Акушерство и Гинекология №1 / 2016
Модель прогнозирования получения незрелых ооцитов в программах вспомогательных репродуктивных технологий с учетом генотипа пациенток
ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва
Цель исследования. Создание мультигенной модели прогнозирования получения незрелых ооцитов в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) путем предварительного генотипирования пациенток.
Материал и методы. В ходе проспективного исследования обследованы 160 пациенток в возрасте от 18 до 36 лет, обратившихся для лечения бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). В качестве потенциальных молекулярно-генетических предикторов получения незрелых ооцитов были выбраны однонуклеотидные генные полиморфизмы (SNP), ассоциированные с процессами фолликуло- и оогенеза.
Результаты. Построена математическая модель, позволяющая прогнозировать получение незрелых ооцитов в программах ЭКО на основании генотипа пациенток. Точность прогнозирования получения незрелых ооцитов с использованием полиморфизма генов AMHR2 (-482 A>G), ESR2 G>A [RsaI], LHCGR 935 A>G (Asn312Ser), LHCGR 872 A>G (Asn291Ser) составляет 68,6%. Чувствительность составила 73,6%, специфичность – 62,5%.
Заключение. Использование генетических исследований позволяет повысить точность прогнозирования исходов стимуляции суперовуляции и оптимизировать проведение программы ЭКО.
В связи с интенсивным развитием вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) возросла необходимость в индивидуализации протоколов стимуляции суперовуляции с использованием клинических, гормональных, генетических и функциональных маркеров овариального ответа [1–3]. При этом прогноз качества получаемых гамет и эмбрионов представляет собой одну из наиболее трудноразрешимых проблем при лечении пациенток методом экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Предложены различные маркеры исходов программ ВРТ (возраст, овариальный резерв, гормональный статус и другие) [2, 4, 5]. Генетическая предрасположенность представляется важным фактором, детерминирующим процессы фолликуло-, оо- и эмбриогенеза в программе ЭКО [6, 7].
Данные, полученные при исследовании генома, не меняются с возрастом, не зависят от веса, от дня менструального цикла и так далее, и могут определяться однократно, в отличие от гормональных маркеров. Исследование влияния генетических маркеров продолжает формировать научный и практический интерес современной медицины.
В литературе описаны созданные однофакторные модели, основанные на молекулярно-генетических предикторах, позволяющие прогнозировать овариальный ответ на стимуляцию суперовуляции и качество полученных гамет и эмбрионов [2, 8–10]. Однако недостатками таких моделей являются относительно низкая предиктивная способность и противоречивость данных [11].
Задача данного исследования – создать комплексную мультигенную модель прогнозирования получения незрелых ооцитов в программах ВРТ путем предварительного генотипирования пациенток. Исследование полиморфизма гена может служить мало инвазивным, нетрудоемким, недорогим тестом перед началом стимуляции функции яичников, позволяющим анализировать одновременно большое количество образцов.
Материал и методы исследования
Проведено проспективное исследование на базе отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия и лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
В исследование включены 160 пациенток, соответствовавшиt критериям включения (возраст 18–36 лет, женское бесплодие трубного происхождения, мужской фактор бесплодия при отсутствии выраженной патозооспермии, регулярный менструальный цикл) и исключения (эндокринный фактор бесплодия, перенесенные оперативные вмешательства на яичниках, эндометриоз, миома матки, генетические аномалии, пороки развития половых органов и другие).
Пациентки были разделены на 3 группы в зависимости от типа овариального ответа на стимуляцию суперовуляции: группа с нормальным овариальным ответом на стимуляцию суперовуляции (n=80), предполагавшим рост от 4 до 10 фолликулов; группа с «бедным» овариальным ответом на стимуляцию суперовуляции (согласно Bologna criteria, ESHRE 2011) (n=40) [12], группа с гиперовариальным ответом на стимуляцию суперовуляции (согласно Educational Bulletin American Society of Reproductive Medicine, 2008) (n=40) [13, 14].
Стимуляция функции яичников всем пациенткам проводилась со 2–3-го дня цикла по стандартному протоколу c антагонистом гонадотропин-рилизинг гормона (антГнРГ) препаратом рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (рФСГ) ежедневная доза препарата? в течение 9,8±0,9 дня. Ультразвуковой контроль динамики фолликулогенеза осуществлялся трансвагинально 4–5-кратно в течение стимуляции суперовуляции. При достижении диаметра максимального фолликула >14–15 мм ежедневно вводился препарат антГнРГ в дозе 0,25 мг. Финальное дозревание фолликулов достигалось введением препарата хорионического гонадотропина человека (ХГЧ) в дозе 8000–10 000 МЕ.
Трансвагинальная пункция фолликулов осуществлялась спустя 36 часов после введения ХГЧ. Оплодотворение аспирированных ооцитов проводилось как методом ЭКО (73/160, 45,6%), так и ...
