Оценка паттерна экспрессии тканевых и экзосомальных микроРНК матери и плода при преиндукции родов (пилотное исследование)

Неоспоримым фактом снижения акушерских и неонатальных осложнений при мероприятиях, направленных на досрочное родоразрешение, является успешная подготовка женского организма к родам, осуществляемая за счет различных механизмов инициации родовой деятельности. В основе данных механизмов, объединяющих воспалительную реакцию в миометрии, передачу сигналов от плода и физиологическое старение плодных оболочек, лежат процессы и сигнальные пути, скоординированная регуляция которых осуществляется посредством микроРНК (мкРНК, miR).
Цель: Оценка экспрессии тканевых и экзосомальных мкРНК матери и плода в качестве сигнальных молекул инициации родовой деятельности при подготовке шейки матки к родам. 
Материалы и методы: Пилотное исследование, включающее в себя оценку экспрессии тканевых и экзосомальных мкРНК матери и плода с использованием количественной ПЦР с обратной транскрипцией в реальном времени у 22 беременных женщин, разделенных на 2 когорты: «роды без преиндукции» (когорта I, n=10) и «преиндукция родов» (когорта II, n=12). Когорта I была разделена на группы беременных со спонтанными родами (группа Ia, n=5) и беременных, которым проводили плановое кесарево сечение до начала родовой деятельности (группа Ib, n=5). В когорту II вошли беременные с положительным эффектом от преиндукции родов (группа IIa, n=5) и беременные, у которых эффект не был достигнут (группа IIb, n=7).
Результаты: Нами выявлено, что исходный уровень (до начала преиндукции родов) экзосомальной miR-181a-5р в плазме крови значимо отличался (р=0,03) у беременных с хорошим ответом (созревание шейки матки и начало родовой деятельности) и пациенток с отсутствием ответа. Уровень экзосомальной miR-92a-3p в пуповинной крови выше, чем в крови матери до преиндукции (р=0,009). Экспрессия miR-454-3p и miR-548g-5p обнаружена только в образцах пуповинной крови, что может свидетельствовать об их плодовом происхождении. При попарном сравнении между группами выявлен значимо более высокий уровень экспрессии let-7b-5p в плодных оболочках в группе успешной преиндукции относительно группы планового кесарева сечения (р=0,02) и группы отсутствия эффекта от преиндукции родов (р=0,01). При этом в миометрии экспрессия let-7b-5p также значимо выше в группе успешной преиндукции по сравнению с группой планового кесарева сечения (р=0,05).
Заключение: Выявленные отличия экспрессии тканевых и экзосомальных мкРНК могут быть обусловлены их высокоскоординированной регуляцией различных сигнальных путей и соответствующих генов-мишеней, вовлеченных в механизм коммуникации компартментов матери и плода, что является основанием для продолжения исследований на расширенных когортах беременных. 

Вклад авторов: Баев О.Р., Гусар В.А., Гайдарова А.Р. – концепция и дизайн исследования; Гусар В.А., Гайдарова А.Р., Эдильберг И.В. – сбор и обработка материалов, Чаговец В.В., Гайдарова А.Р. – статистическая обработка данных; Гусар В.А., Гайдарова А.Р. – написание текста; Гусар В.А., Кан Н.Е., Баев О.Р. – редактирование.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликтов интересов.
Финансирование: Исследование выполнено без спонсорской поддержки.
Одобрение Этического комитета: Исследование одобрено локальным Этическим комитетом ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России.
Согласие пациентов на публикацию: Пациенты подписали информированное согласие на публикацию своих данных.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Гайдарова А.Р., Гусар В.А., Чаговец В.В., Эдильберг И.В., Кан Н.Е., Баев О.Р. Оценка паттерна экспрессии тканевых и экзосомальных микроРНК матери и плода при преиндукции родов (пилотное исследование).
Акушерство и гинекология. 2024; 2: 62-71
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2024.7

Известно, что в последнее время частота преиндукции/индукции родов в мире имеет тенденцию к увеличению [1–3]. Однако, несмотря на широкую распространенность данной процедуры, все еще остается большое количество вопросов, по которым нет согласия в научной литературе.

Неоспоримым фактом снижения акушерских и неонатальных осложнений является успешная подготовка женского организма к родам, осуществляемая за счет различных механизмов инициации родовой деятельности. В основе этих механизмов, объединяющих воспалительную реакцию в миометрии, передачу сигналов от плода и физиологическое старение плодных оболочек, лежат процессы и сигнальные пути, скоординированная регуляция которых осуществляется посредством микроРНК (мкРНК, miR).

