Оценка состава и стабильности микробиоты влагалища у беременных в процессе динамического наблюдения

DOI: https://dx.doi.org/10.18565/aig.2019.7.30-38

02.08.2019
14

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва

Цель исследования. Изучить особенности микробиоты влагалища и ее стабильность у женщин в процессе динамического наблюдения в течение беременности.
Материалы и методы. Обследованы 26 женщин в возрасте от 18 до 40 лет на протяжении беременности (в I–III триместрах). Критерии включения: первобеременные женщины в возрасте от 18 до 40 лет с одноплодной беременностью. Критерии исключения: врожденные пороки развития у плода, отягощенная соматическая патология у беременных. Проведено комплексное микробиологическое исследование вагинальной микробиоты.
Результаты. Вагинальные микробные сообщества (community state type, CST) были подразделены на следующие типы: CSTI – L. crispatus; CSTII – L. gasseri; CSTIII – L. iners; CSTIV – L. jensenii; CSTV – доминирование условно-патогенных микроорганизмов. По результатам исследования лидирующими были: CSTII (23,1–42,3%), CSTI (26,9–38,5%) и CSTIV (23,1%), тогда как CSTIII составило 7,7%. У подавляющего большинства (96,2%) беременных видовой состав микроорганизмов оставался относительно постоянным, и только у одной (3,8%) беременной он претерпевал значительные изменения. Анализ исходов беременности показал, что у 20 (76,9%) женщин беременность завершилась в срок рождением живых здоровых детей, у 6 (23,1%) диагностирован преждевременный разрыв плодных оболочек на сроках беременности 27–35 недель. У женщин с преждевременным разрывом плодных оболочек отмечены выраженные дисбиотические изменения вагинальной микрофлоры.
Заключение. Выполнение комплексного микробиологического исследования позволило получить новые сведения о составе микробиоты влагалища у беременных и оценить изменения микробного сообщества, которые могут повлиять на исход беременности. Своевременная коррекция микроэкологических нарушений вагинального биотопа позволит предотвратить развитие инфекционных осложнений во время беременности и в послеродовом периоде. Оценка влагалищной микробиоты при беременности может иметь прогностическую, диагностическую и терапевтическую ценность.

Согласно данным литературы, имеется взаимосвязь состояния вагинальной микробиоты и осложнений беременности [1–3]. Микрофлора влагалища характеризуется разнообразием видового состава и разделяется на облигатную и транзиторную. Колонизационная резистентность вагинального биотопа обеспечивается лактобациллами – резидентной составляющей вагинальной микрофлоры. Транзиторный компонент микрофлоры представлен условно-патогенными микроорганизмами (УПМ), которые в силу конкурентного сдерживания колонизируют влагалище в низких титрах. Под влиянием эндогенных и экзогенных воздействий на организм женщины может происходить нарушение состояния гармоничного равновесия между лактобациллами и УПМ, что приводит к дисбалансу микрофлоры и развитию инфекционного процесса [4, 5]. В литературе сообщается о роли дисбиотических нарушений микробиоценоза влагалища в развитии инфекционных осложнений беременности, родов и послеродового периода [6], их возможной связи с определенными видами лактобацилл и нестабильностью вагинальной микробиоты. Имеются сообщения о том, что состав влагалищной микрофлоры изменяется в зависимости от гестационного срока, а доминирующими в норме являются лактобациллы четырех видов: L. crispatus, L. jensenii, L. gasseri и L. iners [7].

Цель настоящего исследования: изучить особенности микробиоты влагалища и ее стабильность у женщин в процессе динамического наблюдения в течение беременности.

Материалы и методы

Обследованы 26 женщин в возрасте от 18 до 40 лет на протяжении беременности (в I–III триместрах). Критерии включения: первобеременные женщины в возрасте от 18 до 40 лет с одноплодной беременностью. Критерии исключения: врожденные пороки развития у плода, отягощенная соматическая патология у беременных.

Комплексное микробиологическое исследование включало оценку микробиоценоза влагалища по данным микроскопии мазка вагинального отделяемого, окрашенного по Граму, и культурального исследования в соответствии с медицинской технологией «Интегральная оценка состояния микробиоты влагалища. Диагностика оппортунистических вагинитов». Вагинальное отделяемое засевали на стандартные питательные среды. Для выделения факультативно-анаэробных микроорганизмов использовали: колумбийский агар, маннит-солевой агар (Сonda, Испания), среду Эндо и агар Сабуро (ФГУН «ГИЦПМ и Б», Оболенск, Россия). Лактобациллы культивировали на среде лактобакагар (ФГУН «ГИЦПМ и Б», Оболенск, Россия), строгие анаэробы – на прередуцированном агаре Schaedler (Сonda, Испания) с необходимыми добавками. Инкубировали посевы в условиях СО2-инкубатора (Jouan, Франция). Строгие анаэробы и лактобациллы культивировали в анаэробном боксе (Jouan, Франция) в атмосфере трехкомпонентной газовой смеси (N2 – 80%; CO2 – 10%; Н2 – 10%). Видовую идентификацию микроорганизмов проводили методом MALDI TOF MS с использованием времяпролетного масс-спектрометра AutoFlex III c программным обеспечением MaldiBioTyper (BrukerDaltoniks, Германия), который ранее помог идентифицировать 101 выделенный штамм лактобацилл до вида, из которых 76,3% культур были определены в высоком титре (lg score – 1,9–>2) и 23,7% в низком(lg score

