Оценка фармакологической активности препарата на основе соматостатинсодержащего белка на модели циклофосфамид-индуцированной недостаточности яичников у самок мышей

По данным статистических исследований, количество бесплодных пар в мире постоянно растет и составляет приблизительно 15%. На долю женского бесплодия приходится 20–35%. Разрабатываемое новое лекарственное средство на основе соматостатинсодержащего белка предполагается к применению при женском и мужском бесплодии, для повышения репродуктивной способности организма, увеличения овариального резерва и вступления их в фазу роста, ускорения начала роста покоящихся фолликулов, увеличения объема эякулята и повышения качественных характеристик спермы.
Цель: Оценка фармакологической активности препарата на основе соматостатинсодержащего белка на модели циклофосфамид-индуцированной недостаточности яичников у самок мышей.
Материалы и методы: В качестве индуктора патологии использовали препарат «Эндоксан» однократно внутрибрюшинно в дозе 70 мг/кг. Для проведения исследования были сформированы 6 групп: 1-я – интактная (n=15); 2-я – негативный контроль (патология+раствор натрия хлорида 0,9%, n=10); 3-я – позитивный контроль (патология+рекомбинантный мышиный соматотропный гормон в дозе 800 мкг/кг, n=10); 4-я – патология+тестируемый объект в дозе 10 мкг/кг (n=15); 5-я – патология+тестируемый объект в дозе 50 мкг/кг (n=15), 6-я – патология+тестируемый объект в дозе 250 мкг/кг (n=15).
В рамках исследования проводили оценку микроскопических изменений в тканях яичников, массовых коэффициентов яичников, морфометрический анализ фолликулов, а также уровней PGE2 и соматотропина в плазме крови.
Результаты: Установлено, что на фоне индуцированной патологии тестируемый препарат в диапазоне доз 10–250 мкг/кг приводит к дозозависимому увеличению уровня соматотропина и PGE2, нормализации процесса фолликулогенеза. Выявлено, что под влиянием исследуемого препарата происходит значительное увеличение доли примордиальных и третичных фолликулов и снижение доли атретических фолликулов, что позволяет предположить возможный механизм действия тестируемого объекта, а именно синтез специфических аутоантител к соматостатину и снижение его концентрации, что, в свою очередь, приводит к увеличению содержания в организме эндогенного соматотропного и половых гормонов.
Заключение: Полученные результаты согласуются с данными ранее проведенных работ об увеличении размеров и количества фолликулов при введении животным экзогенного соматотропного гормона. По нашему мнению, необходимы клинические исследования возможности применения препарата на основе соматостатинсодержащего белка для лечения женского бесплодия, связанного с нарушениями процесса фолликулогенеза.

Вклад авторов: Матичин А.А. – написание и редактирование текста статьи, анализ данных; Крышень К.Л. – концепция и дизайн исследования; Фаустова Н.М., Гущин Я.А. – сбор и анализ данных; Макарова М.Н. – редактирование рукописи, критический анализ; Решетник В.В., Сухих Г.Т., Юдин С.М., Лунин В.Г. – редактирование рукописи, утверждение рукописи статьи.
Конфликт интересов: Соавтор публикации В.В. Решетник является директором компании ООО «Юрсфарм», финансирующей данное исследование в рамках договорной работы.
Финансирование: Работа выполнена в рамках договорных обязательств между АО «НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ» и
ООО «Юрсфарм».
Одобрение Этического комитета: Исследование было одобрено на заседании биоэтической комиссии АО «НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ» (№БЭК 2.29/19 от 15 мая 2019 г.).
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Матичин А.А., Крышень К.Л., Фаустова Н.М., Гущин Я.А.,
Макарова М.Н., Решетник В.В., Сухих Г.Т., Юдин С.М., Лунин В.Г.
Оценка фармакологической активности препарата на основе соматостатинсодержащего белка на модели циклофосфамид-индуцированной недостаточности яичников у самок мышей.
Акушерство и гинекология. 2023; 7: 119-125
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2023.150

По данным статистических исследований, приблизительно 15% супружеских пар страдают бесплодием. Бесплодие обычно определяется как отсутствие зачатия после одного года регулярной половой жизни. На долю женского бесплодия приходится 20–35%. Одной из самых распространенных причин женского бесплодия является нарушение овуляции [1–3].

