Морфологические аномалии ооцитов у ВИЧ-инфицированных пациенток, получающих антиретровирусную терапию

Цель: Изучить распространенность дисморфизмов ооцитов у ВИЧ-инфицированных женщин, принимающих антиретровирусную терапию (АРТ). Материалы и методы: В ретроспективное исследование включены 210 супружеских пар, обратившихся для проведения программы ЭКО. Основная группа – 113 пациенток с ВИЧ-инфекцией, контрольная – 97 женщин без ВИЧ-инфекции, которым выполнено 163 и 123 стимулированных цикла соответственно. Проведена морфологическая оценка 2321 зрелого ооцита (MII), из них 1228 получены в основной группе и 1093 – в группе контроля. Результаты: Медиана возраста у пациенток с ВИЧ-инфекцией составляла 34 (31;37) года; длительность заболевания и продолжительность АРТ – 8 (5;11) и 3,6 (2;6) года соответственно. У 65 из 113 женщин (57,5%; 95% ДИ 47,8–66,4) была 3-я субклиническая стадия заболевания, у 43 (38,1%; 95% ДИ 29,2–47,8) – 4А стадия, у 2 (1,8%; 95% ДИ 0–4,4) – 4Б и у 3 (2,7%; 95% ДИ 0–6,2) – 4В стадия ВИЧ-инфекции. Медиана уровня CD4+лимфоцитов составила 582 (432;807) мкл в 1 кл., а значение иммунорегуляторного индекса (ИРИ) – 0,87. Все пациентки получали АРТ и имели неопределяемую вирусную нагрузку в крови перед проведением программы ЭКО. Распространенность различных видов дисморфизмов ооцитов у ВИЧ-инфицированных женщин была существенно выше, чем у пациенток контрольной группы, и составила 29,5% (362/1228) и 14,1% (154/1093) соответственно (р<0,001; ОШ 2,0; 95% ДИ 1,765–2,480). В структуре цитоплазматических аномалий строения ооцитов в обеих группах преобладала центральная гранулярность цитоплазмы. Частота выявления данного вида дисморфизма в основной группе составила 17,3% (213/1229), в группе контроля – 10% (109/1093), при этом различия были статистически значимы (р<0,001; ОШ 2,26; 95% ДИ 1,8–2,7). Распространенность экстрацитоплазматических аномалий строения ооцитов, а также сочетание форм у ВИЧ-инфицированных пациенток были сопоставимы с ВИЧ-серонегативным контролем. Заключение: Более высокая распространенность дисморфизмов ооцитов у ВИЧ-инфицированных пациенток, принимающих АРТ, по сравнению со здоровыми женщинами свидетельствует об ухудшения морфологических характеристик ооцитов в данной группе больных.

Ключевым фактором успеха в циклах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) является функциональная и морфологическая зрелость гамет. В экспериментах на животных было показано, что качество ооцита играет более важную роль, чем характеристики сперматозоида [1, 2]. Компетентность ооцитов, их способность к оплодотворению и дальнейшее раннее развитие эмбриона определяется синхронностью созревания ядра и цитоплазмы. Нарушение или асинхронность данного процесса может приводить к появлению тех или иных морфологических аномалий строения ооцитов, распространенность которых в циклах экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) достигает 50% [3]. Общепринято различать экстрацитоплазматические и цитоплазматические аномалии строения яйцеклеток, называемые дисморфизмами. К цитоплазматическим дисморфизмам ооцитов относятся центральная гранулярность цитоплазмы, вакуоли, аномальные агрегаты гладкого эндоплазматического ретикулума (ГЭР), а также темная или агомогенная цитоплазма. Ряд исследователей считают, что ооциты с данными видами дисморфизмов имеют низкую частоту оплодотворения, а эмбрионы, полученные из таких клеток, обладают низким потенциалом к имплантации и дальнейшему развитию [4–6]. Экстрацитоплазматические дисморфизмы – это изменение ширины и наличие гранулярности в перивителлиновом пространстве, изменение формы или толщины блестящей оболочки, а также аномалия строения первого полярного тельца. Экспертами Стамбульского консенсуса по оценке ооцитов и эмбрионов было показано, что экстрацитоплазматические аномалии следует рассматривать как фенотипические отклонения (вариации), а некоторые из них – как индикатор старения ооцитов [7]. Остается спорным вопрос о негативном влиянии данных видов дисморфизмов на частоту оплодотворения и развитие эмбриона [4, 5, 8, 9].