Статистический анализ. При статистической обработке полученных результатов для оценки значимости различий по частоте встречаемости состояний микробиоты (нормоценоза и нарушения микроценоза) между триместрами использовали метод χ2. Анализ динамики видовой представленности микробиоты проводился с учетом частоты изменения состава по триместрам. Оценивалась доля видов, не меняющихся по представленности от триместра к триместру, для каждой пациентки. Для изучения зависимости количества видов, по-разному изменяющих свою степень обсемененности, от перехода между триместрами проводился расчет точного критерия Фишера для каждой пациентки: проводилось сравнение частоты повышения концентрации видов и понижения (повышение или понижение: бинарный признак) при переходе между триместрами I–II (1-я группа) и между триместрами II–III (2-я группа). Такой расчет проводился для каждой беременной, участвовавшей в исследовании, то есть 26 раз.

Для всех видов анализа статистически значимыми считали значения р

Для описания данных в статье использовали следующие форматы:

  • качественные показатели, представленные в абсолютных (n) и (%) относительных величинах в формате описательной статистики n (%):
  • частота выявления различных состояний микробиоты у беременных в процессе дина­мического наблюдения по триместрам;
  • частота выявления вагинальных микробных сообществ с разной степенью обсемененности по триместрам;
  • частота выявления беременных с относительно стабильным или вариабельным видовым составом микробиоты между триместрами;
  • количественные показатели, имеющие отличное от нормального распреде...