Одним из методов лечения бесплодных пар является экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО) [1–3]. ЭКО предполагает использование гормонов для стимуляции функции яичников с целью увеличения роста фолликулов и, таким образом, развития более одного ооцита. Однако в клинической практике часто регистрируют отсутствие результата при проведении ЭКО у больных с бедным ответом яичников. Основная часть больных, демонстрирующих бедный ответ на овариальную стимуляцию в циклах ЭКО, – это женщины со сниженным овариальным резервом. В литературных источниках имеются данные о том, что при бедном ответе яичников на овариальную стимуляцию использование гормона роста (соматотропного гормона (СТГ), соматотропина) способно увеличить успех программы ЭКО [4].

Согласно литературным данным, применение СТГ улучшает качество ооцитов и, следовательно, эмбрионов [5]. Также было показано, что введение гормона роста стимулирует рост и развитие фолликулов [6–9], а также повышает ответ яичников на овариальную стимуляцию гонадотропинами [8, 9]. Таким образом, использование соматотропина может значительно улучшить результаты ЭКО, особенно у женщин со слабым ответом на общепринятую гормональную терапию.

Немаловажную роль в процессе фолликулогенеза играет простагландин Е2 (PGE2). PGE2 является одним из медиаторов, способствующих росту и созреванию фолликулярного эпителия, питающего ооцит. Согласно литературным данным, ингибирование продукции PGE2 в фолликулах или генетический нокаут продукции PGE2 и его рецепторов может препятствовать овуляции. Было показано, что увеличение уровня лютеинизирующего гормона увеличивает уровень PGE2 в доминантном фолликуле, что приводит к росту клеток фолликулярного эпителия и экспрессии протеаз, связанных с разрывом фолликула. В эксперименте на мышах с дефицитом рецептора PGE2 наблюдались аномальное деление клеток фолликулярного эпителия и отсутствие овуляции, что приводило к бесплодию [10].

Механизмом действия нового разрабатываемого лекарственного средства являются индукция синтеза специфических аутоантител к соматостатину (анти-СОМ-IgG), снижение его концентрации и, как следствие, увеличение содержания в организме эндогенного соматотропина [11].

Целью данной работы являлась оценка фармакологической активности препарата на основе соматостатинсодержащего белка на модели циклофосфамид-индуцированной недостаточности яичников у самок мышей.

Материалы и методы

Тестируемый объект – новое лекарственное средство на основе соматостатинсодержащего белка (ООО «Юрсфарм», Россия). Действующим веществом является рекомбинантный белок, содержащий соматостатин (СОМ), состоящий из белка-носителя – глюкансвязывающего домена (ГСД), спейсерной последовательности (-) и двух копий антигенной детерминанты соматостатина (ГСД-СОМ-СОМ) с молекулярной массой 39 кДа [11].

В эксперименте использовали аутбредных самок мышей ICR (CD-1) в возрасте 8–10 недель, массой 17–24 г, полученных из питомника АО «НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ» (Ленинградская обл., Россия). Животных содержали в стандартных условиях в соответствии с Директивой 2010/63/EU от 22 сентября 2010 г. по охране животных, используемых в научных целях. В качестве корма использовали «Корм для содержания лабораторных животных» ПК-120-1, приготовленный по ГОСТ 34566-2019. Исследование было одобрено на заседании биоэтической комиссии АО «НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ» (№БЭК 2.29/19 от 15 мая 2019 г.). Исследование соответствовало принципам «трех R» (Reduction, Refinement, Replacement) [12].

...

Матичин А.А., Крышень К.Л., Фаустова Н.М., Гущин Я.А., Макарова М.Н., Решетник В.В., Сухих Г.Т., Юдин С.М., Лунин В.Г.