Модель прогнозирования качества эмбрионов в программе экстракорпорального оплодотворения с учетом генотипа пациенток

Цель исследования. Создание персонализированной мультигенной модели прогнозирования качества получаемых эмбрионов в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) при предварительном генотипировании пациенток.
Материал и методы. Проведено проспективное исследование, включившее 160 пациенток репродуктивного возраста, обратившихся для лечения бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Предикторами качества эмбрионов стали следующие полиморфные локусы: AMH 146 G>T (Ile49Ser) [rs10407022]; FSHR 2039 G>A (Ser680Asn) [rs6166]; LHCGR 935 A>G (Asn312Ser) [rs2293275]; LHCGR 872 A>G (Asn291Ser) [rs12470652]
Результаты. Точность прогнозирования качества эмбрионов с использованием полиморфизма генов AMH 146 G>T (Ile49Ser), FSHR 2039 G>A (Ser680Asn), LHCGR 935 A>G (Asn312Ser) и LHCGR 872 A>G (Asn291Ser) составляет 82,9%.
Заключение. Применение математического моделирования в повседневной клинической практике может служить дополнительным маркером при выборе персонализированной схемы стимуляции суперовуляции, разработке индивидуальной тактики эмбриологического этапа в ходе лечения пациентки методом ЭКО.

Как известно, необходимость во вспомогательных репродуктивных технологиях (ВРТ) непрерывно возрастает. Однако, несмотря на постоянные усилия, направленные на повышение вероятности наступления беременности, эффективность программы ЭКО не превышает 40% [1]. В свою очередь благоприятный исход программы ВРТ, рождение здорового ребенка зависит от множества факторов, одним из наиболее значимых является качество полученных эмбрионов. Способность прогнозировать качество эмбрионов позволит изначально выбрать правильный подход к ведению пациенток, а также персонифицированную тактику эмбриологического этапа. В связи с этим требуются все новые технологии, позволяющие повысить эффективность проводимого лечения, так как прогнозирование качества получаемых ооцитов и эмбрионов представляет собой одну из наиболее важных проблем в современной репродуктологии. Использующиеся на сегодняшний день маркеры результативности программ ВРТ не являются универсальными и зависят от множества сопутствующих факторов, в том числе и экзогенных. С этой точки зрения изучение генетической предрасположенности представляется важным биологическим фактором, предопределяющим многие процессы репродуктивной функции.

Исследование генотипа, в отличие от многих других маркеров, может проводиться однократно, так как данные, полученные в результате генотипирования пациентки, не меняются в течение жизни, не зависят от веса, от дня менструального цикла и так далее. Изучение ассоциации генетических маркеров со многими биологическими процессами представляется крайне актуальным как с научной, так и с практической точки зрения [2, 3].

В литературе описаны исследования, согласно которым четко прослеживается ассоциация генотипа пациенток с качеством получаемых эмбрионов. Так, например, показана связь полиморфизма гена ESR1 –351A>G[XBaI] с качеством эмбрионов. Однако в большинстве из них выводы основаны на проведенном однофакторном анализе, не позволяющем оценить значение сочетания генотипов полиморфизма генов. Также недостатками однофакторных моделей являются низкая прогностическая значимость и противоречивость данных [4–6].

Таким образом, целью исследования стало создание многофакторной молекулярно-генетической модели для предикции качества получаемых эмбрионов, оптимизации проводимого лечения бесплодия методом ВРТ.

Материал и методы исследования

Проведено проспективное исследование на базе отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия и лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, включавшее 160 женщин. Все пациентки соответствовали критериям включения (возраст 18–36 лет, трубно-перитонеальный и/или мужской фактор бесплодия при отсутствии выраженной патозооспермии, регулярный менструальный цикл) и исключения (эндокринный фактор бесплодия, перенесенные оперативные вмешательства на яичниках, эндометриоз, миома матки, генетические аномалии, пороки развития половых органов).

Стимуляция функции яичников проводилась по стандартному протоколу с антагонистами гонадотропин-рилизинг гормона со 2–3-го дня менструального цикла препаратами рекомбинантного фолликулостиму-лирующего гормона в течение 9,8±0,9 дня. Ультразвуковой контроль динамики фолликулогенеза осуществлялся трансвагинально 4–5-кратно в течение стимуляции суперовуляции. При достижении диаметра максимального фолликула более 1,4–1,5 см ежедневно вводился препарат антагониста гонадотропин-рилизинг гормона в дозе 0,25 мг. Финальное дозревание ооцитов достигалось путем введения хорионического гонадотропина (8000–10 000 МЕ).

Трансвагинальная пункция яичников производилась спустя 36 часов после введения хорионического гонадотропина. Оплодотворение аспирированных ооцитов проводилось как методом ЭКО (73/160, 45,6%), так и ИКСИ (87/160, 54,4%).

Для проведения генетического исследования производился забор периферической венозной крови по стандартной методике. В качестве потенциальных молекулярно-генетических маркеров качества бластоцист исследовались 10 полиморфных локусов генов: AMH 146 G>T (Ile49Ser) ...

Владимирова И.В., Калинина Е.А., Донников А.Е.