Оценка эффективности in vitro компонентов препарата «Депантол» против биопленок, сформированных вагинальными микроорганизмами

Цель: Оценка эффективности in vitro компонентов препарата «Депантол» против биопленок,
сформированных вагинальными микроорганизмами.
Материалы и методы: Исследовано 33 клинических изолята чистых культур микроорганизмов, выделенных из вагинального биотопа и образующих бактериальные пленки: G. vaginalis (2 изолята), E. coli (3 изолята), K. pneumoniae (3 изолята), K. piersonii (1 изолят), C. freundii (3 изолята), A. baumannii (3 изолята), S. agalactiae (3 изолята), E. faecalis (3 изолята), S. aureus (3 изолята), и дрожжеподобных грибов рода Candida (9 изолятов). 
Для исследования использовали плотные и жидкие селективные питательные среды. Идентификацию микроорганизмов проводили методом MALDI-TOF-масс-спектрометрии (Bruker Microflex). Способность к образованию биопленок оценивали по модифицированному протоколу Christensen 
et al. (1985).
Для оценки эффективности действия in vitro компонентов препарата «Депантол» против биопленок использовали разные разведения компонентов препарата (хлоргексидина биглюконат, декспантенол, макроголы).
Результаты: Все 33 клинических изолята образовывали биопленки разной степени плотности. Декспантенол в исследуемых концентрациях и макрогол не оказали влияния на биопленки. Хлоргексидина биглюконат 1% раствор оказывал разрушающее действие на биопленки, сформированные большинством вагинальных бактерий. Это в первую очередь G. vaginalis – оба тестируемых изолята, все E. coli, клинический изолят K. piersonii, все E. faecalis, S. aureus и все изоляты дрожжеподобных грибов рода Candida, как C. albicans, так и C. non-albicans (C. parapsilosis и C. glabrata). Среди трех изолятов K. pneumoniae, C. freundii, A. baumannii, S. agalactiae разрушение биопленок имело место у двух.
Заключение: Среди компонентов препарата «Депантол» эффективность хлоргексидина биглюконата 1% раствора по действию на бактериальные пленки в отношении Gardnerella vaginalis, Escherichia coli, Klebsiella piersonii, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus и дрожжеподобных грибов рода Candida, как C. albicans, так и C. non-albicans (C. parapsilosis и C. glabrata), была 100%. В отношении других микроорганизмов она составила 70%.

Вклад авторов: Савичева А.М. – обзор публикаций по теме статьи, анализ полученных данных, одобрение окончательной версии статьи; Шалепо К.В., Спасибова Е.В. – проведение исследования, написание рукописи; Будиловская О.В., Хуснутдинова Т.А., Крысанова А.А., Чеберя А.С., Чеберя А.Р. – редактирование текста, одобрение окончательной версии статьи.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликтов интересов.
Финансирование: Работа выполнена без спонсорской поддержки. 
Одобрение Этического комитета: Исследование одобрено локальным Этическим комитетом ФГБНУ 
«НИИ АГиР им. Д.О. Отта».
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Шалепо К.В., Спасибова Е.В., Будиловская О.В., Крысанова А.А., Хуснутдинова Т.А., Чеберя А.С., Чеберя А.Р., Савичева А.М. Оценка эффективности in vitro компонентов препарата «Депантол» против биопленок, сформированных вагинальными микроорганизмами. 
Акушерство и гинекология. 2024; 10: 158-166
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2024.256

Возросший интерес исследователей во всем мире к биопленкообразующим микроорганизмам и вызываемым ими осложнениям связан со сложностью терапии и растущей антибиотикорезистентностью. Распространение бактерий с множественной лекарственной устойчивостью сделало биопленочные инфекции серьезной угрозой для госпитализированных пациентов.

