнении с аналогичными показателями женщин с физиологическим течением беременности и неразвивающейся беременностью в сроках 6–12 недель.
Материал и методы. В исследование были включены 37 беременных женщин, из них 15 – с привычным выкидышем, 10 – с угрожающим выкидышем и 12 – с физиологическим течением беременности. Для определения уровней миМАСП у пациенток исследуемых групп проводили фракционирование венозной крови, выделение микровезикул из полученной плазмы и методом Вестерн-блот анализировали содержание митохондриальных белков. Статистическую обработку полученных данных проводили при помощи программы SPSS по методу ANOVA.
Результаты исследования. Сравнительный анализ показал, что у женщин с угрожающим и привычным выкидышем, чья беременность была успешно пролонгирована под действием терапии, наблюдается синхронное падение уровня белка внешней мембраны митохондрий VDAC1, присутствующего в периферической крови в составе микровезикул при увеличении срока гестации. В случаях неразвивающейся беременности, наблюдалось резкое нарастание содержания белка VDAC1 к сроку гестации 9–12 недель, достоверно отличающееся от случаев выношенной беременности. В группе угрожающего выкидыша наблюдалось аномально высокое значение содержания этого белка в первые 6 недель и нормализация его содержания к 9–12 неделям на фоне проводимой терапии до низких значений, свойственных физиологической беременности. Анализ распределения содержания белка TFAM показал, что между группами пациенток с выношенной беременностью нет достоверных различий для одинаковых сроков гестации, тогда как в случае неразвивающейся беременности происходит достоверное падение содержание TFAM, примерно в 2 раза, несмотря на проводимую терапию.
Заключение. Определение содержания миМАСП позволит на ранних сроках прогнозировать неблагоприятный исход беременности у женщин с привычным выкидышем и проводить оценку эффективности терапевтического воздействия при лечении данной патологии.
Воспалительные реакции являются ключевым звеном в реализации успешной репродуктивной функции, начиная с регуляции менструального цикла, овуляции, ранних этапов беременности (имплантации, плацентации) и до родового процесса при своевременных родах [1–7].
Описана роль избыточного воспаления при таких нарушениях репродуктивной функции, как бесплодие, обусловленное эндометриозом, привычный выкидыш, задержка роста плода, преэклампсия, преждевременные роды [8, 9]. По-видимому, это обусловлено тем, что одной из значимых причин нарушения инвазии трофобласта и ограниченной децидуализации является воспаление, как инфекционного, так и асептического характера [10]. Однако если воспаление инфекционного генеза и его последствия достаточно хорошо изучены, патогенез асептического воспаления остается неясным и представляет собой нерешенную проблему [11]. В качестве индукторов асептических воспалительных реакций исследователи описывают: внеклеточную фетальную ДНК, нуклеосомы, пурины, белки теплового шока, протеин S100, насыщенные жирные кислоты, антимикробные пептиды и другие факторы [1, 12–17].
Роль макромолекул, попадающих в периферический кровоток при повреждении клеток и тканей в генезе патологий, ассоциированных с окислительным стрессом, все чаще обсуждается в зарубежной литературе [18–20]. Особое внимание в последнее время уделяется так называемым МАСП (молекулам, ассоциированным с повреждением), называемым в иностранных источниках DAMP (Damage Associated Molecular Patterns) [21–23]. Среди последних, как наиболее активных в плане индукции воспаления, выделяют МАСП митохондриального происхождения, такие как митохондриальная ДНК (мтДНК), фактор инициации трансляции мтДНК белок TFAM, аденозинтрифосфат (АТФ), кислые липиды митохондриальных мембран и др. [24, 25]. Особую роль в каскаде реакций, приводящих к развитию воспаления неинфекционного генеза, играют протеолипиды и пептидные фрагменты митохондриальных мембранных белков, содержащие на N-конце остаток формилметионина, сходные по своей иммуностимулирующей активности с бактериальными белками [26, 27].
При этом прогностическая ценность определения митохондриальных МАСП (миМАСП) при беременности, осложненной на ранних сроках кровотечением, остается не исследованной [28]. В предыдущей публикации нами были изложены результаты изучения распределения одного из известных миМАСП (белка TFAM) и перспективного кандидата на эту роль – белка внешней мембраны митохондрий VDAC1 в плазме женщин в сроке 6 недель, беременность которых завершилась выкидышами (группа с привычным выкидышем) и своевременными родами (контрольная группа). Оказалось, что воспалительный ответ, вызываемый при участии этих белков, необходим для успешного пролонгирования беременности на ранних сроках [29]. Вероятно, жизнеспособное плодное яйцо способно индуцировать в эндометрии сбалансированный провоспалительный ответ, тогда как при угрожающем и привычном выкидыше имеет место нарушение данного взаимодействия, заканчивающееся гибелью плодного яйца. В то же время при пролонгировании беременности, осложненной кровотечением на ранних сроках, воспалительные реакции у данной группы женщин, возможно, отличаются от физиологических, что создает условия для развития поздних гестационных осложнений. Известно, что пациентки с угрожающим и привычным выкидышем являются группой риска по реализации плацентарной недостаточности, задержки роста плода, отслойкам плаценты и преждевременным родам.
Учитывая полученные ранее результаты, целью данного исследования стало определение уровней провоспалительных факторов митохондриального происхождения (миМАСП) в периферической крови пациенток с угрожающим и привычным выкидышем, беременность которых была пролонгирована при помощи лекарственной терапии...