В литературе обсуждается роль возраста женщины, а также некоторых гинекологических заболеваний и метаболических нарушений в появлении морфологических аномалий ооцитов [10]. Кроме этого, ряд исследователей в качестве фактора риска возникновения дисморфизмов рассматривают длительность овариальной стимуляции и суммарной дозы гонадотропинов [4, 11–13]. Однако не существует единой точки зрения относительно влияния перечисленных факторов на морфологию яйцеклеток. Следует сказать, что остаются неизученными морфологические характеристики ооцитов у пациенток, принимающих гонадотоксичные препараты. Так, среди хронических инфекционных заболеваний особое место занимает ВИЧ-инфекция. По данным объединенной программы ООН по ВИЧ/СПИД (ЮНЭЙДС), в 2020 г. в мире насчитывалось 38,0 (31,6–44,5) млн людей, живущих с ВИЧ, из них на конец июня 2020 г. 26,0 (25,1–26,2) млн. получали антиретровирусную терапию (АРТ). Следует сказать, что современная АРТ позволяет перевести заболевание в разряд хронической контролируемой патологии, сохранить качество и продолжительность жизни людям с ВИЧ-инфекцией [14]. Однако в литературе обсуждается негативное влияние на качество ооцитов как тяжелого иммунодефицита, связанного с ВИЧ-инфекцией, так и АРТ. В ряде работ было показано, что при использовании нуклеозидных и нуклеотидных ингибиторов обратной транскриптазы (НИОТ) в ооцитах и кумулюсных клетках у пациенток с ВИЧ-инфекцией наблюдается истощение митохондриальной ДНК (мтДНК), увеличение частоты ее мутаций [15–17]. Именно с этим авторы связывают снижение способности ооцитов к оплодотворению и низкую эффективность программы ЭКО в данной группе больных. Однако сведения об исследованиях по изучению морфологических характеристик ооцитов у ВИЧ-инфицированных женщин, принимающих АРТ, в научной литературе отсутствуют. Данный аспект представляет научный интерес в связи с увеличением числа женщин репродуктивного возраста, инфицированных ВИЧ и планирующих беременность с использованием ВРТ.

Цель исследования: изучить распространенность дисморфизмов ооцитов у ВИЧ-инфицированных женщин, принимающих АРТ.

Материалы и методы

В ретроспективное исследование включены 210 супружеских пар, обратившихся для проведения программы ЭКО. Основную группу составили 113 пациенток с ВИЧ-инфекцией, контрольную – 97 женщин без ВИЧ-инфекции, которым выполнено 163 и 123 стимулированных цикла соответственно. Проведена морфологическая оценка 2321 зрелых ооцитов (MII), из них 1228 – полученных в основной группе и 1093 – в группе контроля. Критерии включения в основную группу: ВИЧ-положительный статус у женщины, в контрольную – отсутствие ВИЧ-инфекции. Критерии невключения в обеих группах: наличие противопоказаний к проведению ВРТ (Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации № 803н «О порядке использования вспомогательных репродуктивных технологий, противопоказаниях и ограничениях к их применению» от 31.07.20).

Стимуляцию суперовуляции проводили в протоколах с антагонистами гонадотропин-рилизинг-гормона (ант-ГнРГ) с использованием препаратов рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (рФСГ). При достижении фолликулами диаметра 14–15 мм для предотвращения паразитарного пика эндоге...

Митюрина Е.В., Перминова С.Г., Кравченко А.В., Козырина Н.В., Веюкова М.А., Гапоненко А.А.