Оценка динамики иммунологических показателей в начале терапии в качестве прогностических и предиктивных факторов у больных меланомой

Обоснование. Поиск динамических биомаркеров эффективности иммунотерапии является важной задачей в современной онкологии. Мы провели анализ динамики отдельных субпопуляций иммунных клеток в начале терапии в качестве фактора прогноза эффективности лечения. Цель исследования: оценка динамики основных субпопуляций лимфоцитов и возможность ее использования в качестве раннего маркера ответа на терапию больных меланомой. Методы. В исследование были включены 182 больных, получавших терапию ипилимумабом и вакцинотерапию (CaTeVac и Tag-7 геномодифицированные вакцины) для лечения местнораспространенной неоперабельной (10,4%) и метастатической (89,6%) меланомы. Проводилась оценка иммунологических показателей до лечения и через 2–6 недель от его начала. В качестве фактора прогноза эффективности терапии использовались показатели повышения и понижения изучаемых популяций иммунных клеток. Благоприятными считались факторы, повышающие вероятность объективного ответа или снижающие риски прогрессирования или смерти при р<0,05. Результаты. Благоприятными прогностическими факторами оказались изменение уровня лимфоцитов и цитотоксических лимфоцитов (ЦТЛ), снижение уровня NK клеток, Т-лимфоцитов и CD25+ Т-хелперов (Th), повышение уровня нейтрофилов, нейтрофильно-лимфоцитарного соотношения и иммунорегуляторного индекса, HLA DR+ЦТЛ, CD95+-лимфоцитов. Неблагоприятными были факторы повышения уровня регулятроных Т-лимфоцитов, Th и CD25+ Th (%), NKT-клеток и снижения числа CD71+-лимфоцитов. Изменения содержания клеток памяти, CD38+Th, CD38+ЦТЛ, CTLA4+Th, CD1D+-лимфоцитов, CD3-CD16+56+NKG2D+, CD3+CD4+CD8+ и CD3+CD4-CD8-клеток не имели связи с показателями эффективности при заданном в исследовании уровне значимости. Заключение. Мониторинг состояния иммунной системы в процессе терапии может предоставить важную информацию о развитии эффекта лечения до проведения рутинной радиологической оценки ответа по системе RECIST.

Введение

Иммунотерапия в настоящее время находит все новые показания к применению и служит компонентом терапии всех злокачественных опухолей благодаря регистрации агностических показаний к ее применению больными с микросателлитной нестабильностью [1]. Особенно актуальным в свете последних достижений становится поиск биомаркеров для определения прогноза и отбора пациентов, которым иммунотерапевтические стратегии действительно могут помочь. В то время как большинство исследователей сходятся во мнении о необходимости динамического контроля за иммунологическими маркерами, становится очевидным, что именно иммунологические показатели периферической крови могут быть удобным средством наблюдения и контроля за эффективностью терапии [2]. Однако иммунологический мониторинг до сих пор не входит ни в один из стандартов лечения злокачественных опухолей. Основной фокус внимания исследователей привлекают отдельные виды иммунных клеток, которые изучаются в качестве подобных маркеров. Мы же в своем исследовании АИСТ предприняли попытку оценить динамику основных субпопуляций лимфоцитов и оценить возможность ее использования в качестве раннего маркера ответа на терапию больных меланомой.

Цель исследования: оценка динамики основных субпопуляций лимфоцитов и возможность ее использования в качестве раннего маркера ответа на терапию больных меланомой.

Методы

Для оценки роли динамики изменений иммунологических показателей в качестве предиктивных и прогностических факторов был проведен анализ ранних изменений в показателях иммунного статуса (ИС). С этой целью отобрали пациентов с меланомой, которым была проведена оценка ИС до лечения (в течение 4 недель до начала терапии) и в процессе лечения в течение первых 12 недель терапии. При этом для анализа при наличии нескольких ИС использовались в первую очередь оценки на 2–4-й неделях терапии, в их отсутствие последовательно включались ИС на 5–12-й и 1-й неделях лечения. Характеристика пациентов, включенных в исследование АИСТ, представлена в табл. 1.

Для оцени прогностической и предиктивной роли динамики иммунологических характеристик показатель на фоне лечения сравнивали с таковыми до лечения с использованием минимально определяемых различий (MDD), определение и расчет которых описаны в разработанном нами методе оценки [3]. Изменения показателя меньше MDD трактовались как отсутствие изменений. При больших различиях результат расценивался как повышение и понижение соответственно. Нами использованы два различных размера MDD: специфический, рассчитанный на каждого конкретного показателя, и общий, полученный на основании среднего значения сравниваемых показателей в соответствии с предложенной нами методикой. Во всех случаях сравнения пациенты с отсутствием изменений показателей расценивались как референсная категория. В отсутствие различий с референсной категорией к ней допускалось добавление больных с результатами из неотличавшейся категории для увеличения мощности исследования.

При оценке связи динамики с объективным ответом на лечение использовался ответ по RECIST 1.1. При этом оценивалась вероятность развития прогрессирования (ПЗ) или стабилизации (СЗ) заболевания, или объективного ответа (ОО) на лечение, включившего полный и частичный регресс.

В исследовании проведен анализ следующих субпопуляций иммунных клеток:

• показатели врожденной иммунной системы:
• лейкоциты, лимфоциты, моноциты, нейтрофилы, эозинофилы;
• NK-клетки (CD3-CD16+CD56+), NKТ-клетки (CD3+CD16+CD56+);
• нейтрофильно-лейкоцитарный индекс (NLR, отношение нейтрофилов к лимфоцитам), лимфоцитарно-моноцитарный индекс (LMR, отношение лимфоцитов к моноцитам), индекс NMLR (отношение суммы моноцитов и нейтрофилов к лимфоцитам);
• отношении NK- и NKT-клеток к ЦТЛ;
• показатели Т-клеточного звена адаптивной иммунной системы:
• Т-лимфоциты (CD3+CD19-), Т-хелперы (Th, CD3+CD4+), ЦТЛ (CD3+CD8+);
• активированные CD25+ и HL DR+ T-хелперы, активированные HL DR+ ЦТЛ;
• иммунорегуляторный индекс (ИРИ, отношение CD4+ к CD8+ лимфоцитам), отношение ЦТЛ к Treg;
• показатели В-клеточного звена адаптивной иммунной системы – В-лимфоциты (CD3-CD19+).

У больных, получавших вакцины, дополнительно оценивались общая экспрессия HLA DR и CD25 на мононуклеарах периферической крови, двойные негативные (CD3+CD4-CD8-) лимфоциты, функциональная активность лейкоцитов (спонтанная миграция и миграция, стимулированная КонА или ФГА), характеристики фагоцитоза (НСТ-тест, фагоцитарное число и фагоцитарный индекс нейтрофилов и моноцитов).

У больных, получавших ипилимумаб, дополнительно были оценены CD38+Th, CD38+ЦТЛ, CTLA4+Th, CD1D+ лимфоциты, CD3-CD16+56+NKG2D+, популяции клеток памяти (CD3+CD27+CD62L+, CD3+CD28+CD62L+, центральные Т-клетки памяти (СD3+СD45RA-СD62L+) и эффекторные Т-клетки памяти (СD3+СD45RA-СD62L).

Анализ связи изменений с ОО проводился с использованием метода хи-квадрат. В качестве меры значимости различи...

А.В. Новик, А.Б. Данилова, Т.Л. Нехаева, Н.В. Емельянова, А.И. Семенова, Д.Х. Латипова, Г.М. Телетаева, С.А. Проценко, И.А. Балдуева