Морфологические и молекулярно-биологические особенности эндометрия в период «окна имплантации» у пациенток с бесплодием, сочетающимся с наружно-генитальным эндометриозом 1-2 стадии

Цель исследования. Изучение морфологических и молекулярно-биологических особенностей эндометрия пациенток с бесплодием и наружным генитальным эндометриозом (НГЭ) 1–2-й стадии в период «окна имплантации».
Материал и методы. Были исследованы 72 бесплодные пациентки: 23 – с НГЭ 1–2-й стадии, 32 – с трубно-перитонеальным фактором (ТПФ) и 17 – с мужским фактором бесплодия (МФ). Всем пациенткам проводилась аспирационная пайпель-биопсия эндометрия на 6–8-й день после овуляции с последующим гистологическим и иммуногистохимическим исследованием. Определяли количество пиноподий, уровень экспрессии эстрогеновых-α (ЭРα) и прогестероновых-А (ПР-А) рецепторов в строме и эпителии эндометрия, соотношение ПР/ЭРα в строме.
Результаты и обсуждение. У пациенток с НГЭ 1–2-й стадии отмечалось достоверное повышение уровня экспрессии ЭРα как в строме, так и в эпителии эндометрия (р=0,031 и р=0,027). Уровень экспрессии ПР-А в эпителии и строме эндометрия всех групп снижался в зависимости от фазы развития эндометрия (р=0,013; р=0,032), однако статистически не различался между группами (р=0,186; р=0,503). Среднее количество пиноподий в эндометрии пациенток с НГЭ 1–2-й стадии и ТПФ было достоверно ниже по сравнению с пациентками с МФ (р=0,02).
Заключение. У пациенток с бесплодием, сочетающимся с НГЭ 1–2-й стадии, происходит нарушение рецептивности эндометрия в период «окна имплантации», что проявляется в снижении количества пиноподий и дисбалансе гормональных рецепторов. Особенностью изменения эндометрия в «окно имплантации» при НГЭ 1–2-й стадии является достоверно более высокий уровень ЭРα в эпителии и строме. Это в свою очередь может являться одной из ведущих причин бесплодия и более низкой эффективности программы ЭКО у пациенток с данным заболеванием.

По данным ВОЗ в мире бесплодием страдает до 80 млн женщин репродуктивного возраста. Одной из наиболее частых причин бесплодия является эндометриоз [1]. Эндометриоз – это доброкачественное гормональнозависимое заболевание, характеризующееся дистопией ткани, по строению и функции подобной эндометрию, за пределами слизистой матки [2]. Данным заболеванием страдает примерно 10–15% женщин репродуктивного возраста, 30–50% которых являются бесплодными [3]. Существующие возможности хирургического и медикаментозного лечения эндометриоза помогают получить долгожданную беременность лишь у 30–33% пациенток [4].

Некоторые исследователи предполагают, что одной из причин бесплодия, ассоциированного с эндометриозом, являются молекулярные дефекты эндометрия, возникающие во время «окна имплантации» и нарушающие имплантацию эмбриона [5].

При этом эндометрий женщин с эндометриозом может иметь нормальную гистологическую структуру с изменениями на биохимическом уровне в период «окна имплантации» [6]. Решающую роль в процессе имплантации играет рецептивность эндометрия – комплекс структурно-функциональных характеристик эндометрия с четкими временными и пространственными константами, определяющий способность эндометрия к имплантации [7]. Имплантация наиболее вероятна в период наибольшей рецептивности эндометрия по отношению к бластоцисте, в так называемый период «окна имплантации», возникающий на 6–8-й день после пика лютеинизирующего гормона (ЛГ). Так, B.A. Lessey и соавт. продемонстрировали повышение экспрессии эстрогеновых рецепторов-α (ЭРα) в сочетании со снижением или отсутствием экспрессии интегрина αvβ3 в эндометрии женщин с эндометриозом в период «окна имплантации» [8]. Однако некоторые авторы не выявили отличий в экспрессии ЭРα и прогестероновых рецепторов (ПР) в эутопическом эндометрии пациенток, больных эндометриозом, по сравнению со здоровыми женщинами [9].

Результативность программы ЭКО как одного из наиболее эффективных методов лечения бесплодия составляет 12,5% при наружном генитальном эндометриозе (НГЭ) 1–2-й стадии, по сравнению с 28,6–37,4% при трубно-перитонеальном факторе бесплодия (ТПФ) [10]. Несмотря на многочисленные исследования причин бесплодия при НГЭ, до сих пор нет однозначного мнения о том, изменяется ли рецептивность эндометрия у пациенток с данным заболеванием и экспрессия каких морфологических и молекулярных маркеров при этом нарушается.

Целью данного исследования стало изучение морфологических и молекулярно-биологических особенностей эндометрия пациенток с бесплодием и НГЭ 1–2-й стадии в период «окна имплантации».

Материалы и методы исследования

Были исследованы 72 образца биоптата эндометрия бесплодных женщин с целью исключения патологии эндометрия и подготовки к программе ЭКО. Из них 23 пациентки – с установленным на основании данных клинико-лабораторного обследования диагнозом НГЭ 1–2-й стадии (основная группа наблюдений), 32 женщины с ТПФ при отсутствии или непроходимости маточных труб (группа сравнения) и 17 пациенток с мужским фактором бесплодия (МФ) – контрольная группа.

Критериями включения пациенток в исследование стали: возраст женщин от 20 до 38 лет; регулярный менструальный цикл; наличие НГЭ 1–2-й стадии по пересмотренной классификации Американского общества фертильности, верифицированного при оперативном вмешательстве на органах малого таза и подтвержденного данными гистологического исследования (для основной группы); отсутствие других гинекологических заболеваний, влияющих на репродуктивную функцию и рецептивность эндометрия (миома матки, СПКЯ, синехии, гиперпластические процессы эндометрия, хронический эндометрит, пороки развития матки, аденомиоз); отсутствие гормонального лечения в течение 3 месяцев до проведения исследования Каждой пациентке проводился ультразвуковой мониторинг фолликулогенеза и функциональные тесты для определения пика ЛГ в моче с целью определения овуляции.

Аспирационная пайпель-биопсия эндометрия проводилась под ультразвуковым контролем из области дна матки с помощью аспирационной кюретки Pipelle de Cornier («Laboratoire C.C.D.», Франция) на 6–8-й день после овуляции.

Материалы биоптатов фиксировали в 10% нейтральном формалине в течение 24 ч. После обработки образцов по стандартной общепринятой унифицированной методике их заключали в парафин. Срезы толщиной 4 мкм готовили на роторных микротомах и окрашивали гематоксилином и эозином. Исследование гистологических препаратов проводилось в световом микроскопе при увеличении от х50 до х1000. Также проводилась оценка процента клеток поверхностного эпителия с наличием зрелых пиноподий в световом микроскопе при увеличении х1000 в 5 полях зрения.

Иммуногистохимические (ИГХ) реакции проводили на серийных депарафинированных срезах толщиной 3–4 мк...

Коган Е.А., Колотовкина А.В., Файзуллина Н.М., Калинина Е.А.