Оценка микробиоты соскоба уретры у мужчин с инфекциями, передаваемыми половым путем

Цель исследования: провести сравнительное изучение состава микробиоты уретры мужчин с инфекциями, передаваемыми половым путем (ИППП), и здоровых мужчин. Материалы и методы. В исследование вошли 103 мужчины в возрасте от 18 до 45 лет: 42 мужчины с уретритами, вызванными возбудителями ИППП, и 61 клинически здоровый мужчина. Идентификацию патогенных и условно-патогенных микроорганизмов в соскобах из уретры проводили методом ПЦР в режиме реального времени с помощью тест-системы Андрофлор® (ДНК-Технология, Москва). Результаты. При анализе показателей общей бактериальной массы установлено, что бактериальная обсемененность уретрального биотопа у пациентов с ИППП была существенно выше, чем в группе здоровых мужчин (5,8 и 4,7 Lg10 соответственно), при этом самый высокий уровень бактериальной обсемененности был выявлен у пациентов, инфицированных N. gonorrhoeae (6,4 Lg10). У пациентов с ИППП определялся значимо более низкий уровень относительного количества Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Corynebacterium spp. и их суммы в целом по сравнению с клинически здоровыми мужчинами: по данным ROC-анализа, наилучшим диагностическим показателем (0,93±0,04, p<0,001), отличающим группу здоровых лиц от пациентов с ИППП, оказалась сумма Staphylococcus spp., Streptococcus spp. и Corynebacterium spp. («Сумма Нормофлора»). У пациентов, инфицированных C. trachomatis, по сравнению с клинически здоровыми мужчинами были значимо выше показатели относительного числа Bacteroides spp./Porphyromonas spp./Prevotella spp.; Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp.; у пациентов, инфицированных N. gonorrhoeae, – Anaerococcus spp., а у пациентов, инфицированных M. genitalium, – Megasphaera spp./Veillonella spp./Dialister spp., Anaerococcus spp., Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp. и Eubacterium spp. Заключение. Установлено увеличение общей бактериальной обсемененности уретры при ИППП, наиболее выраженное при инфицировании N. gonorrhoeae. Наилучшим диагностическим показателем, отличающим таковые нормальной микробиоты от микробиоты пациентов с ИППП, считается сумма Staphylococcus spp., Streptococcus spp. и Corynebacterium spp. У пациентов с клиническими признаками воспалительной реакции и наличием ИППП установлено снижение нормофлоры при всех видах ИППП и увеличение числа облигатных анаэробных бактерий – Megasphaera spp./Veillonella spp./Dialister spp., Bacteroides spp./Porphyromonas spp./Prevotella spp.; Anaerococcus spp., Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp. и Eubacterium spp.

Введение. Инфекционно-воспалительные заболевания мочеполовой системы являются одной из причин нарушения репродуктивной функции и снижения качества жизни пациентов. Повреждение тканей на фоне инфекционного процесса может происходить как в результате прямого воздействия микроорганизмов, так и опосредованным путем вследствие воспалительной реакции в ответ на инфицирование патогенными микроорганизмами или на массивную колонизацию эндогенными условно-патогенными микроорганизмами.

Одним из наиболее распространенных заболеваний мочеполового тракта у мужчин является уретрит. Несмотря на то что известны и неинфекционные причины возникновения уретрита, большинство случаев данной патологии имеет инфекционную природу, при этом частыми этиологическими агентами заболевания группы возбудителей инфекций, передаваемых половым путем (ИППП), являются Neisseria gonorrhoeae и Chlamydia trachomatis. Развитие нехламидийных негонококковых уретритов может быть также обусловлено Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum, Trichomonas vaginalis, реже – вирусами простого герпеса или аденовирусами [1–3]. В отсутствие возбудителей ИППП наиболее вероятной этиологической причиной уретритов у мужчин являются микроорганизмы, вызывающие заболевания репродуктивного тракта у женщин, а также представители анаэробной микрофлоры [3–6].

До недавнего времени гипотезы о возможных инфекционных возбудителях заболеваний мочеполовой системы могли быть подтверждены только результатами культуральных исследований, что ограничивало идентификацию значительного числа микроорганизмов. Однако в последние годы в результате активного внедрения в практическую медицину молекулярно-биологических методов исследования спектр микроорганизмов – потенциальных этиологически значимых участников патологических процессов в урогенитальном тракте был значительно расширен благодаря идентификации труднокультивируемых или неподдающихся культивированию микроорганизмов [7, 8].

Попытки изучения состава микрофлоры мужской уретры у пациентов с ИППП и поиск доказательств гипотезы о зависимости восприимчивости к инфекциям от состава биоты мужской уретры предпринимались ранее с помощью бактериологических методов. Однако результаты данных исследований часто являлись противоречивыми. Так, при культивировании микроорганизмов из уретральных соскобов, полученных от здоровых мужчин и мужчин с хламидийным и нехламидийным негонококковым уретритом, были выделены разные популяции бактерий [9].

Применение высокотехнологичного метода масс-спектрометрии позволило расширить представления о видовой идентификации условно-патогенных микроорганизмов и увеличить спектр ее выявления на 43,5%. При исследовании микробного спектра урогенитального тракта больных уретритом методом масс-спектрометрии было установлено, что наиболее часто из условно-патогенных микроорганизмов выделялись грамположительные, факультативно-анаэробные микроорганизмы рода Staphylococcus (74,4%), Streptococcus (52,7%), Enterococcus (15,7%), микроорганизмы семейства Enterobacteriaceae (11,5%) в умеренных и высоких диагностических титрах. При этом спектр идентифицируемых видов Streptococcus, Staphylococcus, Corynebacterium, неферментирующих грамотрицательных палочек с применением высокотехнологичного метода MALDI TOF MS был увеличен в 2,2 раза по сравнению с классическим бактериологическим исследованием [10].

В последние годы идет активное развитие некультуральных молекулярно-биологических методов, основанных на анализе нуклеиновых кислот микроорганизмов, что позволяет получать новые данные о составе микрофлоры половых путей при различной патологии. Так, в работе [4] исследование 16S rРНК микроорганизмов позволило выявить существенные различия микробных сообществ у мужчин с уретритом по сравнению со здоровыми мужчинами.

Одной из современных технологий идентификации микроорганизмов является полимеразная цепная реакция с регистрацией результатов в режиме реального времени (ПЦР-РВ) – метод, обеспечивающий возможность количественной оценки любого необходимого спектра инфекционных агентов в биологической пробе. Комбинация высокой чувствительности и специфичности, низкий риск контаминации, скорость получения результата исследования (1–1,5 ч), возможность количественного анализа и идентификации некультивируемых микроорганизмов делают технологию ПЦР-РВ высоковостребованной для диагностики урогенитальных инфекций.

...

М.Р. Рахматулина, М.Н. Болдырева, Е.В. Липова, А.С. Чекмарев, И.С. Галкина