Молекулярно-генетические предикторы формирования синдрома поликистозных яичников и его андрогенных фенотипов

Цель. Изучить взаимосвязь синдрома поликистозных яичников (СПКЯ) с полиморфизмом генов, ассоциированных с метаболической дисфункцией, нарушением биосинтеза андрогенов и фолликулогенеза.
Материалы и методы. В исследование включены 163 пациентки с СПКЯ (средний возраст – 25,2 (4,6) года, средний индекс массы тела (ИМТ) – 23,9 (5,3) кг/м2) и 135 женщин без нарушений репродуктивной функции и без признаков андрогенизации (средний возраст – 49,8 (5,8) года, средний ИМТ – 27,4 (5,8) кг/м2). Женщинам с СПКЯ проведено обследование, включающее УЗИ органов малого таза, определение уровней андрогенов в сыворотке крови, АМГ, ЛГ, ФСГ, двухчасовой глюкозотолерантный тест с оценкой уровней глюкозы и инсулина. Генотипирование проведено по 45 полиморфным локусам.
Результаты. Выявлена ассоциация СПКЯ с полиморфизмом 6 генов. Для генов Rub5B/SUOX (rs705702), THADA (rs12468394), OCT1 (rs6282031), SLCO1B1 (rs4149056) предполагается взаимосвязь с инсулинорезистентностью, нарушением толерантности к глюкозе и формированием сахарного диабета 2 типа, а нарушение функции генов DENND1A (rs10818854) и YAP1 (rs1894116), вероятно, приводит к формированию гипоталамо-гипофизарной дисфункции и гиперандрогении. Для генов Rub5B/SUOX, SLCO1B1 и OCT1 получена ассоциация с повышением уровня глюкозы и инсулина, взаимосвязь с гиперандрогенией по уровню Тобщ установлена для гена YAP1.
Заключение. Полученные результаты являются основой для проведения дальнейших ассоциативных и функциональных исследований по изучению генетических особенностей СПКЯ на популяции российских женщин. Перспективной представляется разработка шкалы индивидуального генетического риска для диагностики СПКЯ у девочек-подростков и женщин со стертыми формами.

Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) рассматривают как эндокринно-метаболический симптомокомплекс, частота которого в популяции среди женщин репродуктивного возраста достигает 20%. По оценкам National Institute of Health (NIH), в 2012 г. только в США число женщин репродуктивного возраста с СПКЯ достигло 5 млн [1]. Многообразие клинических проявлений СПКЯ создает ряд трудностей в диагностике синдрома. По данным исследования Gibson-Helm M. (2016), каждая третья женщина с СПКЯ тратит более двух лет на постановку корректного диагноза, посетив более трех специалистов [2]. Вероятно, это связано с тем, что традиционно используемые Роттердамские критерии нельзя считать абсолютно надежными ввиду недостаточной чувствительности и специфичности каждого признака, взятого в отдельности. Наиболее перспективным с позиций как оптимизации диагностики, так и изучения патогенетических основ синдрома представляется проведение молекулярно-генетических исследований. Генетические маркеры СПКЯ могли бы использоваться в повседневной практике и как самостоятельные критерии для выявления женщин группы риска по развитию синдрома, и в качестве метода постановки корректного диагноза у пациенток со стертой симптоматикой. В более ранних исследованиях изучалась ассоциация СПКЯ с полиморфизмом генов андрогенового рецептора, гена инсулинового рецептора и генов, регулирующих его активность [3, 4]. Проведение полногеномных исследований в группе из 16 тысяч женщин китайской популяции позволило установить ассоциацию СПКЯ с полиморфизмом 11 генов [5, 6]. Это гены, ответственные за действие гонадотропинов и биосинтез андрогенов (LHCGR, FSHR, DENND1A), функцию сигнальных путей инсулина (INSR), а также гены, ассоциированные с развитием сахарного диабета (HMG2, THADA и область, содержащая гены RAB5B/SUOX, ERBB3), регулирующие рост органов и клеточную пролиферацию (YAP1, SUMO1P1, ТОХ3). Воспроизведение результатов этих исследований американскими и европейскими учеными позволило установить ассоциацию СПКЯ с полиморфизмом 6 генов (LHCGR, FSHR, DENND1A, THADA, RAB5B/SUOX, YAP1) [7–9]. Российскими учеными исследован полиморфизм генов FMR1, CYP11A1, CYP17, CYP19 [10, 11], однако не представлены данные об ассоциации локусов, ранее выявленных в ходе полногеномных исследований. В связи с чем целью проведенного исследования явилось изучение взаимосвязи СПКЯ с полиморфизмом генов, ассоциированных с метаболической дисфункцией, нарушением биосинтеза андрогенов и фолликулогенеза.

Материалы и методы

В исследование были включены 298 женщин, из них 163 с СПКЯ в возрасте от 18 до 35 лет (средний возраст – 25,2 (4,6) года, средний индекс массы тела (ИМТ) – 23,9 (5,3) кг/м2) и 135 женщин группы контроля (средний возраст – 49,8 (5,8) года, средний ИМТ – 27,4 (5,8) кг/м2). Критериями включения в основную группу явились: наличие СПКЯ, установленного в соответствии с Роттердамскими критериями (2003), отсутствие сопутствующей эндокринной и некомпенсированной экстрагенитальной патологии, а также гормональной терапии в течение 3 месяцев до включения в исследование. Группу контроля составили женщины старше 45 лет, c реализованной репродуктивной функцией без нарушения менструального цикла, преждевременной недостаточности яичников, СПКЯ и андрогенизации в анамнезе.

Всем пациенткам с СПКЯ на 5–7-й день менструального цикла проведено ультразвуковое трансвагинальное исследование органов малого таза с частотой 7,5 Мгц на аппарате 2000 Toshiba SSA-240 (Япония). На 2–3-й день менструального цикла в сыворотке крови оценивались уровни лютеинизирующего (ЛГ), фолликулостимулирующего (ФСГ) гормонов, общего и свободного тестостерона (Тобщ и Тсв), андростендиона (А4), глобулина, связывающего половые стероиды (ПССГ), пролактина, тиреотропного гормона (ТТГ) (иммунохемилюминесцентным методом на автоматическом анализаторе Immulite 2000 (Siemens, USA)), уровень антимюллерова гормона (АМГ) (методом ELISA с использованием тест-систем AMH Gen II ELISA (Beckman Coulter, USA)). На основании результатов клинико-лабораторного исследования определяли фенотип СПКЯ – классический фенотип А (гиперандрогения (ГА) + поликистозные яичники (ПКЯ) + олигоменорея (ОМ)), ановуляторный фенотип В (ГА + ОМ), овуляторный фенотип С (ГА + ПКЯ) и неандрогенный фенотип Д (ПКЯ + ОМ). Проведен 2-часовой оральный глюкозотолерантный тест с 75 г глюкозы с определением уровня инсулина на фоне углеводной нагрузки. В рамках исследования липидного спектра крови определяли уровни холестерина, триглицеридов, липопротеидов низкой и высокой плотности, производили расчет коэффициента атерогенности.

Анализ полиморфизма генов производился в лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ «НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова» МЗ РФ. Генотипирование по 45 локусам проводилось с применением полимеразной цепной реакции с анализом кривых плавления или таргетного секвенирования на приборах IonS5, чипы 520 и 530 (таблица).

Чернуха Г.Е., Найдукова А.А., Каприна Е.К., Донников А.Е.