Моделирование воспалительного процесса в репродуктивных органах самок мышей инбредных линий C57BL/6 и I/St при аэрозольном инфицировании Mycobacterium tuberculosis

Цель. Создать модель воспалительного процесса в репродуктивных органах самок мышей с различной генетически детерминированной восприимчивостью к туберкулезной инфекции при аэрозольном инфицировании Mycobacterium tuberculosis (Mtb).

Материалы и методы. Самок мышей инбредных линий I/St (восприимчивая) и C57BL/6 (устойчивая) заражали аэрозольно Mtb H37Rv. Затем изучали развитие воспалительного процесса в репродуктивных органах и состояние вагинальной микробиоты.

Результаты. У мышей линии C57BL/6 к 3-му дню инфицирования Mtb регистрировали дисбаланс вагинальной флоры с тенденцией к формированию умеренного дисбиоза. У мышей линии I/St достоверно значимых изменений вагинальной микробиоты не отмечали, независимо от сроков инфицирования Mtb. Гистологическое исследование показало постепенное развитие воспалительного процесса в репродуктивных органах обеих линий, более выраженного у мышей I/St.

Заключение. При аэрозольном инфицировании Mtb в репродуктивных органах самок мышей последовательно развивается воспалительный процесс, более выраженный у линии I/St, высокочувствительной к туберкулезу.

В настоящее время легочные и внелегочные формы туберкулеза у человека хорошо изучены и подробно описаны [1–3]. Экспериментальное моделирование туберкулеза легких у мышей проводилось многократно [4–11]. Изучение репродуктивных органов в эксперименте до недавнего времени проводили посредством моделирования генитального туберкулеза, используя внутривагинальный, внутриматочный, алиментарный и внутрибрюшинный пути введения Mycobacterium tuberculosis (Mtb) [12, 13]. Эти методики носят искусственный характер, далекий от реального механизма вовлечения половых органов в туберкулезный процесс у человека. В литературе имеется крайне малое количество экспериментальных работ, посвященных изменениям в репродуктивных органах при туберкулезе органов дыхания, в том числе с использованием самок мышей [14].

Примечательность лабораторной мыши для изучения репродуктивных проблем заключается в полной идентичности ее половой системы человеческому организму. У самки мыши имеются половые органы: яичники, маточные трубы (рога), матка, влагалище. Гистологическое строение половых органов мыши также аналогично эпителию человеческого организма [15]. Оценка влияния туберкулезной инфекции на органы половой системы представляет огромный научный интерес и внесет вклад в понимание патогенеза репродуктивных нарушений при активном туберкулезе органов дыхания.

Целью настоящего исследования явилось создание модели воспалительного процесса в репродуктивных органах самок мышей с различной генетически детерминированной восприимчивостью к туберкулезной инфекции при аэрозольном инфицировании Mtb.

Материалы и методы

Работа выполнена на самках мышей инбредных линий C57BL/6 и I/St, поддерживаемых в питомнике лабораторных животных ФГБНУ «ЦНИИТ». Мышей разводили в соответствии с методическими указаниями Министерства здравоохранения РФ № 755, INH Office of Laboratory Animal Welfare (OLAW). Все экспериментальные процедуры были одобрены Этическим комитетом ЦНИИТ по уходу за животными (протоколы IACUC № 4, 9, 14). Самки весом 20–22 г, которые не были в контакте с самцами, были заражены в аэрозольной камере Glas-Col (США) в дозе 100 КОЕ/легкое. Mtb вирулентного штамма H37Rv была любезно предоставлена Gilles Marchal (Институт Пастера, Париж) и сохранена в отделе иммунологии ФГБНУ «ЦНИИТ». Общее количество мышей (n=27) разделили на группы: 1-я – интактные мыши (n=3); 2-я – мыши линии C57BL/6 (n=12), которых последовательно выводили из эксперимента через 3 (n=3), 7 (n=3), 15 (n=3), 35 (n=3) дней от момента инфицирования; 3-я группа – мыши линии I/St (n=12), которых последовательно выводили из эксперимента через 3 (n=3), 7 (n=3), 15 (n=3), 35 (n=3) дней от момента инфицирования.

Вагинальную флору анализировали с помощью тест-системы «Фемофлор», основанной на методе полимеразной цепной реакции в режиме реального времени [14, 16]. Для этого до инфицирования (день 0), а также через 3, 7, 15, 35 дней после инфицирования у каждой мыши были взяты индивидуальные образцы вагинальных мазков и помещены в гуанидин тиоцианат-фенол-хлороформ (тризол). Для гистологического исследования один маточный рог помещали в 10% формалин. Из фиксированных образцов готовили срезы и окрашивали гематоксилин-эозином. Морфологическое исследование органов репродуктивной системы соотносили с фазой эстрального цикла. Наиболее объективные данные по...

Каюкова С.И., Донников А.Е., Бочарова И.В., Туманова Е.Л., Мнихович М.В., Никоненко Б.В.