Оценка количественного и качественного определения ДНК вируса папилломы человека у женщин с поражениями шейки матки

Цель: Изучение связи между количественным определением вирусной нагрузки вируса папилломы человека (ВПЧ) и степенью поражения шейки матки.
Материалы и методы: Проанализированы данные 819 ВПЧ-позитивных женщин в возрасте от 18 лет до 81 года. Пациентки были разделены на 3 группы в зависимости от гистологической верификации диагноза: 1-я группа – 186 пациенток с хроническим цервицитом; 2-я группа – 341 пациентка с LSIL; 3-я группа – 292 пациентки с HSIL. Тестирование на ДНК ВПЧ низкого (ВПЧ 6, 11, 44 типов) и высокого (ВПЧ 16, 18, 26, 31,33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82 типов) канцерогенного риска выполнялось с определением количества геномных эквивалентов вируса методом ПЦР в режиме реального времени на наборе реагентов «HPV Квант-21». 
Результаты: Было установлено, что при определении высокой вирусной нагрузки, вне зависимости от выявленного генотипа ВПЧ, риск обнаружения HSIL статистически значимо выше, по сравнению с LSIL (ОШ=5,26; 95% ДИ 3,19–8,64); при определении умеренной вирусной нагрузки наблюдается та же закономерность (ОШ=2,32; 95% ДИ 1,78–3,03). При этом при низкой вирусной нагрузке статистически значимо чаще будет встречаться LSIL по сравнению с HSIL (ОШ=3,09; 95% ДИ 1,91–4,99). Кроме того, для 16, 18, 31, 39 и 44 генотипов ВПЧ была выявлена статистически значимая положительная сила взаимосвязи между уровнем вирусной нагрузки и степенью поражения шейки матки.
Заключение: Вирусная нагрузка ВПЧ является важным диагностическим маркером, ценность которого в настоящее время существенно недооценена в силу проблем интерпретации результатов количественного определения ДНК ВПЧ и сложности проведения исследований в этом направлении. 

Вклад авторов: Андреев А.О., Байрамова Г.Р. – концепция и дизайн исследования; Байрамова Г.Р., 
Трегубова А.В. – сбор и обработка материала; Ильясова Н.А. – статистическая обработка данных; Андреев А.О., Байрамова Г.Р., Бадлаева А.С. – написание текста статьи; Байрамова Г.Р., Трофимов Д.Ю. – редактирование текста.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликтов интересов.
Финансирование: Статья подготовлена без спонсорской поддержки.
Одобрение Этического комитета: Исследование было одобрено локальным Этическим комитетом ФГБУ «НМИЦ АГП 
им. В.И. Кулакова» МЗ РФ.
Согласие пациентов на публикацию: Пациенты подписали информированное согласие на публикацию своих данных.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Байрамова Г.Р., Андреев А.О., Ильясова Н.А., Бадлаева А.С., Трегубова А.В., Трофимов Д.Ю. Оценка количественного и качественного определения ДНК вируса папилломы человека у женщин с поражениями шейки матки.
Акушерство и гинекология. 2024; 1: 102-109
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2023.260

Рак шейки матки (РШМ) является третьим наиболее распространенным злокачественным заболеванием в структуре гинекологической онкопатологии [1, 2]. Несмотря на действующую во многих странах национальную программу скрининга на РШМ, Всемирная организация здравоохранения ежегодно отмечает рост заболеваемости и смертности в результате злокачественных новообразований шейки матки [3, 4]. Как известно, вирус папилломы человека (ВПЧ) является главным этиологическим фактором развития РШМ и поражений шейки матки, предшествующих РШМ. В настоящее время в ряде стран, принявших тестирование на ВПЧ в качестве первичного скрининга на РШМ, наблюдается снижение заболеваемости РШМ [5–8]. Например, результаты расчета математических моделей демонстрируют, что в Австралии, внедрившей программу скрининга и вакцинации против ВПЧ еще в 2007 г., уровня заболеваемости РШМ, необходимого для прогнозирования его полной элиминации, достигнут уже к 2028 г. В то время как страны, которые не ввели на национальном уровне концепцию скрининга, не смогут достичь аналогичного снижения заболеваемости РШМ до конца XXI в. [9].

Роль ВПЧ в развитии патологии шейки матки известна с 1990-х гг. ХХ в., когда на примере исследований по определению предикторов развития РШМ ВПЧ определялся как сильный независимый фактор возникновения РШМ [10, 11]. За последние десятилетия сформировалось более глубокое понимание проблемы ВПЧ как комплекса комбинированных показателей, таких как детекция определенных генотипов ВПЧ, выявляемость одного или нескольких генотипов, расчет вирусной нагрузки, длительности персистенции ВПЧ, географические особенности распределения генотипов в структуре представленности патологии шейки матки [12, 13]. Однако в настоящее время роль вирусной нагрузки ВПЧ остается одним из наиболее дискуссионных вопросов в развитии и прогрессии патологии шейки матки. В связи с этим многие тест-системы, определяющие наличие ДНК ВПЧ, не учитывают фактор его количественного присутствия, что в известной мере может ограничивать диагностическую и прогностическую эффективность тестирования на ВПЧ. Многие исследователи отмечали отсутствие статистической значимости при сравнении вирусной нагрузки ВПЧ между группами цервикальной интраэпителиальной неоплазии (CIN) I, CIN II, CIN III и РШМ [14–18]. Тем не менее, по данным других авторов, количественное определение присутствия ВПЧ может служить маркером последующей прогрессии плоскоклеточных интраэпителиальных поражений [19–21].

Целью данного исследования является определение связи между количественным параметром вирусной нагрузки ВПЧ и гистологически верифицированной степенью поражения шейки матки.

Материалы и методы

Нами проанализированы данные 819 ВПЧ-позитивных женщин в возрасте от 18 лет до 81 года с гистологически верифицированным диагнозом. Выборка пациенток описана нами в опубликованной ранее статье [22]. Тестирование на ДНК ВПЧ выполнялось с определением количества геномных эквивалентов вируса методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени на наборе реагентов «HPV Квант-21», предназначенном для выявления, типирования и количественного определения ДНК ВПЧ низкого (ВПЧ 6, 11, 44 типов) и высокого (ВПЧ 16, 18, 26, 31,33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82 типов) канцерогенного риска. Предел обнаружения для генотипов ВПЧ составляет 5 копий ДНК на амплификационную пробирку (103 копий/мл препарата ДНК). Предел обнаружения установлен путем анализа серийных разведений лабораторных контрольных образцов. Наличие в исследуемом образце ДНК ВПЧ указывалось как абсолютное количество (степень десятичного логарифма концентрации соответствует количеству копий ДНК ВПЧ на образец) данного типа вируса в образце. Ранжирование вирусной нагрузки ВПЧ представлено следующим образом: низкая вирусная нагрузка – менее 3 lоg, умеренная вирусная нагрузка – от 3 до 5 lоg, высокая вирусная нагрузка – более 5 lоg.

Гистологическая верификация диагноза проводилась на образцах шейки матки, полученных при проведении прицельной биопсии, петлевой электроэксцизии или конизации шейки матки. В исследование включены данные 819 протоколов гистологического заключения, на основании которых пациентки были раздел...

Байрамова Г.Р., Андреев А.О., Ильясова Н.А., Бадлаева А.С., Трегубова А.В., Трофимов Д.Ю.