Определение свободной эмбриональной ДНК в плазме крови беременных для неинвазивной пренатальной генетической диагностики

Необходимость своевременной постановки диагноза с минимальным риском для матери и плода определяет актуальность неинвазивной пренатальной диагностики. Выявление свободной (внеклеточной) эмбриональной ДНК, циркулирующей в плазме крови матери, открыло новые возможности неинвазивной генетической диагностики плода и состояния беременности. Эмбриональная ДНК может быть обнаружена на 5–6 нед гестации и быстро исчезает после родов. Современные молекулярно-биологические технологии исследования этой ДНК позволяют прогнозировать осложнения беременности, определять пол и резус плода, диагностировать генные и хромосомные мутации.

Необходимость своевременной постановки диагноза с минимальным риском для матери и плода определяет актуальность разработки и внедрения методов неинвазивной пренатальной диагностики. Инвазивные методы пренатальной диагностики, обладая высокой информативностью, тем не менее повышают риск прерывания беременности, особенно у женщин с осложненным течением гестационного процесса. Согласно данным английских авторов, за период 2002–2003 гг.всвязисразличнымипоказаниями у 30 тыс. женщин проведена процедура амниоцентеза, у 8 тыс. – хориоцентеза, что привело к самопроизвольному прерыванию 460 желанных беременностей с нормальным кариотипом плода [16]. При выполнении этих процедур даже опытными специалистами риск потери беременности составляет около 1–2% [15]. С целью ранней постановки генетического диагноза и снижения риска самопроизвольного прерывания беременности в различных лабораториях проводились поиски неинвазивных методов пренатальной диагностики.

Еще в 1893 г. G. Schmorl впервые высказал предположение, что клетки плодового происхождения
могут проникать в кровь матери [36]. Эта гипотеза основывалась на обнаружении клеток плацентарного происхождения в легочной ткани женщин, умерших от эклампсии. Только во второй половине ХХ века эти клетки начали активно использовать для выявления анеуплоидии и хромосомных
аберраций у плода. Однако это направление не получило широкого распространения в связи с
тем, что эмбриональных клеток в кровотоке матери мало (1–6 на мл крови) и они продолжают циркулировать в крови женщины многие годы и после окончания беременности, что может приводить к ложно-позитивным результатам при последующих беременностях [4].

Выявление в 1997 г. свободной (внеклеточной) эмбриональной ДНК (сэ-ДНК), циркулирующей в плазме крови матери, открыло новые возможности неинвазивной пренатальной генетической диагностики плода во время беременности [27]. При физиологической беременности от 3 до 6% всей свободной ДНК в материнской плазме имеет эмбриональное происхождение. Она может быть обнаружена уже на 4–5 нед беременности и ее количество нарастает до родов [28]. В отличие от эмбриональных клеток сэ-ДНК быстро исчезает из материнской плазмы после родов. Сэ-ДНК имеет период полужизни 16 мин и не определяется уже через 2 ч после родоразрешения, что указывает на ее специфичность конкретно для данной беременности.

Имеются убедительные доказательства тому, что сэ-ДНК имеет плацентарное происхождение
и поступает в кровь беременной вследствие плацентарного апоптоза [22, 23, 32]. В пользу этого
говорят результаты исследований, согласно которым сэ-ДНК выявляется еще до установления фетоплацентарного кровотока [35], а также при анэмбрионии [1]. Более того, проведение лазерной аблации анастамозов в плаценте сопровождается увеличением концентрации сэ-ДНК в кровотоке беременной [40]. Согласно результатам другого исследования, отцовский аллель, присутствующий в плаценте с подтвержденным генетическим мозаицизмом, выявлялся в материнской плазме, но отсутствовал у новорожденного, что также свидетельствует о плацентарном происхождении сэ-ДНК [29].

В связи с этим логично предположить, что различные нарушения состоян...

Тетруашвили Н.К., Федорова Н.И., Файзуллин Л.З., Карнаухов В.Н.