Список литературы

  1. Ryckman K.K., Simhan H.N., Krohn M.A., Williams S.M. Predicting risk of bacterial vaginosis: the role of race, smoking and corticotropin-releasing hormone-related genes. Mol. Hum. Reprod. 2009; 15(2): 131-7.
  2. Sobel J.D. Bacterial vaginosis. Annu. Rev. Med. 2000; 51: 349-56.
  3. Brotman R.M. Vaginal microbiome and sexually transmitted infections: an epidemiologic perspective. J. Clin. Invest. 2011; 121(12): 4610-7.
  4. Gajer P., Brotman R., Bai G., Sakamoto J., Schuette U., Zhong X. et al. Temporal dynamics of the human vaginal microbiota. Sci. Transl. Med. 2012; 4(132): 132-52.
  5. Yildirim S., Yeoman C., Janga S., Thomas S., Ho M., Leigh S. et al. Primate vaginal microbiomes exhibit species specificity without universal Lactobacillus dominance. ISME J. 2014; 8(12): 2431-44.
  6. Macintyre D., Chandiramani M., Lee Y., Kindinger L., Smith A., Angelopoulos N. et al. The vaginal microbiome during pregnancy and the postpartum period in a European population. Sci. Rep. 2015; 5: 8988.
  7. Romero R., Hassan S.S., Gajer P., Tarca A.L., Fadrosh D.W., Bieda J. et al. The vaginal microbiota of pregnant women who subsequently have spontaneous preterm labor and delivery and those with a normal delivery at term. Microbiome. 2014; 2: 18.
  8. Савченко Т.Н., Макаров О.В., Алешкин В.А., Афанасьев С.С., Воропаева Е.А., Мельников А.Н., Стрыгина В.А. Нарушение микробиоценоза влагалища как фактор невынашивания беременности. Лечение и профилактика. 2012; 1: 30-43.
  9. Romero R., Hassan S.S., Gajer P., Tarca A.L., Fadrosh D.W., Nikita L. et al. The composition and stability of the vaginal microbiota of normal pregnant women is different from that of non-pregnant women. Microbiome. 2014; 2(1): 4.
  10. Карапетян Т.Э. Акушерская и перинатальная патология при вагинальной инфекции и дисбиозе: дисс. … д-ра мед. наук. М.; 2014.
  11. Hammond B., Enriquez F., Wilstermann A. Role of bacteria in the premature rupture of fetal membranes. Science Division and McGregor Summer Research Poster Fair, October 19, 2012.
  12. Roberton A.M., Wiggins R., Horner P.J., Greenwood R., Crowley T., Fernandes A.et al. A novel bacterial mucinase glycosulfatase is associated with bacterial vaginosis. J. Clin. Microbiol. 2005; 43(11): 5504-8.
  13. Cauci S., Driussi S., Monte R., Lanzafame P., Pitzus E., Quadrifoglio F. Immunoglobin A response against Gardnerella vaginalis hemolysin and sialidase activity in bacterial vaginosis. Am. J. Obstet. Gynecol. 1998; 178(3): 511-5. Given this, along with the importance of glycoproteins to the integrity, growth and function of vaginal epithelial cells, disruption of the mucin-layer may predispose hosts to further complications, such as those currently associated with BV, including an increased risk of infection with HIV and other sexually transmitted diseases
  14. Cauci S., Culhane J.F. High sialidase levels increase preterm birth risk among women who are bacterial vaginosis-positive in early gestation. Am. J. Obstet. Gynecol. 2011; 204(2): 142. e1-9.
  15. Zeng L.N., Zhang L.L., Shi J., Gu L.L., Grogan W., Gargano M.M., Chen C. The primary microbial pathogens associated with premature rupture of the membranes in China: A systematic review. Taiwan. J. Obstet. Gynecol. 2014; 53(4): 443-51.
  16. Ljungh A., Wadstrom T. Lactobacillus. Molecular biology from genomics to probiotics. Causter Academic Press, UK; 2009. 205 с.
  17. Мелкумян А.Р., Припутневич Т.В., Анкирская А.С., Трофимов Д.Ю., Муравьева В.В., Муллабаева С.М., Завьялова М.Г. Видовой состав лактобактерий при различном состоянии микробиоты влагалища у беременных. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2013; 15(1): 73-9.
  18. Меджидова М.К. Течение послеродового периода в зависимости от особенностей микробиоценоза и локального иммунитета влагалища у беременных перед родами: дисс. … канд. мед. наук. М.; 2012.
  19. Verstraelen H., Vilchez-Vargas R., Desimpel F., Jauregui R., Vankeirsbilck N., Weyers S. et al. Characterisation of the human uterine microbiome in non-pregnant women through deep sequencing of the V1-2 region of the 16S rRNA gene. PeerJ. 2016; 4: e1602.
  20. Ghartey J.P., Smith B.C., Chen Z., Buckley N., Lo Y., Ratner A.J. et al. Lactobacillus crispatus dominant vaginal microbiome is associated with inhibitory activity of female genital tract secretions against Escherichia coli. PLoS One. 2014; 9(5): e96659.
  21. Petricevic L., Domig K.J., Nierscher F.J., Sandhofer M.J., Fidesser M., Krondorfer I. et al. Characterisation of the vaginal Lactobacillus microbiota associated with preterm delivery. Sci. Rep. 2014; 4: 5136.

Поступила 07.12.2018

Принята в печать 22.02.2019

Об авторах / Для корреспонденции

Ходжаева Зульфия Сагдуллаевна, д.м.н., профессор, заведующий 1-м отделением акушерским патологии беременности, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им/ академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Тел.: +7(916) 407-75-67. Е-mail: zkhodjaeva@mail.ru
Припутневич Татьяна Валерьевна, д.б.н., заведующий отделом микробиологии, клинической фармакологии и эпидемиологии, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им/ академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Тел. +7(495) 438-25-77. E-mail:t_priputnevich@oparina4.ru
Муравьева Вера Васильевна, к.б.н., с.н.с. лаборатории микробиологии отдела микробиологии, клинической фармакологии и эпидемиологии, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Тел. +7(495) 438-25-77. E-mail: v_muravieva@oparina4.ru
Гусейнова Гюльнара Эльхановна, аспирант 1-го отделения акушерского патологии беременности, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Тел. +7(967) 153-18-81. Е-mail: g_guseynova@oparina4.ru
Горина Ксения Алексеевна, младший научный сотрудник 1-го отделения акушерского патологии беременности, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Тел. +7(495) 438-06-74. Е-mail: kseniagorina@gmail.com
Мишина Наталия Дмитриевна, младший научный сотрудник, лаборатория анализа геномных данных, ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, г. Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Тел. +7(985)217-29-89. E-mail: mis7ha@gmail.com

Для цитирования: Ходжаева З.С., Припутневич Т.В., Муравьева В.В., Гусейнова Г.Э., Горина К.А., Мишина Н.Д. Оценка состава и стабильности микробиоты влагалища у беременных в процессе динамического наблюдения. Акушерство и гинекология. 2019; 7:30-8.
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2019.7.30-38

Полный текст публикаций доступен только подписчикам

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь