Молекулярные механизмы индивидуальной реактивности тромбоцитов при гематурии, ассоциированной с литотрипсией

Цель исследования: изучить механизмы индивидуальной реактивности тромбоцитов на АДФ и адреналин в связи с вариабельностью гематурии после литотрипсии (ЛТ), проведенной пациентам с хроническим обструктивным пиелонефритом (ХОПН).
Материалы и методы: в исследование включен 41 пациент с ХОПН, который поступил в урологическое отделение для проведения ЛТ. Контактную ультразвуковую ЛТ проводили с помощью аппарата Karl Storz-Calcuson. Верификация степени послеоперационной гематурии основывалась на подсчете количества эритроцитов в моче. Тромбоциты выделяли путем центрифугирования из цитратной периферической крови. Оценку агрегации тромбоцитов проводили на агрегометре Chrono-log с использованием агонистов (АДФ, адреналин) в концентрации ЕС50 и ЕС10. Результаты: спектр функциональных ответов тромбоцитов на АДФ и адреналин после проведения ЛТ представлен тремя возможными вариантами (повышение ответа, реакция не изменилась и агрегация снизилась), однако преобладающим типом индивидуальной реакции является повышение агрегации тромбоцитов. По результатам исследования, проведенного через 24 ч после ЛТ, обнаружено 7 фенотипов тромбоцитов, отличающихся функциональной активностью α2-адренорецепторов и пуриновых рецепторов (Р2Y1 и Р2Y12). При нормореактивности пуриновых рецепторов тромбоциты сохраняют способность в ответ на адреналин повышать функциональную активность, направленную на ограничение гематурии. Снижение реакции тромбоцитов на АДФ после ЛТ, достигающее уровня гипореактивности, может рассматриваться в качестве предиктора выраженной гематурии после оперативного лечения.
Выводы: таким образом, индивидуальная реактивность тромбоцитов, проявляющаяся взаимодействием агонистов АДФ и адреналина, определяет эффективность повышения проагрегантного потенциала тромбоцитов при развитии послеоперационной гематурии.

Введение. Патогенез послеоперационных кровотечений остается одной из малоизученных проблем урологии [1, 2]. Причины развития этого осложнения следует искать в том числе в индивидуальной реактивности тромбоцитарного звена гемостаза [3]. В связи с этим привлекают внимание: 1) адренореактивность организма пациента, отражающая состояние симпатоадреналовой системы, поскольку адреналин может существенно модулировать реакцию тромбоцитов (Тц) на основные агонисты (тромбин, коллаген, АДФ); 2) адаптационные возможности Тц, которые генетически детерминированы в процессе мегакариоцитопоэза. Следует признать, что частота развития и выраженность кровотечений после урологических вмешательств ставят под сомнение информативность существующих методов диагностики и эффективность прогнозирования гемостаза [4]. Это обосновывает интерес к разработке технологий оценки индивидуальной реактивности Тц на этапах консервативного и оперативного лечения пациентов с заболеваниями почек и мочевыводящих путей.

Цель исследования: изучить механизмы индивидуальной реактивности Тц на АДФ и адреналин в связи с вариабельностью гематурии после литотрипсии (ЛТ) у пациентов с хроническим обструктивным пиелонефритом (ХОПН).

Материалы и методы. В исследование включен 41 пациент с ХОПН, который поступил в урологическое отделение для проведения контактной ультразвуковой ЛТ (аппарат Karl Storz-Calcuson). На этапе госпитализации проведен отбор пациентов с гипореактивным фенотипом тромбоцитов, одной из причин которого может быть назначение нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) и антибиотиков. Данный фенотип тромбоцитов весьма перспективен для прогнозирования кровопотери после оперативных вмешательств. В связи с этим в исследование включены пациенты, принимавшие НПВП и антибиотики в стандартной дозе не менее 5–10 дней до момента госпитализации. Диагноз ХОПН верифицирован на основании жалоб больных, данных анамнеза заболевания, объективного осмотра, результатов клинико-лабораторных и инструментальных исследований. О степени гематурии через 24 ч после ЛТ судили на основании общего анализа мочи и критерия [5], согласно которому микрогематурия характеризуется наличием трех и более эритроцитов в поле зрения. Для градации макрогематурии подсчитали по Нечипоренко количество эритроцитов в 1 мл мочи.

Тромбоциты выделены путем центрифугирования из цитратной периферической крови пациентов. Для анализа функционального состояния Тц использованы агонисты АДФ (5 мкМ) и адреналин (5 мкМ) в концентрации ЕС50, воспроизводящей амплитуду агрегации 50% у здоровых лиц. В исследованиях также были использованы субпороговые концентрации агонистов, которые в контрольной группе (10 здоровых доноров) вызывали агрегацию Тц (АТц) на уровне 10,0±0,8%. Для адреналина ЕС10 составила 0,1 мкМ, для АДФ – 0,5 мкМ. Оценку АТц проводили на агрегометре Chrono-log (США). Все клинические исследования выполнены с разрешения комиссии по биоэтике Донецкого национального медицинского университета им. М. Горького.

Статистическую обработку результатов проводили в пакетах MedCalc; статистически значимую достоверность констатировали при р<0,05.

Результаты. Для достижения поставленной цели в ходе исследования мы попытались ответить на несколько вопросов.

Во-первых, отличается ли индивидуальная реактивность Тц на адреналин после ЛТ? При исходной гипореактивности Тц на агонисты увеличение ответа на адреналин после ЛТ выявлено у 21 (51,2%) пациента, отсутствие изменения реакции – у 15 (36,6%), снижение – у 5 (12,2%; табл. 1).

Таким образом, спектр функциональных ответов Тц на адреналин после проведения ЛТ представлен всеми тремя возможными вариантами, однако преобладающим типом реакции является повышение АТц. При таком типе реакции Тц адреналининдуцированная агрегация после ЛТ возросла в 3,1 раза (95% ДИ – 23–100%), при этом в I квартиле величина АТц составила 23%, в III – 58%. Полученные данные свидетельс...

Э.Ф. Баринов, Т.А. Твердохлеб, А.Н. Кравченко, А.О. Балыкина, Н.А. Черкасова