Акушерство и Гинекология №9 / 2022
NK-клетки периферической крови у пациенток с неэффективными протоколами вспомогательных репродуктивных технологий: количество, субпопуляционный состав и маркеры активации
1) ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта», Санкт-Петербург, Россия;
2) ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия
В настоящее время общепринятые методы обследования супружеских пар с бесплодием не позволяют установить его причину в 20–30% случаев, а при повторных эпизодах репродуктивных неудач данный показатель возрастает до 50% [1, 2]. В этой связи большой научно-практический интерес представляет изучение иммунологических причин репродуктивных потерь, играющих значимую роль в отсутствии наступления, а также в прерывании беременности в данной когорте пациентов.
Для оценки иммунологических отклонений при репродуктивных нарушениях используются различные методы исследования. Наиболее доступным материалом для проведения анализа является периферическая кровь, в которой определяются субпопуляционный состав лимфоцитов, уровень регуляторных Т-лимфоцитов (Тreg), аутоантител, цитокинов, количества и активности естественных клеток-киллеров периферической крови (pbNK-клеток) и другие показатели.
На основании оценки поверхностного рецепторного профиля pbNK-клеток могут определяться их субпопуляционная принадлежность и функциональная активность [3]. Основная субпопуляция pbNK-клеток, обладающая фенотипом CD56dimCD16bright (≈90% общего количества pbNK-клеток), описывается как цитотоксическая. Минорная субпопуляция pbNK-клеток с фенотипом CD56brightCD16dim (≈10% общего количества pbNK-клеток) обладает регуляторной функцией. Цитотоксическая активность субпопуляции CD56dimCD16bright pbNK-клеток обусловлена содержанием большого количества гранул с перфорином, гранзимами и другими цитолитическими веществами, быстрым контактом с клетками-мишенями [4]. CD56brightCD16dim pbNK-клетки экспрессируют хемокиновые и адгезионные рецепторы, способствующие их трансэндотелиальной миграции из кровотока в ткани, в том числе в органы репродуктивной системы – эндометрий и децидуальную оболочку [5]. Клетки «регуляторной» субпопуляции активно продуцируют цитокины, такие как интерферон-γ (IFN-γ), фактор некроза опухоли-α (TNF-α), гранулоцитарный колониестимулирующий фактор роста (G-CSF), интерлейкины-10 и -13 (IL-10, IL-13), влияют на функции иммунных клеток, способствуют формированию адаптивного иммунного ответа [6]. Хотя CD56bright pbNK-клетки обладают невысокой цитотоксичностью, этот эффект усиливается в условиях воспаления, после их активации [7].
Остается дискуссионной и недостаточно изученной роль NK-клеток при бесплодии и привычном невынашивании беременности (НБ) [8–10]. Согласно результатам метаанализа, количество pbNK-клеток при указанных состояниях выше, чем у здоровых женщин [11], однако в ряде работ обнаружено как снижение, так и отсутствие различий в их уровне [12, 13]. Некоторые авторы сообщают о прогностической значимости количества и активности pbNK-клеток для оценки исходов беременностей, наступивших как после экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), так и при самостоятельном планировании, но данные остаются противоречивыми [14, 15].
Показано изменение экспрессии различных групп рецепторов pbNK-клеток при привычном НБ, самопроизвольных выкидышах, бесплодии [16, 17]. Одним из основных рецепторов, характеризующих активацию NK-клеток, является трансмембранный лектиноподобный рецептор NKG2D. Другим маркером, отражающим цитотоксическую активность pbNK-клеток, является экспрессия гликопротеина CD107а, появляющаяся на плазматической мембране при слиянии лизосомальной и цитоплазматической мембран клетки в процессе дегрануляции [18].
В последние годы особую значимость приобретает оценка не только количества, но и функциональной активности pbNK-клеток. Показаны вариативные изменения рецепторного профиля и цитотоксичности pbNK-клеток при репродуктивных потерях. Так, при привычном НБ показано изменение субпопуляционного состава в сторону преобладания цитотоксического фенотипа [14]. По данным ряда авторов, у пациенток с бесплодием экспрессия активирующих рецепторов на поверхности pbNK-клеток ниже, чем у здоровых женщин; в других исследованиях подобных различий не обнаружено [15, 16]. При этом комплексные данные о субпопуляционном составе лимфоцитов и pbNK-клеток, их функциональной активности у пациенток с бесплодием и неудачами ЭКО малочисленны.
Недостаточно данных относительно роли Treg при повторных неудачах имплантации в протоколах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). К одной из иммунорегуляторных функций Тreg относится регуляция фенотипа и активности эндометриальных NK-клеток [19, 20]. Снижение количества Treg ассоциировано с НБ и рядом акушерских осложнений, таких как преэклампсия и синдром задержки роста плода [21].
Целью настоящего исследования явилось изучение количества, субпопуляционного состава и фенотипических маркеров активации pbNK-клеток, а также субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови у пациенток с неэффективными протоколами ВРТ в анамнезе.
Материалы и методы
В основную группу исследования были включены 60 пациенток, имеющих в анамнезе неэффективные протоколы ВРТ, соответствующих следующим критериям включения: один неэффективный протокол ВРТ и более с пере...