МкРНК являются малыми эндогенными некодирующими молекулами длиной примерно 18–22 нуклеотида, регулирующие экспрессию генов на посттранскрипционном уровне [4, 5], а способность секретироваться в составе внеклеточных микровезикул, апоптотических телец и экзосом позволяет им выступать в роли медиаторов межклеточных взаимодействий [6–9]. Ранее было показано изменение экспрессии во время инициации родовой деятельности в миометрии у членов семейства miR-200 (miR-200b/200a/429, miR-141/200c) [7], miR-199a-3p/miR-214 [7, 9, 10], miR-181 (miR-181a, miR-181b, miR-181c и miR-181d), играющих важную роль в регуляции воспалительных реакций в различных типах клеток [11, 12], а также miR-144 [13]. В ряде работ представлена роль miR-143 [14], miR-34b/с и miR-33 в качестве потенциальных участников в гормональном контроле, регуляции покоя и сократимости миометрия во время беременности и родов [15]. Однако мы не встретили в литературе данных по исследованию экспрессии мкРНК при преиндукции родов.

Принимая во внимание вышеизложенное, с использованием базы данных miRTarBase 9.0 мы осуществили поиск и последующий выбор мкРНК, вовлеченных в механизмы инициации родовой деятельности и регуляцию экспрессии ряда ключевых генов, в частности транскрипционного фактора NFKB1, белка сурфактанта легких SFTPA1, простагландинсинтазы (циклооксигеназы) PTGS2, прогестеронового рецептора PGR, с целью оценки экспрессии выбранных мкРНК у матери и плода в качестве циркулирующих и тканевых сигнальных молекул инициации родов при подготовке шейки матки к родам (преиндукции родов).

Материалы и методы

Формирование клинических групп пациентов

Проведено пилотное проспективное исследование с участием 22 беременных женщин, находящихся под наблюдением в ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России.

В качестве критериев включения для основной и контрольной групп рассматривали следующие: возраст женщин от 18 до 45 лет, одноплодная беременность, головное предлежание, доношенный срок беременности, «незрелые» родовые пути, преиндукция родов, спонтанное начало родовой деятельности (физиологическая готовность к родам), показания к кесареву сечению в плановом порядке (отсутствие готовности к родам). В исследование не были включены женщины с многоплодной беременностью, наличием тяжелых экстрагенитальных заболеваний, осложнениями беременности (пре­эклампсия, HELLP-синдром, антифосфолипидный синдром), пороками развития плода.

Выборка беременных женщин, включенных в исследование, была разделена на 2 когорты: «роды без преиндукции» (когорта I, n=10) и «преиндукция родов» (когорта II, n=12). Когорта I была разделена на группы: беременные со спонтанными родами (группа Ia, n=5) и беременные, которым проводили плановое кесарево сечение до начала родовой деятельности (группа Ib, n=5). В когорту II вошли беременные с положительным эффектом от преиндукции (группа IIa, n=5) и беременные с отсутствием такового (группа IIb, n=7) (рис. 1).

Пациенткам когорты II преиндукцию и последующую индукцию родов проводили согласно клиническим рекомендациям «Неудачная попытка стимуляции родов (подготовка шейки матки к родам и родовозбуждение)» 2021 г. [3].

Подготовку родовых путей к родам начинали при «незрелой» шейке матки (от 0 до 5 баллов по шкале Бишоп); родовозбуждение проводили при достижении «зрелых» родовых путей (от 8 баллов по шкале Бишоп и выше).

С целью преиндукции использовали прием одной таблетки мифепристона 200 мг. В случае «ответа» на преиндукцию в виде достижения степени зрелости родовых путей 8 баллов и выше по шкале Бишоп либо появления регулярной родовой деятельности в течение 24 ч данную категорию женщин относили к Ia группе; при отсутствии данного эффекта – к группе IIb.

Проведение исследования одобрено Этическим комитетом ФГБУ «НМИЦ акушерства, гинекологии и перинатологии». У всех пациенток было получено информированное добровольное согласие в письменном виде.

Получение экзосом из пла...

Гайдарова А.Р., Гусар В.А., Чаговец В.В., Эдильберг И.В., Кан Н.Е., Баев О.Р.