Биопленки являются особой формой микробных сообществ, адгезированных на различных абиотических и биотических поверхностях. Они представляют собой ассоциацию микробных клеток и производимого ими органического матрикса (EPS), состоящего из внеклеточной ДНК, белков, липидов, амилоидных фибрилл и полисахаридов, таких как полисахаридный межклеточный адгезин (PIA). Помимо этого, во внеклеточный матрикс интегрированы компоненты макроорганизма – фибрин, иммуноглобулины и тромбоциты [1]. Микробные биопленки могут вызывать патологические процессы у пациентов при использовании медицинских устройств. Инфекции, вызванные штаммами микроорганизмов, способных образовывать биопленки, плохо поддаются лечению антимикробными препаратами (АМП). Кроме того, во многих случаях имеют место рецидивы заболевания, несмотря на защитные иммунные механизмы пациента. Высокоструктурная организация биопленки, необратимая фиксация на биотической или абиотической поверхности и наличие клеток-персистеров («спящих», обладающих низкой ферментативной активностью) способствуют защите микроорганизмов от экстремальных условий, таких как окружающая среда, введение антибиотиков и противогрибковых препаратов, а также ответ иммунной системы хозяина на инфекцию [2, 3]. Высокая устойчивость биопленкообразующих штаммов к АМП и тяжелые инфекции, которые они могут вызывать, определяют важность исследований биопленкообразования [4].

В последние годы исследовательские работы были в основном сосредоточены на инфекциях, связанных с биопленками, и стратегиях борьбы с ними. В нескольких исследованиях изучали корреляцию между патогенностью микроорганизмов и образованием биопленки. Многочисленные факторы вирулентности содействуют образованию биопленки, используя доступные ресурсы хозяина или участвуя в уклонении от врожденного и адаптивного иммунного ответа. Следует отметить, что способность к образованию биопленок связана с наличием у бактерий различных поверхностных cтруктур: пилей и полисахаридных капсул. В настоящее время большое внимание уделяется изучению генов и белков, необходимых для образования биопленок. Эти факторы вирулентности и их активность различаются в зависимости от вида, а также от иммунного ответа макроорганизма, где мононуклеарные клетки секретируют цитокины, которые впоследствии активируют другие иммунные ответы несколькими сигнальными путями. Понимание взаимоотношений между иммунным ответом и факторами вирулентности патогенов, образующих биопленку, важно для будущих исследований и лечения [5]. Около 50% внутрибольничных инфекций связаны с медицинскими устройствами, такими как катетеры, кардиостимуляторы, протезы суставов, зубные протезы, протезы клапанов сердца, имплантированные линзы, шунты спинномозговой жидкости, внутриматочные устройства, грудные имплантаты, стенты желчных путей, сосудистые протезы, вспомогательные устройства левого желудочка (LVAD).

Биопленки также могут образовываться на поверхностях клеток, не связанных с инородными телами: при муковисцидозе, эндокардите нативного клапана, хроническом синусите, хронических диабетических и раневых инфекциях [6].

По составу биопленки можно разделить на моновидовые и поливидовые (полимикробные). В природных условиях моновидовые биопленки встречаются довольно редко. В основном они формируются некоторыми патогенными микроорганизмами в тех органах и тканях макроорганизма, которые в норме являются стерильными. Примером таких биопленок и вызываемых ими поражений может служить образование биопленки P. aeruginosa в легких больных муковисцидозом.

Поливидовые (полимикробные) – это большинство биопленок, образующихся в окружающей среде. Такие биопленки представляют собой сложные сообщества, состоящие из нескольких видов микроорганизмов. В пределах такого сообщества можно обнаружить клетки бактерий, дрожжевых и плесневых грибов, простейших, а также частицы вирусов, в основном бактериофагов [7–9]. В последнее время доказана роль биопленок при бактериальном вагинозе (БВ). БВ – это невоспалительный биопленочный полимикробный синдром, при котором микрофлора влагалища, представленная преимущественно лактобациллами, полностью или частично замещается высокими концентрациями другой, главным образом анаэробной, микрофлоры: Gardnerella vaginalis, Fannyhessea vaginae (Atopobium vaginae), Prevotella spp., Porphyromonas spp., Bacteroides spp., Peptostreptococcus spp., Mobiluncus spp. и другие. Одним из основных критериев диагностики БВ являются так называемые «ключевые клетки» – поверхностные эпителиальные клетки влагалища, покрытые многочисленными грамотрицательными и грамвариабельными бактериями. За счет наличия бактерий при микроскопических исследованиях такие к...

Шалепо К.В., Спасибова Е.В., Будиловская О.В., Крысанова А.А., Хуснутдинова Т.А., Чеберя А.С., Чеберя А.Р., Савичева А.М.